文│程浩(福建省永安市貢川鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)水產(chǎn)站)
沙門氏菌(Salmonella)是腸桿菌科,沙門氏菌屬的一種細(xì)長型[(0.3~1.5)微米×(1.0~2.5)微米]革蘭氏陰性菌。菌體多數(shù)以單個存在,少數(shù)以兩個或多個相連,在自然環(huán)境中表現(xiàn)為無莢膜、無芽孢的兼性厭氧細(xì)菌。沙門氏菌是我國養(yǎng)雞產(chǎn)業(yè)巨大的威脅因素,它可通過種蛋進(jìn)行世代垂直傳播,從而降低種蛋孵化率,導(dǎo)致雛雞帶菌出殼,也可通過消化道感染,可引起副傷寒、傷寒和白痢等雞沙門氏菌病。近期,筆者對福建省永安市貢川鎮(zhèn)的一起雛雞白痢沙門氏菌病進(jìn)行了診治,診治過程如下。
2018年5月,貢川鎮(zhèn)某養(yǎng)雞專業(yè)戶,共養(yǎng)殖肉雞2000余羽。在飼養(yǎng)至20~30日齡階段,突然發(fā)現(xiàn)雞白痢現(xiàn)象,雞只開始死亡,該養(yǎng)殖戶多次自行使用慶大霉素和青霉素進(jìn)行治療,未見療效,且雞只死亡數(shù)不斷增多,共死亡422只,死亡率高達(dá)21%。于是聯(lián)系筆者就診。
1.行為狀態(tài)。病雛雞精神萎靡沉郁,常常合眼沉睡,絨羽蓬松雜亂,翅膀下垂,關(guān)節(jié)腫大,行走不便伴有跛行,運動少,喜歡一群扎堆擁擠在一起。
2.采食情況。病雛雞食欲下降,采食量減少或者不采食,飲水明顯增多,嗉囊部位膨大充滿液體。
3.排泄情況。病雛雞排泄次數(shù)增多,下痢情況嚴(yán)重,排出白色的稀糞,肛門周圍被石灰水樣糞便污染,有的因為肛門周圍的糞便變干黏結(jié),導(dǎo)致雞只排泄困難,排糞時常發(fā)出尖叫、有些有脫肛情況,腸管在體外經(jīng)常一伸一縮地活動。
4.呼吸情況。有的病雛雞伴有呼吸困難現(xiàn)象,常常伸頸張口呼吸。
病死雛雞表現(xiàn)為全身脫水,眼睛向內(nèi)凹陷,腳趾皮膚粗糙干枯。
通過對10羽病死雛雞進(jìn)行剖檢,觀察各個臟器和器官的病理變化。
1.心臟。心包明顯增厚,心包囊內(nèi)存在淡黃色的漿液,心冠上的脂肪有出血點。
2.肝臟。肝臟腫大,質(zhì)地脆弱,極易破裂,表面存在彌散性針點大小的出血點,個別雛雞肝臟上有“雪花樣”的壞死灶。
3.肺。肺部有褐色的瘀血點,個別雛雞肺部有壞死灶。
4.脾臟。脾臟腫大,呈深褐色,質(zhì)地極脆。
5.腎臟。腎臟充血腫大,顏色深。
6.膽囊。膽囊脹大,內(nèi)部充滿膽汁。
7.消化道。腸道表現(xiàn)為卡他性腸炎,盲腸、大腸可以觀察到灰白色的壞死結(jié)節(jié),盲腸內(nèi)物質(zhì)呈干酪樣,個別雛雞盲腸扁桃體出血,泄殖腔內(nèi)存有白色的惡臭稀糞。
8.輸尿管。輸尿管中存在尿酸鹽沉淀。
9.卵黃。卵黃沒被完全吸收,遺留的卵黃表面呈黃綠色,內(nèi)部有干酪樣黏稠物,個別雛雞臍孔周圍皮膚發(fā)生潰爛。
1.材料。
(1)主要試劑。結(jié)晶紫染色液染色、革蘭氏碘溶液、酒精、沙黃、肉湯培養(yǎng)液、亞硒酸鈉、普通瓊脂、鮮血瓊脂、SS瓊脂、伊紅美蘭、葡萄糖、甘露糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖、頭孢呋辛、頭孢噻肟慶大霉素、卡那霉素、諾氟沙星、四環(huán)素、阿米卡星、左氟沙星、青霉素。
(2)主要設(shè)備。電子顯微鏡、恒溫培養(yǎng)箱、無菌操作臺、發(fā)酵管。
2.方法。
(1)形態(tài)學(xué)檢查。在無菌環(huán)境下,取病死雛雞的心臟、肝臟和脾臟進(jìn)行涂片,將涂片自然干燥固定,在涂片上滴加結(jié)晶紫染色液染色1分鐘,將染色液水洗去;在涂片上滴加革蘭氏碘溶液反應(yīng)1分鐘,水洗溶液;滴加酒精脫色30秒后立即水洗;滴加沙黃進(jìn)行復(fù)染1分鐘后水洗,干燥后對涂片進(jìn)行鏡檢。革蘭氏陽性菌呈紫色;革蘭氏陰性菌呈紅色。
(2)細(xì)菌分離培養(yǎng)。肉湯培養(yǎng):在無菌環(huán)境下,取病死雛雞組織放入試管肉湯培養(yǎng)液和亞硒酸鈉增菌液在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時,觀察培養(yǎng)情況。
平板培養(yǎng):在無菌環(huán)境下,取培養(yǎng)液涂布于普通瓊脂、鮮血瓊脂、SS瓊脂和伊紅美蘭培養(yǎng)基,在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時,觀察各種培養(yǎng)基上菌落生長情況。
(3)生化實驗。在無菌環(huán)境下,用無菌接種環(huán)鉤將普通瓊脂平板上純培養(yǎng)的菌落接種到微量發(fā)酵管中,將管倒置放入37℃培養(yǎng)箱中觀察2天。
(4)血清學(xué)實驗。在玻片上滴加一滴沙門氏菌全價血清,分別加入普通瓊脂、鮮血瓊脂、SS瓊脂和伊紅美蘭培養(yǎng)基上的菌落混勻,以生理鹽水作為對照組,在20~25℃的環(huán)境中觀察,2分鐘后出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。結(jié)果為陽性,無凝集現(xiàn)象,結(jié)果為陰性。
(5)藥敏實驗。根據(jù)《獸醫(yī)微生物學(xué)實驗實習(xí)指導(dǎo)》中推薦使用的紙片擴(kuò)散法,使用高溫滅菌的生理鹽水將普通瓊脂中純培養(yǎng)的菌落配制成菌液,均勻涂布在營養(yǎng)瓊脂平板表面,在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時,測量抑菌圈的直徑長度,結(jié)果根據(jù)美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)藥敏試驗判定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷,藥敏試驗判斷標(biāo)準(zhǔn)見表1。
表1 藥敏試驗判定標(biāo)準(zhǔn)
3.實驗結(jié)果。
(1)形態(tài)學(xué)檢查結(jié)果。通過顯微鏡可以觀察到病死雛雞組織中有卵圓形的短桿菌,該細(xì)菌無芽孢,無莢膜,呈革蘭氏陰性。
(2)細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)果。肉湯培養(yǎng)結(jié)果:可以觀察到試管中的營養(yǎng)液均勻渾濁,細(xì)菌生長旺盛。
平板培養(yǎng)結(jié)果:普通培養(yǎng)基上的菌落,圓形,大小中等,無色半透明,邊緣整齊,表面濕潤;鮮血培養(yǎng)基上的菌落圓形,約2~3毫米,灰白色,表面濕潤不溶血;SS瓊脂和伊紅美蘭培養(yǎng)基上的菌落較小,可觀察到SS瓊脂培養(yǎng)基上形成中心黑色菌落。
(3)生化實驗結(jié)果。分離菌在發(fā)酵管中能發(fā)酵葡萄糖、甘露糖、麥芽糖等物質(zhì)并產(chǎn)酸,不發(fā)酵乳糖、蔗糖,符合雞白痢沙門氏菌的生化特性。
(4)血清學(xué)實驗結(jié)果。普通瓊脂、鮮血瓊脂、SS瓊脂和伊紅美蘭培養(yǎng)基上的菌落都與沙門氏菌全價血清出現(xiàn)凝集現(xiàn)象,結(jié)果為陽性。
(5)藥敏實驗結(jié)果。通過對9種藥物進(jìn)行藥敏實驗,結(jié)果發(fā)現(xiàn)菌落對頭孢類藥物最敏感,而對左氟沙星、青霉素最不敏感,結(jié)果見表2。
根據(jù)該病的基本情況、臨床癥狀、病理剖檢和實驗室檢驗,確診雞場感染的是雛雞白痢沙門氏菌病。
根據(jù)藥敏實驗選用最敏感的藥物—頭孢噻呋鈉進(jìn)行緊急注射,卡那霉素按每千克水加10萬~20萬國際單位藥,連續(xù)飲水4天。用藥后,雞只病情好轉(zhuǎn),采食量明顯增加,不再發(fā)生死亡,疫情得到控制。
1.科學(xué)管理。
(1)雛雞管理。確保從沒有白痢病的雞場引入雛雞;待雛雞進(jìn)場后,要嚴(yán)格做好雞只的消毒和隔離工作,防止隱形帶菌雞對整個雞場造成危害;對已經(jīng)感染白痢沙門氏菌的雞群要及時隔離控制;對病死雞只要嚴(yán)格按照無害化進(jìn)行焚燒或者深層掩埋處理。
(2)飼養(yǎng)管理。嚴(yán)格執(zhí)行雞場雞群全進(jìn)全出的飼養(yǎng)管理模式,雞只入舍前和出舍后要全面消毒整個雞舍;飼養(yǎng)過程中,定期對雞舍進(jìn)行清洗和消毒,保持雞舍干燥衛(wèi)生,控制好雞舍環(huán)境溫度,合理安排雞群飼養(yǎng)密度;供應(yīng)營養(yǎng)全面均衡的顆粒配合飼料,適量適時投喂飼料,防治飼料污染,避免白痢沙門氏菌通過飼料傳染雞群。
2.科學(xué)預(yù)防。
(1)飲水預(yù)防。定期在雞只飲水中添加EM液,以預(yù)防雞白痢沙門氏菌病的發(fā)生。
(2)藥物預(yù)防。根據(jù)飼養(yǎng)的日齡、飼養(yǎng)的季節(jié)合理制定預(yù)防藥物的飼喂程序。
(3)疫苗預(yù)防。雞白痢沙門氏菌可通過接種弱毒活疫苗和菌體滅活疫苗或者亞單位疫苗和重組疫苗等進(jìn)行預(yù)防。
(4) 微生態(tài)制劑預(yù)防可通過在雞只飼料中添加微生態(tài)制劑來改善雞的腸道微生態(tài)區(qū)系,達(dá)到促進(jìn)有益菌生長繁殖,抑制有害菌生長繁殖的作用,提高雞只免疫能力,以預(yù)防疾病的發(fā)生。
福建地區(qū)氣溫高,濕度大,適合沙門氏菌等細(xì)菌生長繁殖。沙門氏菌可通過多個渠道、多個環(huán)節(jié)對雞只造成感染,就福建省目前的養(yǎng)雞業(yè)水平和飼養(yǎng)環(huán)境而言,完全消滅該種疾病是不現(xiàn)實的。因此,提高日常飼養(yǎng)管理水平、加強(qiáng)飲水安全、科學(xué)調(diào)配飼料營養(yǎng)水平,合理藥物預(yù)防可以很大程度控制雞白痢沙門氏菌病的發(fā)生。
表2 藥敏實驗結(jié)果