卞大偉,肖愛波
(遼寧省農(nóng)業(yè)發(fā)展服務中心,遼寧 沈陽 110003)
鹿腸毒血癥(D e e r Enterotoxemia)是一類由魏氏梭菌引起的鹿急性毒血癥,其病原在胃腸道內(nèi)迅速繁殖并產(chǎn)生大量毒素積聚。發(fā)病快,致死率高,呈地方流行性,對鹿規(guī)模化養(yǎng)殖產(chǎn)生巨大危害,可造成嚴重經(jīng)濟損失。本文就鹿腸毒血癥的病原分類、臨床特征、診斷治療等方面作一綜述。
該病病原為魏氏梭菌,G+染色,兼性厭氧桿菌。無鞭毛,不能運動,有莢膜??蓮V泛分布于土壤、糞便和污水中。不利條件下可產(chǎn)生具有抵抗力的梭形芽孢。該芽孢在95℃加熱2.5小時方可滅活。
該菌厭氧條件下,在牛乳培養(yǎng)基中培養(yǎng)8~10小時可使牛乳發(fā)酵酸凝,同時產(chǎn)生的大量氣體,穿過蛋白凝塊而呈多孔海綿狀,嚴重時牛乳被沖成數(shù)段甚至噴出管外,產(chǎn)生特征性的“暴烈發(fā)酵”現(xiàn)象。
魏氏梭菌根據(jù)外毒素中和試驗可確定為 A、B、C、D、E 5型。其臨床產(chǎn)生的毒素共有12種,具有傳染病臨床診斷意義的有α、β、ε、ι4種,與鹿腸毒血癥直接相關(guān)的是其中2種,即ε、ι毒素。ε毒素僅由B、D型魏氏梭菌產(chǎn)生,具有致死性,是鹿腸毒血癥的主要致病因子。作為一種通透酶可增加動物內(nèi)皮和上皮細胞的通透性,使胃腸毒素滲入而導致細胞死亡。ι毒素是一種只由E型魏氏梭菌產(chǎn)生的二元毒素,具有皮膚壞死性和致死性,也是引起鹿腸毒血癥的主要毒素之一。其蛋白分子結(jié)構(gòu)由Ia輕鏈和Ib重鏈2條鏈組成,單鏈不能發(fā)揮作用。其致病機制為:Ib首先與細胞表面受體形成一個七聚體,而后Ia與Ib的對接形成復合物誘導細胞內(nèi)吞,Ia快速解聚肌動蛋白絲,從而改變細胞包括囊泡運輸、吞噬作用、信號傳導等諸多過程,通過積累促使細胞凋亡,最終導致腸毒血癥的發(fā)生。
此外,α毒素(又名磷脂酶C)可由5種魏氏梭菌分泌產(chǎn)生,能水解白細胞、紅細胞等膜磷脂,促進膜解體,具有出血、壞死和顯著致死性等細胞毒性;β毒素是由B型和C型魏氏梭菌產(chǎn)生的一種劇烈致病因子,作為一種膜破壞毒素,可引起胃腸炎、食物中毒、壞死性腸炎和腸黏膜出血性壞死,但致病機制尚不明確。
鹿腸毒血癥暴發(fā)具有明顯季節(jié)性和條件性,每年6~10月多發(fā)。病原體魏氏梭菌適宜生長于潮濕悶熱、陰雨連綿的環(huán)境中,其芽孢體在適宜條件下可重新在土壤、糞便、污水中轉(zhuǎn)變?yōu)槲菏纤缶?。正常條件下,當鹿采食少量該菌時,細菌繁殖緩慢,毒素積累量少而被機體正常代謝。但當鹿群在圈舍地面泥濘積水、飼料飲水不衛(wèi)生,或長期飼喂干粗飼料而突然變換為青綠多汁飼料,過度飼喂精料、摻有霉變飼料時,瘤胃內(nèi)消化纖維素的菌群被破壞,食物過度發(fā)酵產(chǎn)酸,pH常低于4.0。腸道內(nèi)毒素積聚不能及時排出,進而導致本病爆發(fā)。據(jù)統(tǒng)計,膘肥體壯、食量大的鹿比瘦弱體小、食量小的鹿更易得本病。
病鹿初期多表現(xiàn)為精神萎靡,離群寡居,眼結(jié)膜潮紅,呼吸心跳增速,鼻鏡稍干,食欲廢絕,反芻停止,口鼻常伴有粉白色泡沫樣液體等癥狀。后期表現(xiàn)為肌肉震顫,磨牙流涎,有疝痛癥狀,站立不穩(wěn),個別鹿只回頭望腹,踉蹌倒地,最終抽搐死亡,病程在數(shù)小時到2~3天不等。
死鹿尸僵完全,腹部膨大,可視黏膜充血。剖檢皮下組織漿液浸潤,心包膜可見大小不同出血點,真胃變化明顯,胃底和幽門部黏膜脫落,呈紫紅色,有大面積出血斑,嚴重可致壞死狀態(tài)。腸黏膜和盲腸可見條狀出血斑,小腸外觀呈“灌血腸樣”,剖開后有大量紅紫色黏液流出。淋巴結(jié)水腫,脾臟腫大,有出血點,邊緣鈍圓。腎臟稍大,變軟。肝稍腫大,偶見灰白色壞死灶和出血點。
趙進成等在吉林采集梅花鹿病料,膘情良好,口鼻有泡沫樣液體,食欲廢絕,后肢麻痹震顫,磨牙呻吟,氟喹諾酮類治療無效后死亡。剖檢在胃底幽門區(qū)黏膜出血糜爛,淋巴結(jié)腫大發(fā)紫。鏡檢為G+粗大桿菌,單個排列或呈鏈狀,有莢膜并能形成芽孢。回腸內(nèi)容物濾液注射家兔,30分鐘內(nèi)家兔昏迷死亡。結(jié)合實驗室診斷判定為鹿魏氏梭菌腸毒血癥。
李自青等研制了魏氏梭菌A型、C型二價滅活疫苗,并對其免疫效力、免疫持續(xù)期和疫苗保存期進行測定。經(jīng)檢,免疫保護率可達100%。安全性良好,對家兔有較強免疫保護。保護期C型6個月,A型3個月。
宋桂強等在某動物園發(fā)現(xiàn)鹿只突然發(fā)病,有稀水狀血便、食欲廢絕、出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,經(jīng)治療無效后死亡。剖檢后進行實驗室診斷,確診為魏氏梭菌。與此同時,對園區(qū)內(nèi)所有鹿科、羊等動物緊急接種羊三聯(lián)疫苗,及時控制了疫情蔓延。
鄧守全等通過觸片鏡檢、分離培養(yǎng)、藥敏試驗對內(nèi)蒙古某養(yǎng)殖場送檢的疑似腸毒血癥急性死亡病料組織(小腸、肝臟、肺臟等)進行了細菌分離鑒定,確診為魏氏梭菌。藥敏譜上,該菌對喹諾酮類、青霉素類、舒普深、菌必治等高度敏感,對氨基糖苷類、鏈霉素、氯霉素、強力霉素、氟苯尼考等中度敏感,對阿米卡星、新霉素等有耐藥性。
王洪水等在東營某養(yǎng)鹿場發(fā)現(xiàn)疑似魏氏梭菌感染病鹿,發(fā)病54只,死亡3只。采用黃連、黃芩、黃柏、梔子、川穹、當歸、地榆、甘草等研成細末,開水浸泡后胃管投服。每鹿1劑,連服5劑。結(jié)果治療51只病鹿,僅有1例死亡,其余康復,治愈率98%。
Riaz Hussain等在巴基斯坦一飼養(yǎng)160只金卡拉鹿的農(nóng)場里發(fā)現(xiàn)有45只發(fā)病,臨床表現(xiàn)為食欲廢絕,角弓反張,離群寡居、高熱、尿液呈巧克力色、淺綠色水樣糞便。剖檢后腹腔有草莓色液體,心包胸膜積水、肺水腫、軟腎。急性病例心肌、空腸黏膜多點出血,尿液中葡萄糖升高。結(jié)合實驗室診斷判定為鹿腸毒血癥,病原鑒定為D型魏氏梭菌。
本病發(fā)病急、病程短,癥狀一經(jīng)表現(xiàn)即難以治療。臨床上可采用葡萄糖補液,注射廣譜抗生素,混飼磺胺脒等。對發(fā)病鹿群需保持圈舍干燥,可內(nèi)服10%石灰乳進行預防,飼具用3%氫氧化鈉進行消毒。不要飼喂霉變飼料或突然改飼。此外,要注意定期注射腸毒血癥、快疫、炭疽三聯(lián)疫苗加以預防。
目前,我國商用魏氏梭菌腸毒血癥疫苗是用甲醛滅活類毒素后免疫動物,如中和抗體滴度≥5IU,則具保護性。但此法成本較高,工藝復雜,需多次接種,免疫效果不夠理想,且常伴有炎癥反應。由于ε毒素在鹿腸毒血癥中普遍存在。制備ε外毒素基因突變體和毒素亞基為該病疫苗研發(fā)提供了新的思路。但目前ε毒素致病機理尚不明確,關(guān)于疫苗和抗體的研發(fā)制備還有待于進一步研究。