沈雪鋒 王海強(qiáng) 錢 曦 俞財(cái)峰 吳曉華 吳家聰 蔡春芳

（1上海青浦現(xiàn)代農(nóng)業(yè)園區(qū)，上海市青浦區(qū) 201717；2上海藍(lán)海園藝有限責(zé)任公司，上海市青浦區(qū) 201717）

束花山茶（Camellia japonicaL.）屬山茶科山茶屬，是重要的觀賞類灌木花卉，廣泛應(yīng)用于園林造景、綠化工程中。最新培育的“玫玉”等系列束花山茶品種因具有開花繁密、花期長、春季色葉期長、耐堿性土等優(yōu)勢，成為了山茶科綠化樹種的重要補(bǔ)充。但這些品種采用傳統(tǒng)繁育方法（主要有扦插及壓條等）的繁殖速度較慢，限制了其有效推廣[1-2]。利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)育苗不僅可實(shí)現(xiàn)苗木的快速繁育，而且育出的苗木成苗整齊、商品性高，更可連續(xù)生產(chǎn)，不受季節(jié)限制。但目前組培快繁的研究對(duì)象多集中在茶樹和油茶[3]，前人雖對(duì)不同茶科植物的組培技術(shù)開展了研究，但研究結(jié)果各有差異，且尚未對(duì)“玫玉”等束花山茶新品種的組培成功案例進(jìn)行報(bào)道[4-8]。鑒于此，筆者以“玫玉”等束花山茶新品種為組培研究對(duì)象，開展了束花山茶組培快繁技術(shù)的研究，最終形成了一套技術(shù)體系。現(xiàn)將研究出的“玫玉”等束花山茶新品種組培快繁技術(shù)總結(jié)介紹如下，以供參考。

1 無菌系的建立

束花山茶品種選用“玫玉”。選擇健壯的母株，截取頂端約10 cm長的頂枝，用自來水沖洗0.5 h后，在超凈臺(tái)上進(jìn)行滅菌處理，用70%酒精表面處理10 s，用無菌水沖洗2次，然后用0.1%升汞處理8～10 min，最后用無菌水沖洗4次，將枝條剪切成至少帶1個(gè)腋芽的莖段，接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。

2 誘導(dǎo)培養(yǎng)

誘導(dǎo)培養(yǎng)基以MS為基礎(chǔ)，添加6-BA 3 mg/L、NAA 0.1 mg/L、瓊脂6 g/L、蔗糖30 g/L，pH為5.6～5.8，用高壓鍋在121 ℃下滅菌21 min，冷凝后待用。將帶腋芽的莖段接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基后，移至培養(yǎng)室內(nèi)進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為光照2 000 Lux、16 h/d，溫度25±1 ℃。據(jù)培養(yǎng)30 d后統(tǒng)計(jì)，外植體芽誘導(dǎo)率可達(dá)62%，芽畸變率為0。

3 繼代增殖

將誘導(dǎo)分化產(chǎn)生的健壯小苗進(jìn)行分割，分割開的小苗接種到增殖培養(yǎng)基（增殖培養(yǎng)基以MS為基礎(chǔ)，添加6-BA 2.0 mg/L、NAA 0.1 mg/L、瓊脂6 g/L、蔗糖30 g/L，pH為5.6～5.8，高壓鍋121 ℃下滅菌21 min，冷凝后待用）上，培養(yǎng)條件同誘導(dǎo)培養(yǎng)，增殖培養(yǎng)的繼代周期為1個(gè)月。據(jù)培養(yǎng)30 d后統(tǒng)計(jì)，增殖系數(shù)可達(dá)2.5，同時(shí)芽生長勢強(qiáng)、顏色發(fā)紅、木質(zhì)化程度高等，有利于芽的持續(xù)增殖。

4 煉苗與生根

待瓶苗增殖到一定數(shù)量后，將瓶苗置于溫室中進(jìn)行遮陽處理并煉苗。1 d后，將經(jīng)煉苗后的叢生芽分割成獨(dú)立芽苗，蘸生根液后扦插入草炭與珍珠巖的混合基質(zhì)中，再用小拱棚覆蓋，以保障生根過程中有足夠的濕度，同時(shí)需不定期補(bǔ)水，且每周噴施殺菌劑進(jìn)行消毒滅菌[9]，最終束花山茶的生根成活率可達(dá)73%。