趙瑞華，任桂梅，賀曉龍，劉月芹

(1.延安大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，陜西 延安 716000；2.陜西省紅棗重點實驗室,陜西 延安 716000)

南泥灣野生羊肚菌是陜北重要的生物資源，在充分發(fā)揮保護植被等生態(tài)效益的同時，還給當(dāng)?shù)剞r(nóng)民增收創(chuàng)造了條件。研究野生羊肚菌資源，對保護當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)系統(tǒng)和發(fā)展當(dāng)?shù)亟?jīng)濟具有重要的生態(tài)價值以及經(jīng)濟價值。作者通過總結(jié)前人及課題組的研究進展分析了南泥灣野生羊肚菌資源的研究現(xiàn)狀，指出了存在的問題，并提出相關(guān)研究對策，為南泥灣野生羊肚菌資源可持續(xù)利用發(fā)展提供一定的參考價值。

1 南泥灣野生羊肚菌資源研究現(xiàn)狀

1.1 種類

南泥灣有豐富的野生羊肚菌種質(zhì)資源，已報道過的種類主要有尖頂羊肚菌(M.conica)、粗柄羊肚菌(M.crassipes)、黑脈羊肚菌(M.angusticeps)、小羊肚菌(M.deliciosa)、普通羊肚菌(M.esculenta)。其中以尖頂羊肚菌、粗柄羊肚菌和普通羊肚菌三種為最多見。至于有沒有其他種類，還需要做詳盡的調(diào)查研究工作。

1.2 分布與發(fā)生季節(jié)

野生羊肚菌在南泥灣地區(qū)分布范圍廣泛，從海撥900 mm的溪溝、草灘到海撥1 500 m的山坡丘嶺的混交林間均有分布。普遍發(fā)生于柳、楊、棟樹等闊葉林中稀疏的裸露林間草地上或已腐朽的樹根部及其周圍。在砍伐后的老林，重建20～30 a的再生林中也較多發(fā)生。尖頂羊肚菌、粗柄羊肚菌、黑脈羊肚菌、小羊肚菌多分布在陰坡或樹木茂密的林中，普通羊肚菌多發(fā)生在向陽通風(fēng)的灌木或白楊林帶邊緣。南泥灣地區(qū)的野生羊肚菌多單生，也有叢生和群生等方式。南泥灣每年至少有一次羊肚菌發(fā)生，首次發(fā)生時間多集中在4月上旬至5月中旬，該期發(fā)生的羊肚菌時間一般較長、種類較多且數(shù)量大。有些年份，一年內(nèi)有兩次羊肚菌發(fā)生，第二次發(fā)生時間集中在8月底至10月初，但該期發(fā)生的羊肚菌時間短、種類少且數(shù)量少。雨水充足的年份，羊肚菌長勢好、產(chǎn)量高。同一年份中，羊肚菌先發(fā)生在植被復(fù)雜的林下及林緣草地上，且分布量明顯大于其他地方，隨著氣溫的升高，羊肚菌會陸續(xù)出現(xiàn)在闊葉林、針葉林、混交林的林下草地上。從現(xiàn)蕾到子實體成熟，一般需一周左右的時間，當(dāng)?shù)販爻^15℃時，羊肚菌的自然發(fā)生數(shù)量會逐漸減少。

1.3 生態(tài)環(huán)境與生長條件

羊肚菌屬于低溫、好氧型食藥用真菌，環(huán)境因素是影響其生長發(fā)育的關(guān)鍵，主要有：空氣、光照、溫濕度和土壤。①空氣與光照：羊肚菌正常生長需要良好的通風(fēng)場所和充足的氧氣，但羊肚菌屬的不同種類，對光照和氧氣的需求是不同的。普通羊肚菌多發(fā)生于散射光透入較多、通風(fēng)又好的向陽稀疏林地的山坡及林地邊緣處。其余幾個種則發(fā)生在有較少散射光透入，和前者相比通風(fēng)也較差的環(huán)境中。②溫濕度：羊肚菌子實體生長階段，氣溫為10～16℃，空氣相對濕度為85%左右，土壤含水量約為50%，如果平均氣溫超過16℃，子實體長速減慢，羊肚菌多數(shù)已遭到害蟲的侵襲，品質(zhì)變差。③土壤：南泥灣野生羊肚菌多發(fā)生在黑色、富含林木落葉、腐殖質(zhì)比較豐富的疏松沙壤土中，一般在4～6 cm土壤深處，與土塊相連扭結(jié)成塊狀，從土塊中看不到非常明顯的菌絲。在多年羊肚菌發(fā)生頻繁，且數(shù)量較多生長良好的環(huán)境中，采集該地的土壤樣品，經(jīng)測定，pH值為6.5～7.5。也有研究報道，在陜北地區(qū)野生羊肚菌的發(fā)生對土壤條件并沒有特別的要求[1]。

1.4 馴化研究

Repin將羊肚菌菌絲體播種在經(jīng)過堿性處理的土地上，得到羊肚菌子實體，這是首例人工羊肚菌栽培案例。Ower et al.(1989)發(fā)明了針對黃色羊肚菌單個種的栽培方法[2]。而后我國學(xué)者也培養(yǎng)出了羊肚菌的子實體。目前我國廣泛人工栽培的菌種有黑色羊肚菌類群的六妹羊肚菌(M.sextelata)、七妹羊肚菌(M.setimelata)、梯菱羊肚菌(M.importuna)、變紅羊肚菌(M.rufobrunnea)和黃色羊肚菌類群的粗柄羊肚菌(M.crassipes)，其中梯菱羊肚菌和六妹羊肚菌在我國栽培量位于前列[3]。

南泥灣野生羊肚菌人工馴化栽培處于探索階段。課題組對該地野生羊肚菌產(chǎn)區(qū)與非產(chǎn)區(qū)的環(huán)境條件、土壤成分及酸堿度等進行分析比較，找出了影響其生長的相關(guān)因子[1]。在此基礎(chǔ)上以南泥灣特有的野生羊肚菌品種為研究對象，從數(shù)百個野生羊肚菌子實體中經(jīng)過母種分離，純化、復(fù)壯、篩選試驗，共得9個純化菌株，再對其進行進一步的篩選，最終獲得3株性狀優(yōu)良的純種(編號分別為：M延-5，M延-8，M延-12)。并對菌株菌絲體生長所需碳源、氮源、無機鹽以及菌絲體生長pH值等方面進行了研究，篩選出適合其生長的最佳碳源、氮源、無機鹽濃度，同時找出了pH值的變化與菌絲體產(chǎn)量的關(guān)系并將pH值作為監(jiān)測培養(yǎng)過程中發(fā)酵終點的指標(biāo)，為羊肚菌的后續(xù)研究奠定了基礎(chǔ)[4, 5, 6, 7, 8]；對不同生長期的子實體及菌絲體進行酯酶同工酶分析，同時對菌絲體液體發(fā)酵培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的胞外酶(淀粉酶、漆酶、CMC酶、纖維素酶及愈創(chuàng)木酚氧化酶)活性進行分析研究，找出了酶活規(guī)律及其親緣關(guān)系，為陜北地區(qū)羊肚菌的種質(zhì)資源分類提供了科學(xué)依據(jù)[9, 10]；此外，還進行過羊肚菌顆粒菌種的制備及人工栽培方面的初步試驗，兩株篩選品系人工瓶栽長出了子實體[11]。

2 存在的問題

2.1 分類處于形態(tài)學(xué)水平

目前，對南泥灣野生羊肚菌的分類主要依據(jù)子實體、菌絲、子囊和子囊孢子的形態(tài)特征進行分類，還處于形態(tài)學(xué)水平。然而，南泥灣的獨特氣候和地理環(huán)境造就了野生羊肚菌物種豐富的遺傳多樣性，子實體的形態(tài)特征在不同發(fā)育階段也不穩(wěn)定，加上現(xiàn)有資料對羊肚菌的形態(tài)特征描述不詳，很容易造成同名不同菌及同菌不同名。對無相應(yīng)形態(tài)描述的某些標(biāo)本，根據(jù)現(xiàn)在資料無法鑒定是否為新種。

2.2 人工馴化栽培進展緩慢

我國存在30個系統(tǒng)發(fā)育學(xué)種，其中黑色羊肚菌類群13個，黃色羊肚菌類群17個，其中20種僅限于我國，且有多個品種實現(xiàn)了人工栽培。其中梯棱羊肚菌(1號和3號)、六妹羊肚菌和七妹羊肚菌三個品種，在云南、四川等地已經(jīng)實現(xiàn)大規(guī)模人工栽培，但陜北地區(qū)羊肚菌的人工栽培處于摸索時期，還沒有實現(xiàn)大規(guī)模人工栽培。對南泥灣野生羊肚菌的人工馴化栽培工作進展緩慢，雖然也從該地野生羊肚菌中篩選得到幾株純種，但缺乏和當(dāng)前廣泛栽培品系的優(yōu)勢比較試驗，也未進行推廣栽培。

2.3 過渡采挖致資源破壞嚴重

因為羊肚菌價格較高，利益驅(qū)使農(nóng)民在出菇季節(jié)不管子實體成熟與否瘋狂采挖，采挖之后不注意掩埋，地表被過度踩踏，使表層土壤中的菌絲體受傷，還未恢復(fù)生長，下次采挖又被踩傷，造成出菇潮次的時間間隔延長，出姑潮次減少，產(chǎn)量下降；由于過度采挖，多數(shù)子實體總是達不到生理成熟，結(jié)果沒有大量成熟的孢子釋放到自然環(huán)境中，造成羊肚菌播種量變少，影響了產(chǎn)量，也限制了分布區(qū)域。這樣年復(fù)一年不正確的采挖方式最終造成總產(chǎn)量逐漸下降。并且年年“掃雷式”輪番采挖，使野生羊肚菌生長的生態(tài)環(huán)境也面臨破壞的危險。

3 研究對策

3.1 資源遺傳多樣性研究及系統(tǒng)調(diào)查

據(jù)調(diào)查，南泥灣各生態(tài)區(qū)域基本都發(fā)生過野生羊肚菌，但是目前己有的研究中欠缺對該資源的遺傳多樣性分析及系統(tǒng)調(diào)查。借助傳統(tǒng)生物學(xué)和現(xiàn)代分子生物學(xué)方法對該地區(qū)野生羊肚菌品系進行鑒定，探討該地區(qū)野生羊肚菌的分類地位及其系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系，分析自然居群遺傳多樣性，揭示南泥灣野生羊肚菌種質(zhì)資源遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)，解決南泥灣野生羊肚菌分類中同名不同菌及同菌不同名的問題，進一步選育南泥灣野生羊肚菌優(yōu)良品系，加快該地野生羊肚菌人工馴化栽培的步伐。

3.2 營養(yǎng)及藥用成分研究

很多研究報道，羊肚菌菌絲體和子實體都有很高的食藥用價值，二者均含有豐富的營養(yǎng)及藥用成分。通過研究發(fā)現(xiàn)羊肚菌的營養(yǎng)成分相當(dāng)豐富，含有蛋白類化合物約20%、脂肪類化合物約30%、糖類化合物約40%，其菌絲體和子實體還含有豐富的礦物元素及大量人體所必需的微量元素[12, 13]。己有國內(nèi)外的研究人員從羊肚菌中提取分離到多種藥用成分，例如：抗病毒、抗菌活性成分、黑色素形成的酪氨酸抑制劑及血小板聚集抑制因子等[14, 15]。此外，研究還發(fā)現(xiàn)羊肚菌富含纖維素酶γ-谷氨酞轉(zhuǎn)膚酶等活性成分[16]。但至今沒有南泥灣野生羊肚菌營養(yǎng)和藥理活性成分的研究報道。

3.3 人工馴化和合理開發(fā)利用

羊肚菌具有極好地人工栽培前景。雖有獲得專利和人工栽培成功的報道，但因為其子實體生長發(fā)育的生理特性不清楚，所以商業(yè)化栽培的進程非常緩慢。對此，應(yīng)在基因分子水平上予以闡明，揭示其生理特性，加快人工栽培過程，解決羊肚菌子實體的供求矛盾。雖然本課題組在野生羊肚菌菌種篩選方面己經(jīng)取得了一定的成績，但還需進一步的研究，篩選馴化適合人工栽培的優(yōu)良品系；以篩選出來的品系和廣泛栽培的品系為試材，從菌絲生長特性、出菇特性、生物轉(zhuǎn)化率和商品性狀等方面進行對比試驗，在陜北地區(qū)推廣種植優(yōu)良南泥灣羊肚菌品系。同時制定合理開發(fā)利用的規(guī)劃，研究表明菌絲體營養(yǎng)成分與子實體相近，開展羊肚菌的深層發(fā)酵培養(yǎng)，用其代替子實體開發(fā)研制保健品和飲料，具有周期短等特性，可代替野生羊肚菌，減少用量，從而有效地限制采挖。

3.4 開發(fā)利用應(yīng)與資源保護相結(jié)合

南泥灣野生羊肚菌常年處于自生自滅的野生狀態(tài)，產(chǎn)量比較低，加之近年來人們輪番式采挖，嚴重破壞了南泥灣野生羊肚菌種質(zhì)資源，造成產(chǎn)量連年下降，其中部分種類已不多見，面臨滅絕的境地，單靠采集野生羊肚菌己經(jīng)無法滿足人們的需求。必須加強對羊肚菌野生資源及其生態(tài)環(huán)境的保護，使這種寶貴的野生資源開發(fā)利用進入良性循環(huán)。資源合理開發(fā)與生態(tài)保護是各級政府的重要工作，是一項長期艱巨的任務(wù)，它涉及的范圍廣，分管的部門多，因此，政府要牽頭，制定保護措施，分工負責(zé)落實；做好宣傳教育工作，使公民認識到對當(dāng)?shù)匾吧Y源與生態(tài)保護的重要性，加強對南泥灣野生羊肚菌資源的保護意識。