李天芝
(山東綠都生物科技有限公司,山東 濱州 256600)
豬圓環(huán)病毒病是國(guó)際公認(rèn)的危害養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的主要疾病之一。豬圓環(huán)病毒有3種,分別為PCV1、PCV2和PCV3。通常認(rèn)為PCV1不致病,PCV2可引起仔豬先天性震顫、豬呼吸道病綜合征、斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征、皮炎和腎病綜合征、腸炎、母豬繁殖障礙等多種疾病[1]。PCV3是新發(fā)現(xiàn)的病毒,其引起的豬病是一種新發(fā)的豬傳染病,引起了世界各國(guó)的高度重視和密切關(guān)注。當(dāng)前對(duì)其研究還不夠深入,處于起步階段,對(duì)其致病機(jī)理等還不明確,鑒于PCV3相關(guān)疾病具有傳播途徑多、傳播速度快、流行范圍廣等特點(diǎn),現(xiàn)階段主要是開(kāi)展PCV3流行病學(xué)調(diào)查,以掌握PCV3流行動(dòng)態(tài)及對(duì)豬群危害,防止疫情的擴(kuò)散與傳播。本文綜述了豬圓環(huán)病毒3型病原學(xué)、流行病學(xué)、診斷及防控措施,為該病的防控提供參考。
豬圓環(huán)病毒3型(Porcine circovirus 3,PCV3)是圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬[2],病毒粒子呈二十面體對(duì)稱結(jié)構(gòu),無(wú)囊膜,直徑大小17~20 nm,是當(dāng)前已知的能自主復(fù)制的最小哺乳動(dòng)物病毒之一。病毒對(duì)外界環(huán)境抵抗力強(qiáng),在pH=3環(huán)境中能存活較長(zhǎng)時(shí)間,對(duì)熱具有一定的耐受力,豬群一旦感染后,很難徹底根除。PCV3不能凝集動(dòng)物紅細(xì)胞,對(duì)氯仿、碘酒、酒精等具有一定耐受力,苯酚、季胺類化合物、氫氧化鈉和氧化劑等均可殺滅病毒。PCV3基因組為單股環(huán)狀DNA,大小約2 000 bp,GC含量為50%,基因組結(jié)構(gòu)與PCV1、PCV2相似,含有3個(gè)主要的開(kāi)放閱讀框(ORF),即 ORF1、ORF2 和 ORF3[3]。其中 ORF1編碼Rep蛋白,該蛋白與其它同屬的圓環(huán)病毒PCV1和PCV2 Rep蛋白氨基酸同源性高,ORF2編碼主要結(jié)構(gòu)蛋白Cap蛋白,可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答,與PCV2 Cap蛋白氨基酸同源性僅為30%,推測(cè)二者之間交叉保護(hù)性低。ORF1和ORF2分別位于正鏈和負(fù)鏈上,且復(fù)制方向相反[4]。ORF3編碼蛋白功能尚不清楚。PCV3可接種單層豬腎細(xì)胞(PK-15)或豬睪丸細(xì)胞(ST)進(jìn)行分離培養(yǎng),但一般很難成功。
2010年一些科研工作者報(bào)道在豬體內(nèi)檢測(cè)到一種新型的圓環(huán)病毒,2016年美國(guó)學(xué)者首次報(bào)道由這種病毒引起的豬病,并將其命名為PCV3[5],隨后巴西、韓國(guó)、泰國(guó)、波蘭、意大利、丹麥、德國(guó)和西班牙等均有相關(guān)報(bào)道,表明PCV3現(xiàn)已在全球養(yǎng)豬國(guó)家蔓延。2017年,華南農(nóng)業(yè)大學(xué)宋長(zhǎng)緒教授報(bào)道了我國(guó)首例PCV3,隨后追溯性研究表明,PCV3于2015年即存在于我國(guó)豬場(chǎng),此后呈現(xiàn)上升趨勢(shì),目前PCV3在我國(guó)廣東、山東、河北、遼寧、江西、重慶、福建、湖南等多個(gè)省份豬場(chǎng)均有存在。
目前認(rèn)為豬是PCV3的唯一宿主。病豬和隱性感染豬是主要傳染源。病毒隨患病豬口、鼻腔分泌物及糞便排出體外,污染飼料、飲水及周邊環(huán)境,通過(guò)呼吸道和消化道感染其它健康豬只,也能通過(guò)公豬精液和穿過(guò)胎盤進(jìn)行垂直傳播。各品種和日齡豬均可感染,妊娠母豬和哺乳仔豬受到的危害較為嚴(yán)重。
母豬感染后可表現(xiàn)為厭食,皮膚多灶性丘疹、斑點(diǎn)和淺表性皮炎等,妊娠母豬出現(xiàn)繁殖障礙,產(chǎn)弱仔、死胎、木乃伊胎等,哺乳仔豬可表現(xiàn)為先天性震顫、多器官系統(tǒng)的功能紊亂等[6]。單憑臨床癥狀很難作出診斷,需要采用實(shí)驗(yàn)室方法確診。但由于PCV3病毒分離培養(yǎng)困難,血清學(xué)檢測(cè)又無(wú)商品化試劑盒,且不能判定現(xiàn)癥感染,采用分子生物學(xué)檢測(cè)病毒核酸是當(dāng)前病毒最佳檢測(cè)方法。分子生物學(xué)檢測(cè)方法結(jié)合豬群臨床癥狀,可判定豬群現(xiàn)癥感染,以盡早采取措施,降低損失。為提高檢出效率,可選取新鮮的病死豬肺、淋巴結(jié)、扁桃體、腦等組織樣本,活豬可選取血液、精液等進(jìn)行檢測(cè)。PCV3分子生物學(xué)檢測(cè)主要有常規(guī)PCR法、套式PCR法、多重PCR、熒光PCR方法、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)等5種。當(dāng)前有多種PCV3分子生物學(xué)檢測(cè)方法,但各有利弊,常規(guī)PCR方法雖然檢測(cè)速度快、特異性強(qiáng),但不能定量,且檢測(cè)敏感性不高。多重PCR方法,雖然可檢測(cè)多種疾病,但有時(shí)反應(yīng)條件很難兼顧,致使檢測(cè)敏感性不高,容易漏檢。熒光PCR方法雖然克服了常規(guī)PCR的缺陷,但儀器和探針的合成價(jià)格昂貴,檢測(cè)成本比較高,不適合基層應(yīng)用。LAMP方法雖然簡(jiǎn)單、方便,適合基層進(jìn)行推廣應(yīng)用,但靈敏度太高,易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。隨著技術(shù)發(fā)展,目前出現(xiàn)了免核酸提取DNA病毒直擴(kuò)技術(shù)、PCR反應(yīng)試劑凍干保存技術(shù)等,熒光PCR儀器費(fèi)用降低,體積縮小,為豬圓環(huán)病毒3型的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)奠定了基礎(chǔ)。相信隨著技術(shù)進(jìn)步,會(huì)出現(xiàn)更多簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的疫病檢測(cè)技術(shù),為疾病快速診斷提供條件。如果檢疫條件允許的話,最好采用多種檢測(cè)技術(shù),綜合判斷,以提高檢測(cè)準(zhǔn)確性。
對(duì)PCV3相關(guān)疾病無(wú)有效治療藥物,也無(wú)有效疫苗。PCV3很難分離成功,目前尚未成功建立攻毒模型,人工感染試驗(yàn)沒(méi)有出現(xiàn)臨床癥狀,不能進(jìn)行疫苗免疫效果評(píng)價(jià),這是疫苗研制的主要難點(diǎn)。當(dāng)前主要靠嚴(yán)格健全的生物安全措施進(jìn)行防控,制定標(biāo)準(zhǔn),并嚴(yán)格執(zhí)行。豬場(chǎng)應(yīng)堅(jiān)持自繁自養(yǎng)、全進(jìn)全出的飼養(yǎng)模式,嚴(yán)禁從疫區(qū)引種,引種時(shí)做好隔離檢疫工作;不同日齡豬不要混養(yǎng);豬場(chǎng)做好清潔、消毒,防蚊滅蠅及滅鼠工作,防止鳥類及貓、狗等動(dòng)物進(jìn)入;病死動(dòng)物進(jìn)行無(wú)害化處理,豬場(chǎng)糞污合理處理;進(jìn)出豬場(chǎng)人員、物料和車輛做好消毒;豬場(chǎng)維持適宜溫度、濕度,豬群密度適中;混群、轉(zhuǎn)群、疫苗接種時(shí),飲水中添加電解質(zhì)多維,減少豬群各種應(yīng)激;飼喂優(yōu)質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)均衡飼料,不飼喂霉變飼料,飼料中各種微量元素適度添加,增強(qiáng)豬只抵抗力??蒲泄ぷ髡邞?yīng)在做好PCV3流行病學(xué)調(diào)查的基礎(chǔ)上,研究疾病致病機(jī)理,開(kāi)展病毒分離工作,建立攻毒模型,加快疫苗研制開(kāi)發(fā)研究。相信,隨著技術(shù)的進(jìn)步,未來(lái)一定會(huì)更好地防控該病,使豬場(chǎng)因該病造成的損失降低,保障我國(guó)生豬產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。