□ 吳智民 珠海市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心

在分光光度計(jì)中，將不同波長(zhǎng)的光照射樣品溶液時(shí)，便可獲取波長(zhǎng)吸收的強(qiáng)度。通過光譜可針對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性分析和定量分析，這種方法被稱為“分光光度法”，也稱為“吸收光譜法”。當(dāng)前，蔬菜農(nóng)藥殘留的安全問題引起社會(huì)的重視，如何準(zhǔn)確地判斷蔬菜中農(nóng)藥殘留量是各類質(zhì)檢機(jī)構(gòu)面臨的挑戰(zhàn)。分光光度法的出現(xiàn)，對(duì)于檢驗(yàn)蔬菜中農(nóng)藥殘留來說具有重要的意義。

蔬菜殘留農(nóng)藥的原因

在種植蔬菜的過程中，為了減輕或防止病原微生物和害蟲危害農(nóng)作物，種植戶常會(huì)使用農(nóng)藥，大部分農(nóng)藥可以降解，但仍有部分農(nóng)藥殘留在種植的蔬菜中，被人們食用后會(huì)在體內(nèi)慢慢富集，積累到一定程度可引發(fā)機(jī)體病變甚至癌癥，人們的生命安全受到威脅?，F(xiàn)階段，分光光度法常被用于檢驗(yàn)蔬菜農(nóng)藥殘留，合理利用分光光度法，可在短時(shí)間內(nèi)獲得檢驗(yàn)的結(jié)果，并且準(zhǔn)確度有保障。另外，蔬菜保鮮時(shí)間較短，在檢驗(yàn)的過程中應(yīng)保證時(shí)效性。檢驗(yàn)蔬菜農(nóng)藥殘留的方法不少，除了分光光度法，還有氣相色譜法和高效液相色譜法等等。

分光光度法在農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的具體應(yīng)用

原理。正常情況下，乙酰膽堿酯酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物(乙酰膽堿)水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生黃色物質(zhì)。在一定條件下，蔬菜中含有的有機(jī)磷類農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥會(huì)對(duì)乙酰膽堿酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)，用分光光度計(jì)在一定波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率，通過抑制率可以判斷蔬菜中是否含有高劑量的有機(jī)磷類或氨基甲酸酯類農(nóng)藥。

方法。當(dāng)蔬菜含有有機(jī)磷類農(nóng)藥或氨基甲酸酯類農(nóng)藥時(shí)可抑制乙酰膽堿酯酶催化活性，底物不會(huì)受到乙酰膽堿酯酶作用產(chǎn)生水解，酶解顯色效果減弱。在應(yīng)用分光光度法時(shí)，可設(shè)計(jì)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，對(duì)照組用pH值為8.0的緩沖溶液2.5mL代替能抑制乙酰膽堿酯酶的農(nóng)藥提取液，其余操作與實(shí)驗(yàn)組一致。實(shí)驗(yàn)組則用pH值為8.0的緩沖溶液提取蔬菜中的有機(jī)磷類農(nóng)藥或氨基甲酸酯類農(nóng)藥，具體做法以加標(biāo)樣品為例，把不含農(nóng)藥的蔬菜剪成1cm左右見方碎片，將1g蔬菜碎片樣品放入燒杯中，加入對(duì)硫磷濃度為10μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品0.1mL，制成加標(biāo)樣品，再加入pH值為8.0的緩沖溶液5mL提取加標(biāo)樣品里的農(nóng)藥，振蕩1min，倒出提取液，靜置3min，吸取2.5mL提取液至試管并加入酶液和顯色劑各0.1mL，搖勻后于37℃放置15min，加入0.1mL底物搖勻，此時(shí)檢液開始顯色反應(yīng)，應(yīng)立即放入分光光度計(jì)比色池中，記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值，通過計(jì)算對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組吸光度變化值的差值在對(duì)照組吸光度變化值中所占的百分比即為酶被抑制的程度(抑制率)，當(dāng)抑制率≥50%時(shí)，表示蔬菜中有高劑量的有機(jī)磷類或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在，樣品為陽(yáng)性結(jié)果，陽(yáng)性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗(yàn)2次以上。

結(jié)束語

綜上所述，人們長(zhǎng)期食用殘留農(nóng)藥的蔬菜，會(huì)嚴(yán)重影響生命健康，蔬菜農(nóng)藥殘留檢驗(yàn)是當(dāng)前亟需開展的工作。相關(guān)研究表明，合理應(yīng)用分光光度法可提高蔬菜農(nóng)藥殘留檢驗(yàn)的效率，并且檢驗(yàn)結(jié)果具有較高的準(zhǔn)確度。目前，珠海不少農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)和大型超市每天都會(huì)對(duì)在售的蔬菜等食用農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行抽查快檢，快檢的原理正是上述提到的分光光度法。