趙姝嫻
(內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)職業(yè)技術(shù)學(xué)院 014109)
現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)發(fā)展迅速,并隨著相關(guān)學(xué)者對該技術(shù)研究的進(jìn)一步深入,越來越多人開始將關(guān)注的重點(diǎn)放在臨床獸醫(yī)學(xué)上,通過分子生物學(xué)技術(shù)可以有效解決傳統(tǒng)臨床獸醫(yī)學(xué)的不足,具有技術(shù)先進(jìn)性。
從現(xiàn)有技術(shù)的發(fā)展情況來看,DNA 酶切圖譜技術(shù)可以通過特定限制性酶消化DNA 長鏈,獲得核酸片段。在這個(gè)過程中,考慮到不同DNA 的微陣列存在差異,因此,在技術(shù)應(yīng)用階段,更多學(xué)者希望通過該技術(shù)來獲得不同長短的DNA 鏈片段;而DNA 鏈片段可以通過膠凝電泳完成分離后,結(jié)合各種已知的分子量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,最終計(jì)算出不同片段分子量數(shù)據(jù)。目前在臨床獸醫(yī)學(xué)上,該方法已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用,如針對牲畜的某一個(gè)基因點(diǎn)發(fā)生突變后,所引起的一系列限制酶識別點(diǎn)改變,可以通過該方法完成識別,獲得牲畜病變的具體信息。
DNA 微陣列技術(shù)又被稱為生物芯片技術(shù),是目前分子生物學(xué)領(lǐng)域的熱門技術(shù)之一,該技術(shù)應(yīng)用的要點(diǎn)是在一個(gè)小片固定相基質(zhì)上獲得大量高密度的DNA 片段,這些片段可以用來構(gòu)建微陣列;通過對該微陣列進(jìn)行檢測,通過分子雜交技術(shù)直接將微陣列與熒光標(biāo)記標(biāo)本進(jìn)行雜交,雜交結(jié)束并洗滌后,通過激光共聚焦纖維掃描儀聯(lián)合微機(jī)處理技術(shù)就可以獲得詳細(xì)的檢測結(jié)果[1]。
從技術(shù)應(yīng)用的現(xiàn)狀來看,在臨床獸醫(yī)學(xué)上,通過DNA 微陣列技術(shù)能完成大范圍的病微生物檢測機(jī)器組織配型情況;也有部分地區(qū)通過該技術(shù)完成了牲畜基因突變與多態(tài)性檢測,這是傳統(tǒng)技術(shù)所不具備的。
PCR 技術(shù)實(shí)際上屬于一種體外模仿DNA 復(fù)制過程的技術(shù),在臨床獸醫(yī)學(xué)上,通過PCR 技術(shù)可以大量復(fù)制出原本數(shù)量較少的DNA,因此,可以為疾病診斷治療提供便利[2]。根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)手段可知,通過PCR 技術(shù)能從牲畜的一滴血、一根毛發(fā)中擴(kuò)增出數(shù)量足夠的DNA 用于病理學(xué)分析。但傳統(tǒng)的PCR 技術(shù)在應(yīng)用中存在結(jié)果重復(fù)性差、可靠性低等問題,很多學(xué)者在原有技術(shù)的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn),提出了很多具有操作性的技術(shù),包括定量PCR 技術(shù)、巢式PCR 技術(shù)等,這些技術(shù)地出現(xiàn)在一定程度上彌補(bǔ)了傳統(tǒng)PCR 技術(shù)的不足,提高了技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值。
豬流行性腹瀉病毒會導(dǎo)致豬出現(xiàn)嘔吐、脫水等癥狀,屬于一種高度接觸性腸道傳染病,會對養(yǎng)豬業(yè)造成巨大損失。針對豬流行性腹瀉病毒的危害,可以通過分析生物學(xué)技術(shù)尋找一種新的檢驗(yàn)手段。
根據(jù)現(xiàn)有經(jīng)驗(yàn)可知,PCR 技術(shù)在豬流行性腹瀉病毒檢驗(yàn)中具有廣泛的應(yīng)用前景,針對豬流行性腹瀉病毒的特殊性,在技術(shù)應(yīng)用過程中可以通過PCR 方法設(shè)置內(nèi)外兩對引物,在完成兩次擴(kuò)增后對樣本進(jìn)行檢測,該檢測方法可以最大程度上節(jié)省檢測時(shí)間與試劑用量,并且具有較高的敏感性。有學(xué)者在相關(guān)問題研究中通過RCR 技術(shù)的先進(jìn)性,結(jié)合豬流行性腹瀉病毒的特征,構(gòu)建了基因組序列,設(shè)計(jì)并合成針對病毒DNA 的內(nèi)外兩對特異性引物;在實(shí)驗(yàn)階段,通過優(yōu)化反映條件構(gòu)建了巢式PCR 體系,該體系可以對豬傳染性胃腸病毒進(jìn)行有效檢測,并且實(shí)驗(yàn)最終結(jié)果也證明,通過該方法對發(fā)病豬進(jìn)行病毒檢測后,檢測結(jié)果均確診,證明該方法可以被有效地應(yīng)用在病毒檢測中。
除此之外,結(jié)合PCR 技術(shù)的特征,在豬流行性腹瀉病毒檢驗(yàn)中可以在完成最佳條件篩選后,對病毒的敏感性、特異性進(jìn)行識別,最終構(gòu)建一個(gè)可以快速區(qū)分疫苗病株的檢測體系,該體系能識別出不同環(huán)境下的病毒特異性片段,具有技術(shù)先進(jìn)性。
DNA 技術(shù)可以對豬流行性腹瀉病毒的變化情況作出識別,精準(zhǔn)判斷出病豬體內(nèi)的病毒感染情況,且具有極強(qiáng)的特異性。如通過DNA 技術(shù)能基本判斷核苷酸鏈片段的變異情況,并確定哪一位點(diǎn)核苷酸發(fā)生變異和何種核苷酸取代了何種核苷酸;分析病癥結(jié)果可以通過DNA 微陣列技術(shù),在詳細(xì)獲得病豬DNA 資料后構(gòu)建微陣列,依靠分子雜交手段獲得精準(zhǔn)的病毒信息。從效果來看,在DNA 微陣列技術(shù)的支持下,工作人員可以獲得腹瀉病毒因子的基因表達(dá)結(jié)果,并完成基因制圖等,可以幫助工作人員更深層次的了解疾病發(fā)展,有助于及早制定應(yīng)對措施,避免感染范圍擴(kuò)大。
在臨床獸醫(yī)學(xué),分子生物學(xué)技術(shù)具有廣泛的應(yīng)用前景,從目前相關(guān)技術(shù)的發(fā)展情況來看,依靠分子生物學(xué)技術(shù)能更精準(zhǔn)地對獸醫(yī)臨床信息進(jìn)行評估,值得推廣。