摘 要:本文首先針對高效液相色譜儀的系統(tǒng)組成、工作原理進行簡單闡述。其次,結合實際情況,對高效液相色譜儀的具體應用情況進行分析,并且提出現(xiàn)階段存在于其中的各種故障問題,最終提出相對應的處理措施。
關鍵詞:高效液相;色譜儀;常見故障;解決方法
中圖分類號:TH833 文獻標識碼:A 文章編號:1004-7344(2018)26-0298-01
高效液相色譜儀是現(xiàn)階段在針對有機化合物進行分離和處理時,應用最廣泛的一種方法。這種方法在實際應用時,可以通過一系列的化學反應,將這些有機化合物逐漸轉變成為無機物,這種方法在實際應用時的效果普遍比較良好。與此同時,該方法在使用時的整體靈敏度比較高,同時選擇性也比較強。液相色譜儀在使用時,主要是檢測、處理裝置等各個零部件相互組合而成。高效液相色譜儀在實際應用過程中,經(jīng)常出現(xiàn)一些對分析結果產(chǎn)生影響的因素條件,所以需要相關人員在日常應用時,對其采取有針對性的措施進行維護,這樣有利于保證其在使用時的效果。
1 高效液相色譜儀的系統(tǒng)組成以及工作原理分析
該系統(tǒng)在運作過程中,其主要是由儲液器、泵、進樣器、色譜柱等很多部分相互組合而成。在儲液器當中存在的流動相會直接被高壓泵作用,從而將其打入到系統(tǒng)當中,與此同時,樣品溶液在經(jīng)過進樣器之后會逐漸進入到流動相當中。同時,可以被流動相直接載入到色譜柱當中,但是值得注意的問題是由于樣品溶液中很多組成部分在實際組合過程中,會由于各種情況導致其分配系數(shù)相互之間具有明顯的差異性。如果在兩相當中實現(xiàn)相對運動的時候,需要反復多次對其進行吸附,并且需要吸附-解吸這一分配過程的來回反復[1]。各個組別在實際劃分和移動速度等方面都會呈現(xiàn)出比較大的差異性。如果在實際應用時,將其分離成單個組分,并且其一次從柱內留出的時候,那么可以直接通過儀器對其進行檢測。同時,樣品濃度可以直接被轉換成為電信號,然后經(jīng)過傳送之后到達記錄儀當中,數(shù)據(jù)以及相對應的信息資料可以通過圖譜的方式打印出來。
2 高效液色譜儀的具體應用
高效液相色譜法在實際應用過程中,其最根本的目的是為了要求樣品能夠在經(jīng)過一系列操作之后,可以形成溶液。而這一溶液的形成和使用,不會受到樣品自身揮發(fā)性的限制影響,同時流動相在其中可以完成自我合理范圍寬度的有效選擇。同時,固定相的種類比較多,所以在針對一些非揮發(fā)性的各種分子量范圍物質進行分離時,可以與實際情況進行結合。除此之外,與試樣預處理技術相互之間可以建立有效連接,并且實現(xiàn)有效配合,這樣有利于從根本上保證HPLC能夠達到非常高的分辨率,同時其正比靈敏度也相對比較高。這樣可以直接促使其實現(xiàn)分離,同時還能夠對與實際情況非常接近的物質進行性質的有效測定。這樣做可以最大限度保證將復雜相體當中的一些微量成分有效的分離出來[2]。在高效液相色譜儀實際應用過程中,會隨著固定相的不斷進步和發(fā)展,將其保持在具有生化物質活性的基礎條件下,這樣有利于保證分離的有效落實。HPLC可以成為現(xiàn)階段在針對一些生化分析問題進行處理時,最有效的途徑方法之一。由于HPLC這種方法在實際應用時,具有高分辨率、高靈敏度等優(yōu)勢特征,同時色譜柱可以實現(xiàn)反復有效的利用。所以這種方法被廣泛應用到很多領域當中,其中包括一些醫(yī)藥研究或者是環(huán)境分析等[3]。
3 高效液相色譜儀常見故障以及對應處理措施
在經(jīng)過對高效液相色譜儀的日常工作情況進行分析之后可以總結出,該儀器在日常比較常見的一些故障類型,根據(jù)這些故障類型,可以提出相對應的解決措施。
3.1 故 障
在高效液相色譜儀的實際應用過程中,流動相當中可能會存在氣泡問題,在看見氣泡之后,關閉泵意義打開泄壓閥,同時打開purge鍵按鈕,對脫氣進行相對應的清洗。但是仍然有很多氣泡不斷從過濾器當中出現(xiàn),并且直接進入到流動相當中。針對這一現(xiàn)象,無論在實際操作中打開purge鍵多少次,都不能夠完全將氣泡給清除掉。
3.2 故障原因
在針對這一故障進行深入分析之后可以得出,由于過濾器長期都處于乙酸銨等一些緩沖液當中,所以過濾器內部會由于霉菌的影響,而導致其出現(xiàn)過多的細菌,最終導致菌團的形成。一旦形成菌團,那么勢必會對過濾器產(chǎn)生嚴重的阻塞影響,緩沖液很難在這種狀態(tài)下很仍然保持順暢的裝百經(jīng)過過濾器。因此,就導致空氣在泵的壓力影響和作用下,經(jīng)過過濾器之后直接進入到流動相當中。
3.3 解決措施
在針對上述問題進行處理的時候,可以結合實際情況,將過濾器在5%的硝酸溶液當中浸泡,在浸泡之后,可以利用超聲對其進行清晰。同時,還可以將過濾器直接放置在5%硝酸溶液當中浸泡12~36h。在這之后,可以對其輕輕震蕩幾次,之后可以利用純水對過濾器進行清晰。與此同時,打開泄壓閥,同時開啟purge鍵,這樣有利于脫氣的清晰。在清晰時,如果仍然發(fā)現(xiàn)氣泡出現(xiàn),那么可以將過濾器繼續(xù)浸泡在硝酸溶液當中,一直到?jīng)]有氣泡出現(xiàn)為止[4]。在這種方法實際應用過程中,如果氣泡在其中不會出現(xiàn),那么就意味著過濾器內部的霉菌菌團已經(jīng)被硝酸溶液徹底破壞,這樣流動相就可以順暢通過過濾器。與此同時,可以打開泄壓閥,打開泵,并且將其流動速度調整到1.0~3.0ml/min,利用純水對其進行沖洗,基本上沖洗1h左右即可。這樣不僅有利于保證過濾器的干凈度,而且在泄壓閥關閉之后,可以利用純甲醇對其進行沖洗,時間控制在0.5h左右即可。
除此之外,高效液相色譜儀在實際應用過程中,還存在各種其他的故障。比如湖南省某單位在針對這一問題進行分析時,其發(fā)現(xiàn)高效液相色譜儀常見故障當中包括壓力高這一問題。導致這一現(xiàn)象出現(xiàn)的根本原因主要體現(xiàn)在流動相具體使用缺乏合理性、緩沖結晶鹽會出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。除此之外,樣品與流動相相互之間并不能夠形成有效的溶合,色譜柱自身的性能越來越低等。這些原因都有可能會導致其在實際應用時出現(xiàn)壓力高的現(xiàn)象。針對這一故障在處理時,可以利用符合實際要求的流動相,并且對其進行有效的沖洗,保證其表面的干凈整潔。與此同時,還可以對流動相進稀釋或者是改變處理,這樣有利于促使樣品與流動相相互之間形成有效的溶合。
4 結束語
綜上所述,在高效液相色譜儀的日常使用過程中,保養(yǎng)工作至關重要。如果在使用時,并沒有意識到定期維修養(yǎng)護的重要性,那么會很容易讓空氣進入到輸液系統(tǒng)當中,這樣就會導致系統(tǒng)在運作時受到嚴重的影響。與此同時,在針對樣品進行處理時,要保證樣品當中的所有雜質全部都處理干凈,盡可能減少對色譜柱的污染影響。在保證延長色譜柱使用壽命的基礎上,能夠盡可能避免故障的發(fā)生。
參考文獻
[1]卓宇楨.高效液相色譜儀常見故障原因分析和解決方法[J].化工管理,2015(23):44.
[2]王 媚.高效液相色譜儀的日常維護及常見故障[J].現(xiàn)代婦女(下旬),2014(11):494.
[3]徐曉玲,樓雪芳.高效液相色譜儀使用中的常見故障及維護方法[J].山東化工,2014,43(09):43~48.
[4]劉春偉.高效液相色譜儀使用中常見故障及對策[J].商品與質量,2012(S5):326.
收稿日期:2018-8-4
作者簡介:辛文慧(1979-),女,本科。