摘 要：目前來說食品行業(yè)發(fā)展勢頭迅猛，食品行業(yè)的衛(wèi)生狀況沒有得到很好的控制。導(dǎo)致很多有害的微生物和細菌，在嚴(yán)重危害著食品的品質(zhì)和人們的身體健康。所以監(jiān)管人員需要采取更先進更專業(yè)的微生物檢測技術(shù)，快速準(zhǔn)確地檢測食品中致病微生物的含量，本文介紹現(xiàn)代食品檢測技術(shù)和多重PCR技術(shù)的技術(shù)原理，同時介紹多重PCR技術(shù)運用在食品致病微生物檢測的具體應(yīng)用形式，以供同行參考研究。

關(guān)鍵詞：多重PRC快速檢測技術(shù)；食品致病微生物檢測；技術(shù)原理；檢測方式

中圖分類號：TS207.4 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：1004-7344（2018）26-0375-02

1 引 言

食品致病微生物的種類數(shù)量在逐年增長，對于微生物的檢測方法也在不斷增多，同時得到一定的創(chuàng)新和改善。在實際的食品致病微生物檢測當(dāng)中，采用傳統(tǒng)的常規(guī)培養(yǎng)法、免疫學(xué)方法等都存在著操作復(fù)雜、菌落培養(yǎng)時間長等種種問題。而采用多重PCR技術(shù)，其具有快速、簡便等多個優(yōu)點，和傳統(tǒng)的檢測手段相比克服了操作繁瑣、時間長的缺點，同時相關(guān)檢測結(jié)果也表明，采用多重PRC技術(shù)效果顯著、準(zhǔn)確率高，所以目前正在致病菌檢測、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品等方面的研究中被廣泛運用。

2 現(xiàn)代食品檢測技術(shù)和多重PCR快速檢測技術(shù)淺析

2.1 現(xiàn)代食品檢測技術(shù)

食品指的是不經(jīng)過加工、或經(jīng)過一定加工后，具有營養(yǎng)價值可供人們食用的物質(zhì)。食品當(dāng)中致病細菌含量的多少直接影響到了人們的身體健康，所以食品一定要經(jīng)過嚴(yán)格的現(xiàn)代食品檢測技術(shù)檢驗。

運用生物、物理或化學(xué)等學(xué)科技術(shù)對食品工業(yè)當(dāng)中生產(chǎn)的食物成品、半成品、原料等物質(zhì)進行微生物的分析檢測，是食品檢測的首要任務(wù)?，F(xiàn)代食品檢測技術(shù)根據(jù)被檢測樣本種類的不同，由微生物分析法、儀器分析法、感官檢驗法等多種檢測方式。隨著時代的進步和科學(xué)技術(shù)水平的提升，國際上在現(xiàn)代食品檢測技術(shù)方面的研究成果日新月異，先進的檢測技術(shù)在不斷用于實踐當(dāng)中，新技術(shù)的產(chǎn)生使得食品行業(yè)可以運用更高精尖的食品檢測儀器來進行食品安全的檢測，不僅縮短檢測時間、降低檢測成本，還能提升檢測準(zhǔn)確率，可謂一舉多得。目前主要有電子傳感檢測技術(shù)、生物傳感檢測技術(shù)、PCR基因擴增檢測技術(shù)等，本文就將針對多重PCR快速檢測技術(shù)展開分析和探討。

2.2 多重PCR快速檢測技術(shù)原理探究

在多重PCR快速檢測技術(shù)的實際運用當(dāng)中，PCR技術(shù)主要依靠的是聚合酶的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，采用主要模板為RNA，此外還需要使用的輔助工具是DNA聚合酶，以此來實現(xiàn)DNA片段的擴增。針對多重PCR技術(shù)來說，主要包括變性、退火和延伸三個步驟，是按從DNA單鏈轉(zhuǎn)化成DNA雙鏈的過程。我們把這個DNA雙鏈叫做模板，進行多次相同的操作之后，就可以實現(xiàn)循環(huán)擴增。多重PCR檢測技術(shù)是在傳統(tǒng)PCR檢測技術(shù)的基礎(chǔ)上，把引物的數(shù)量從兩對增加到多對，這樣可以實現(xiàn)多個序列同時擴增，提升擴增的速度和效率。

2.3 多重PCR快速檢測技術(shù)優(yōu)勢

多重PCR快速檢測技術(shù)十分高效，在同一PCR反應(yīng)管當(dāng)中可以一次性檢測出多種病原微生物，甚至對病原微生物的具體型號進行分型，不僅檢測速度非?？欤铱梢酝ㄟ^微量的樣本就得到準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。對于成組病原體的檢測，比如戰(zhàn)傷感染厭氧細菌、腸道致病細菌、無芽孢厭氧細菌等多種細菌進行同時檢驗，既經(jīng)濟又簡便。多種病原體在同一個樣本中被檢測出來，可以節(jié)省檢測的開支和時間耗費，為臨床提供更多有價值的信息。

3 多重PCR快速檢測技術(shù)用于檢測食品致病微生物方法

我國食源性病原菌的種類和數(shù)目十分多，其中以腸道致病細菌為主要病原，引起中毒的食物主要是動物性食品。根據(jù)目前我國的食品安全管理條例看來，針對食品病原菌的檢測通常包括：大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌等，下面本人對常見的、危害性比較大的同時列在國家法律規(guī)定檢測清單中的有害菌進行描述，同時介紹多重PCR快速檢測技術(shù)在這些菌落檢測上的具體應(yīng)用方式和應(yīng)用特點：

3.1 腸出血性大腸菌群

大腸菌群是一群好氧和兼性厭氧的細菌，在人體正常的體溫下，24h內(nèi)能夠發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽孢桿菌，大腸菌群的主要來源是人畜的排泄物，除了大腸埃希氏桿菌之外，還有腸桿菌科的腸桿菌屬等。我國食品衛(wèi)生檢驗檢疫標(biāo)準(zhǔn)中提出要對大腸菌群的含量進行檢測，該菌群的檢出情況代表了食品中是否存在糞便污染。大腸菌群數(shù)量的高低代表食物受到糞便污染的程度和對人體健康威脅程度的大小。

對于大腸桿菌來說，它會產(chǎn)生毒素，這種毒素很難通過現(xiàn)有的檢測技術(shù)進行針對性的檢測，但是通過多重PCR快速檢測技術(shù)則可以在溶血素基因等基因為目的基因的基礎(chǔ)之上，準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)食品中是否含有大腸桿菌。目前對于進口牛肉的質(zhì)量檢疫當(dāng)中采用多重PCR快速檢測技術(shù)，以此嚴(yán)格保障進口牛肉的質(zhì)量合格?？偠灾畬τ诖竽c菌群的檢測，采用PCR檢測技術(shù)和傳統(tǒng)的血清檢測相比，準(zhǔn)確度提升了不少。

3.2 沙門氏菌

沙門氏菌同屬腸桿菌科，是革蘭氏陰性腸道桿菌。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的沙門氏菌種類達到1000余種根據(jù)國家要求，因為沙門氏菌毒性較強，對人體的危害程度較大，所以比較容易遭受沙門氏菌感染的食品比如生雞蛋等，都需要進行嚴(yán)格的分類管理，進行嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)的微生物致病菌檢測，讓這些常見的食物遠離沙門氏菌的侵?jǐn)_，從而有效預(yù)防相關(guān)疾病對于沙門氏菌的檢測，由于食物中沙門氏菌的含量很低，在生產(chǎn)加工的過程中又由于各種因素的干擾讓該病原菌的檢測準(zhǔn)確率進一步降低。而通過多重PCR快速檢測技術(shù)，可以有效明確沙門氏菌的血清類型，甚至還可以掌握實際的突變情況。目前常用血清型特異性引物rfb基因來專門針對沙門氏菌的致病菌檢測，根據(jù)檢測的實際數(shù)據(jù)表明，這不但可以運用在常規(guī)的血清檢測當(dāng)中，還可以在別的肉品檢測當(dāng)中運用。

3.3 金黃色葡萄球菌

金黃色葡萄球菌屬于葡萄球菌屬，是人類重要的一種病原菌，如果攝入量過多可以引發(fā)嚴(yán)重的微生物感染，甚至導(dǎo)致人類的死亡。這種細菌在自然界的分布十分廣泛，所以其危害食品安全性的可能性也很大。其可以通過食品加工者、銷售員等，間接引發(fā)食物的微生物感染，造成食物污染。

針對金黃色葡萄球菌來說，在蔬菜和腌制肉食當(dāng)中都能夠大量存在并快速繁殖，最終形成大量的腸毒素導(dǎo)致人類中毒。對于金黃色葡萄球菌的微生物檢測技術(shù)早已有之，檢測方法比如動物實驗、血清學(xué)實驗、免疫熒光蛋白實驗和酶聯(lián)免疫吸附方法等，目前已經(jīng)相當(dāng)成熟，相關(guān)學(xué)者在采用了多重PCR快速檢測技術(shù)對金黃色葡萄球菌進行微生物檢測后發(fā)現(xiàn)，準(zhǔn)確率和傳統(tǒng)方法比沒有明顯差異，二效率卻可以得到提升。

4 結(jié) 語

總而言之，多重PCR快速檢測技術(shù)在食品的微生物檢測中應(yīng)用優(yōu)勢和傳統(tǒng)檢測技術(shù)相比十分大，不僅可以提升檢測的準(zhǔn)確度和效率，還能夠降低檢測的操作復(fù)雜程度，最終還可以擴增多方面基因的效果，為促進食品致病微生物的檢測提供十分重要的依據(jù)，由此作為基礎(chǔ)保障了食品安全的健康和質(zhì)量，保障廣大人民群眾的身體健康，值得大范圍推廣和應(yīng)用。

參考文獻

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收稿日期：2018-8-3