王亞敏，謝夢洲，2，張超文，瞿昊宇，向 茗，朱建平，肖作為

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南省藥食同源功能性食品工程技術(shù)研究中心，湖南長沙410208;2.抗腫瘤中藥創(chuàng)制技術(shù)湖南省工程研究中心，湖南長沙410007）

1 灰樹花生物學(xué)概述

灰樹花（Griflola frondosa）是一種珍稀的藥食兩用真菌，主要生長在亞熱帶至溫帶。在日本稱其為舞茸，也有些國內(nèi)著作中稱其為貝葉多孔菌，民間也有稱千佛菌、栗蘑。我國較早的權(quán)威專著《中國的真菌》中以“灰樹花”為中文名稱，因此成為國內(nèi)通用的漢語名稱[1]。

灰樹花味如雞絲，肉質(zhì)脆嫩，營養(yǎng)也非常豐富，且含有多種生物活性物質(zhì)，是一種營養(yǎng)又美味的藥食兩用食材。由于其產(chǎn)量大、栽培簡單，目前在全世界各地廣泛分布。在我國河北、浙江、四川、吉林、福建等省均有分布，并且在浙江慶元縣、河北遷西縣等省已實(shí)現(xiàn)規(guī)?；耘?，產(chǎn)量逐年增加?！皯c元灰樹花”在2014年獲得農(nóng)業(yè)部第3批農(nóng)產(chǎn)品地理標(biāo)志認(rèn)證[2-3]。

2 古代文獻(xiàn)記載

灰樹花在我國民間有著悠久的食用歷史，并在公元2世紀(jì)的《太上靈寶芝草品》中就有配圖及文字記載，書中稱灰樹花為白玉芝，并詳細(xì)描述了灰樹花的形態(tài)特征。宋代的陳仁玉也在《菌譜》記錄了灰樹花是一種食用菌，“味甘、平、無毒，可治痔瘡”。關(guān)于灰樹花在日本文獻(xiàn)中最早的記載出現(xiàn)于《溫故齋菌譜》中，書中對灰樹花的繪圖和描述，可以確認(rèn)其為灰樹花無疑。日本學(xué)者貝原益軒于1709年首次在學(xué)術(shù)上研究了舞茸（灰樹花），并指出其有“潤肺保肝，扶正固本”的功效。1941年，向坂正次于我國東北地區(qū)采收標(biāo)本后，編著于《滿州野生食用菌植物圖說》一書中[4]。

3 灰樹花現(xiàn)代研究進(jìn)展

灰樹花是一種富含膳食纖維、蛋白質(zhì)、多種礦物質(zhì)元素的食物，被稱為“食用菌王子”“華北人參”[5]?，F(xiàn)代研究認(rèn)為，灰樹花具有抗腫瘤、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、降血糖、降血壓、抗抑郁、抗HIV病毒等作用。中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所和農(nóng)業(yè)部質(zhì)檢中心對其營養(yǎng)素含量進(jìn)行了檢測，證實(shí)灰樹花營養(yǎng)豐富。每100 g干灰樹花中含有蛋白質(zhì)25.2 g，人體所需氨基酸18種，其中人體必需氨基酸占45.5%，精氨酸、賴氨酸，以及與鮮味有關(guān)的門冬氨酸和谷氨酸含量也都比較高，還富含多種有益的礦物質(zhì)和維生素，其中維生素B1（VB1）和維生素E（VE）含量高于一般食用菌。此外，還含有葉酸、乳酸、琥珀酸等多種有機(jī)酸，能促進(jìn)兒童身體健康成長和智力發(fā)育[6]。

3.1 灰樹花抗腫瘤相關(guān)活性及應(yīng)用研究

灰樹花的抗腫瘤作用發(fā)揮主要依靠提高機(jī)體自身的免疫力，不是直接殺死腫瘤細(xì)胞，其作用主要表現(xiàn)在抑制腫瘤細(xì)胞生長和轉(zhuǎn)移，防止正常細(xì)胞癌變，以及與放射療法和化學(xué)療法協(xié)同發(fā)揮作用，提高癌癥的治療效果與降低放療、化療的副作用等方面[7]?；覙浠ㄖ兄饕纳锘钚猿煞质嵌嗵穷愇镔|(zhì)，灰樹花多糖（Polysaccharides of griflola frondosa，PGF）是灰樹花中最主要的一類活性成分，它主要來源于灰樹花的子實(shí)體與菌絲體或發(fā)酵液中分離得到的一類富含β-1,6-糖苷鍵及β-1,3-糖苷鍵的真菌多糖[8]，它可以增強(qiáng)機(jī)體免疫力來抑制腫瘤細(xì)胞，并且與其他物質(zhì)發(fā)揮協(xié)同作用誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞死亡。日本的難波宏彰等研究人員從全世界范圍內(nèi)的真菌藥物中挑選出數(shù)十種大型藥用真菌進(jìn)行研究，如靈芝、羊肚菌、香菇、灰樹花、松茸、冬蟲夏草、茯苓、云芝、平菇、猴頭菇等，得出結(jié)論認(rèn)為灰樹花的抗癌效果優(yōu)于其他真菌。從此，針對灰樹花相關(guān)的抗腫瘤研究引起關(guān)注，并在全世界開展開來。也有外國研究人員進(jìn)行了細(xì)胞試驗(yàn)結(jié)果認(rèn)為，灰樹花多糖對腫瘤的抑制率為86.3%，是所有真菌生物活性物質(zhì)中抗腫瘤活性最強(qiáng)的，而香菇多糖、金針菇多糖、雙孢蘑菇多糖、糙皮側(cè)耳多糖的抑制率則分別為77.0%，61.7%，71.3%和62.7%[9]。

胡馨予等人[10]進(jìn)行體外細(xì)胞試驗(yàn)證明，灰樹花提取物可以有效降低PLC/PRF/5和HepG2細(xì)胞存活率，提高細(xì)胞乳酸脫氫酶釋放，并進(jìn)一步用BALB/c雄性裸小鼠腋下接種肝癌PLC/PRF/5細(xì)胞，經(jīng)試驗(yàn)證明，灰樹花可有效抑制在 PLC/PRF/5異位荷瘤裸鼠模型中腫瘤的生長。Zhao F等人[11]以人肝癌SMMC-7721和HepG2細(xì)胞進(jìn)行了體外細(xì)胞凋亡和自噬試驗(yàn)，經(jīng)過測定發(fā)現(xiàn)，灰樹花多糖與VC聯(lián)合應(yīng)用能夠誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721和HepG2細(xì)胞凋亡和自噬，為灰樹花多糖聯(lián)合用藥的體內(nèi)研究奠定了前期的研究基礎(chǔ)。Lin C等人[12]通過體內(nèi)和體外研究發(fā)現(xiàn)灰樹花的冷水提取物可以通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞自噬和凋亡來抑制肝癌的生長，而且冷水提取物的抗肝癌細(xì)胞效應(yīng)優(yōu)于熱水提取物。

在灰樹花的功能研究方面，Kodama N等人[13]認(rèn)為是灰樹花中的MD-組分，可以刺激免疫細(xì)胞的活性，從而表現(xiàn)出強(qiáng)勁的抗癌作用，并進(jìn)行了臨床試驗(yàn)，其中有68.9%的乳腺癌患者、62.5%的肺癌患者和58.2%的肝癌患者的腫瘤縮小，臨床癥狀也得到了極大的改善。Zhang Y等人[14]進(jìn)行了灰樹花多糖在乳腺癌方面的活性和機(jī)制研究，先在體外做了MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞試驗(yàn)，后進(jìn)行裸鼠 MCF-7腫瘤移植體內(nèi)試驗(yàn)，結(jié)果證明灰樹花多糖是通過線粒體依賴性途徑誘導(dǎo)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞凋亡。

李小定等人[15]經(jīng)試驗(yàn)證明，熱水提取所得灰樹花粗多糖與經(jīng)純化后多糖均能抑制荷瘤小鼠S180肉瘤的生長，同時能提高小鼠免疫器官的質(zhì)量，但灰樹花粗品中可能由于比純品中保留更具抑瘤活性的多糖，且各種活性多糖也可能具有協(xié)同作用，因此比純品抑制腫瘤的作用更強(qiáng)。Vetvicka V等人[16]給小鼠喂食灰樹花β-葡聚糖單獨(dú)組、香菇粉單獨(dú)組和灰樹花β-葡聚糖加香菇粉組，以測量吞噬作用、NK細(xì)胞活性和分泌il-6，il-12，IFN-γ以及C反應(yīng)蛋白（CRP），發(fā)現(xiàn)三者都有顯著的防御反應(yīng)刺激，而灰樹花-香菇組合＞灰樹花單獨(dú)＞香菇粉單獨(dú)，這為藥食用真菌的聯(lián)合應(yīng)用提供了依據(jù)。劉佳等人[17]經(jīng)過動物試驗(yàn)對比灰樹花子實(shí)體粗粉與超微粉對Hep-A-22荷瘤小鼠的抑瘤作用發(fā)現(xiàn)，兩者均具有抑制腫瘤生長的作用，且腫瘤抑制效果具有明顯的量效關(guān)系，超微粉高劑量組抑瘤率51.05%，粗粉高、劑量組抑瘤率為44.21%，灰樹花超微粉高劑量組（1 500 mg/kg） 抑瘤效果最佳。Chen X D等人[18]的研究表明，低分子量的灰樹花多糖具有更好的抗腫瘤活性。Ting Z等人[19]對比發(fā)現(xiàn)酶解處理后提取的灰樹花多糖（FGFP）比熱水浸提提取的灰樹花多糖（GFP）表現(xiàn)出更強(qiáng)的羥基自由基、DPPH自由基和2,2-azino-bis（3） -乙基苯并噻唑-6磺酸（ABTS） 自由基的清除力，但是該課題并沒有進(jìn)行抗腫瘤方面的試驗(yàn)。因此，粗多糖和純化后的多糖抗腫瘤活性還需要更加周密的試驗(yàn)設(shè)計進(jìn)行對比。

3.2 灰樹花在腫瘤治療中的輔助作用研究

腫瘤患者在放化療后常會降低或破壞免疫系統(tǒng)，而灰樹花多糖能幫助免疫細(xì)胞保持最佳活性而最大限度地減少化療引起的不良反應(yīng)，通過臨床的試驗(yàn)研究，應(yīng)用灰樹花多糖90%的患者惡心、脫發(fā)等不良反應(yīng)減輕，有83%的患者疼痛減輕[20]。顏燕等人[21]通過對正常ICR小鼠后60Co-γ射線進(jìn)行1次全身照射后連續(xù)30 d灌胃給予灰樹花多糖，并在輻照前后進(jìn)行外周血白細(xì)胞計數(shù)，輻照后骨髓細(xì)胞DNA含量檢測和血清超氧化物歧化酶（SOD）活力測定，結(jié)果顯示灰樹花多糖能增強(qiáng)小鼠的體液免疫和細(xì)胞免疫功能，以及單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能，并使外周血白細(xì)胞數(shù)和骨髓細(xì)胞DNA含量增加，血清超氧化物歧化酶（SOD）活力明顯增強(qiáng)，說明灰樹花多糖對輻射損傷具有一定的防護(hù)作用。

賀長生等人[22]將灰樹花多糖通過灌胃給藥來測試對消炎痛所致胃黏膜損傷模型的輔助保護(hù)作用。結(jié)果表明，灰樹花多糖能夠顯著降低胃黏膜的損傷程度，為灰樹花多糖在緩解腫瘤患者的胃腸道癥狀方面的應(yīng)用是一個重要的啟示。此外，雷萍等人[23]也通過試驗(yàn)證實(shí)對脾虛癥灰樹花多糖也有良好的效果，他們連續(xù)10 d給脾虛模型小鼠腹腔注射純度為45%的灰樹花多糖，結(jié)果發(fā)現(xiàn)灰樹花中、高劑量組可以改善脾虛時所致的CD4+/CD8+T細(xì)胞比值降低，使Th2細(xì)胞向Th1細(xì)胞轉(zhuǎn)化，從而達(dá)到改善脾虛癥的目的。

腫瘤患者在患病期間，由于對疾病的恐懼和各種治療引起的不安，情志會受到很多負(fù)面的影響，導(dǎo)致情緒抑郁，但是抗抑郁的藥物又大多會才產(chǎn)生更多的副作用，Bao H等人[24]將灰樹花子實(shí)體粉末摻進(jìn)鼠料中喂給CD-1小鼠并進(jìn)行尾懸液試驗(yàn)（TST）、強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)（FST） 和曠場試驗(yàn)（OFT） 發(fā)現(xiàn)，灰樹花有顯著的抗抑郁效果，且可能通過AMPA突觸傳遞的增強(qiáng)抗抑郁作用。這一發(fā)現(xiàn)對新型抗抑郁劑的開發(fā)有很大影響，通過使用藥物或食物增強(qiáng)的AMPA受體信號來治療抑郁癥。而灰樹花是一種安全的可食用蘑菇，這也提示患者治療抑郁癥時可以食用灰樹花作為膳食補(bǔ)充，而對于腫瘤患者來說更是一舉多得的良好途徑。

針對灰樹花的研究越來越廣泛，對灰樹花其他功能的發(fā)現(xiàn)也說明灰樹花能從多個方面提高患者的生活質(zhì)量，Chen Z等人[25]通過莫里斯水迷宮試驗(yàn)觀察灰樹花多糖對老齡大鼠的記憶力影響，結(jié)果表明，灰樹花多糖對于改善老年大鼠的記憶損傷有明顯的幫助，并通過進(jìn)一步機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)，口服灰樹花多糖可以提高機(jī)體的抗氧化作用，以此來改善記憶力的受損，提示灰樹花多糖作為膳食補(bǔ)充可以預(yù)防大腦的退化。曹素芳等人[26]以灰樹花、黃芪和靈芝、精制蜂膠制得灰樹花復(fù)方制劑灌胃給予四氧嘧啶誘導(dǎo)的高血糖小鼠，發(fā)現(xiàn)模型組有明顯的抑制空腹血糖升高和提高糖耐量的作用，而正常小鼠的空腹血糖和體重并未受到顯著影響，由此可知，灰樹花復(fù)方制劑具有降血糖的作用。

4 灰樹花產(chǎn)品開發(fā)現(xiàn)狀及思考

灰樹花的功效性和安全性越來越被認(rèn)可，以灰樹花為原料開發(fā)的普通食品、保健食品也逐漸進(jìn)入市場，如鄧功成等人[27]研制的灰樹花風(fēng)味酸奶，以鮮牛奶和灰樹花菌絲體發(fā)酵菌液為原料，加入保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌發(fā)酵的酸奶具有特有的菇味清香、口感酸甜適口、凝乳均勻、色澤淡黃。李佳等人[28]采用灰樹花發(fā)酵勻漿濾液為主要原料，經(jīng)過發(fā)酵制成了灰樹花保健飲料。目前已上市的加入灰樹花的保健食品主要有增強(qiáng)免疫力類、抗疲勞類、延緩衰老類、調(diào)節(jié)血糖類、抗輻射類等，如“維吉爾膠囊”是以灰樹花提取物和淀粉為原料的免疫調(diào)節(jié)和抗輻射的保健食品；也有以多種真菌為原料復(fù)配的產(chǎn)品，如以香菇、靈芝、姬松茸、灰樹花等提取物為原料通過工藝加工的“丞燕牌紐益特固體飲料”，或者將幾種真菌的子實(shí)體破壁處理制得的“益加生物牌瑞嘉膠囊”；還有與中藥提取物配伍的“之本牌愛康軟膠囊”，是以灰樹花提取物、香菇提取物、黃芪提取物等為原料，含姬松茸破壁粉、灰樹花破壁粉、靈芝破壁孢子粉等。在灰樹花的原料利用中也分灰樹花菌絲體、子實(shí)體、提取物幾種，大多數(shù)產(chǎn)品都是以幾種大型真菌混合配伍而開發(fā)的，這說明開發(fā)和利用各種藥食用真菌已成為產(chǎn)品開發(fā)的熱點(diǎn)。

灰樹花的抗腫瘤活性、免疫活性、抗氧化活性等已得到全世界范圍內(nèi)不斷的關(guān)注和研究，不愧于“抗癌奇葩”的美譽(yù)，而其他的功效（如保護(hù)胃黏膜、抗抑郁、減輕放化療的副反應(yīng)等） 使其在腫瘤的防治中的價值更為突顯，灰樹花作為傳統(tǒng)的藥食兩用真菌，從中醫(yī)方面的功效來說其“扶正固本”的作用也通過試驗(yàn)研究得到有力的佐證，灰樹花抗癌的作用在肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌方面都有相關(guān)的試驗(yàn)研究支持，但其他癌癥相關(guān)功效報道較少或表現(xiàn)不突出，對灰樹花的應(yīng)用研究也不應(yīng)該局限于前人的研究范圍，可在中醫(yī)理論的指導(dǎo)下合理組方配伍，充分發(fā)揮灰樹花的作用，拓展其應(yīng)用范圍。灰樹花健康美味的特性也為灰樹花相關(guān)藥膳產(chǎn)品提供了良好的開發(fā)思路，對灰樹花多糖的提取與應(yīng)用使開發(fā)功效顯著、營養(yǎng)美味的藥膳產(chǎn)品有了更大的空間。