任 愷，段維勛，俞 波，劉 洋，李步瀠，金振曉，俞世強(qiáng)

(空軍軍醫(yī)大學(xué) 第一附屬醫(yī)院 心血管外科, 陜西 西安 710032)

高血壓的臨床發(fā)病率較高,伴隨著血壓的進(jìn)一步升高,對心臟、大腦、腎臟及主動脈等靶器官產(chǎn)生危害,出現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥[1]。目前，藥物控制是治療高血壓病的主要手段。臨床使用的高血壓治療用藥需要遵循針對性治療原則、副作用最小原則、多藥物聯(lián)合治療原則[2],需要找到效果更好、副作用更低、針對性強(qiáng)的治療高血壓藥物。中藥皂苷成分對于自發(fā)性高血壓大鼠具有顯著的降壓效果[3],單次用藥及連續(xù)用藥,均能夠降低自發(fā)性高血壓大鼠的收縮壓和舒張壓[4]。減輕高血壓對靶器官血管內(nèi)皮的損傷,對減少高血壓的并發(fā)癥有重要意義,而動脈血管內(nèi)皮功能狀態(tài)可作為評估靶器官受疾病影響程度的觀察指標(biāo),主動脈中相關(guān)血管內(nèi)皮功能相關(guān)因子的表達(dá)有助于了解疾病對血管的損害,對其改善的程度也可作為評估藥物治療高血壓效果的重要指標(biāo)[5]。本文就中藥皂苷成分對高血壓大鼠主動脈血管內(nèi)皮功能相關(guān)因子影響情況進(jìn)行研究。

1 資料與方法

1.1 試驗(yàn)資料

將45只自發(fā)性高血壓大鼠分為A組(三七花總皂苷組)15只、B組(卡托普利組)15只和C組(陽性對照組)15只,15只大鼠為D組(正常對照組)。A組中,雌性大鼠7只,雄性大鼠8只,體重范圍為202.5～249.0g,平均為(226.9±11.6)g。B組中,雌性大鼠7只,雄性大鼠8只,體重范圍為201.4～249.5g,平均為(227.1±10.8)g。C組中,雌性大鼠8只,雄性大鼠7只,體重范圍為201.7～248.8g,平均為(225.9±12.0)g。D組中,雌性大鼠7只,雄性大鼠8只,體重范圍為202.0～249.5g,平均為(227.3±11.3)g。4組大鼠的雌雄占比與體重等情況比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn):12周齡者;精神狀態(tài)正常的健康大鼠。

排除標(biāo)準(zhǔn):疾病史者;發(fā)育異常者。

1.3 方 法

大鼠購入后分籠飼養(yǎng),均給予適應(yīng)性飼養(yǎng),時(shí)間為1周,自然光照,自然晝夜節(jié)律。其中，A組、B組及C組均給予0.02g/mL氯化鈉鹽水及常規(guī)飼料飼養(yǎng),D組給予自來水及常規(guī)飼料飼養(yǎng)。A組給予三七花總皂苷,劑量為每天120mg/kg;B組給予卡托普利,劑量為每天27mg/kg(劑量設(shè)定的依據(jù)為預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果);C組與D組均不給予藥物,均給予生理鹽水。4組均采用灌胃的方式進(jìn)行,兩組均治療4周。

1.4 觀察指標(biāo)

于治療前和治療后2周、4周各檢測A組、B組、C組及D組大鼠的血壓,包括收縮壓及舒張壓,檢測部位為尾動脈,于給藥后30min進(jìn)行檢測,以無創(chuàng)血壓測量系統(tǒng)進(jìn)行檢測。另外，治療后4周采集兩組的腹主動脈血4.0mL,并取胸主動脈血管標(biāo)本。首先將血標(biāo)本離心(3 000r/min的速度離心10min),采集血漿進(jìn)行內(nèi)皮功能相關(guān)因子的檢測,檢測指標(biāo)為細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)、內(nèi)皮素-1(ET-1)及一氧化氮(NO);胸主動脈血管采集50～90mg,置入冰醋酸溶液,將其剪碎,煮沸(10min),制備勻漿,離心(3 000r/min的速度離心15min),取上清液進(jìn)行ICAM-1，ET-1及NO的檢測,上述指標(biāo)均以酶聯(lián)免疫法進(jìn)行測定,嚴(yán)格按照操作說明進(jìn)行操作檢測。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)

2 結(jié) 果

2.1 4組治療前后的收縮壓及舒張壓比較

治療前A組、B組及C組的收縮壓及舒張壓均高于D組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但A組、B組及C組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),治療后A組及B組的收縮壓及舒張壓均低于C組,但仍高于D組,A組均低于B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),詳細(xì)見表1。

表1 四組治療前后的收縮壓及舒張壓比較(mmHg)Tab.1 Systolic and diastolic blood pressure before and after treatment in four groups(mmHg)

與D組比較,*P<0.05;與C組比較,#P<0.05;與B組比較,&P<0.05

2.2 4組治療后的血漿血管內(nèi)皮功能相關(guān)因子表達(dá)比較

治療后A組及B組的血漿ICAM-1及ET-1均低于C組,但仍高于D組,A組及B組的NO高于C組,但低于D組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),詳細(xì)見表2。

表2 4組治療后的血漿血管內(nèi)皮功能相關(guān)因子表達(dá)比較Tab.2 Comparison of expression of plasma vascular endothelial function-related factors after treatment in four groups

與D組比較,*P<0.05;與C組比較,#P<0.05;與B組比較,&P<0.05

2.3 4組治療后的主動脈血管內(nèi)皮功能相關(guān)因子表達(dá)比較

治療后A組及B組的主動脈ICAM-1及ET-1均低于C組,但仍高于D組,A組及B組的NO高于C組,但低于D組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),詳細(xì)見表3。

3 討 論

高血壓是臨床高發(fā)病,持續(xù)的升高對心、腦、腎等靶器官損傷較大。也對臨床血壓控制不佳,易出現(xiàn)高并發(fā)癥、高死亡率。與相關(guān)研究顯示,高血壓病患者的血管內(nèi)皮損傷明顯,因此與之相關(guān)的檢測因子呈現(xiàn)出異常表達(dá)的狀態(tài)[6-7]。臨床中與血管內(nèi)皮功能相關(guān)的因子較多,ICAM-1，ET-1及NO是常見的評估指標(biāo),其中的ICAM-1在炎癥的介導(dǎo)中發(fā)揮重要的作用,在白細(xì)胞對血管內(nèi)皮之間的黏附中發(fā)揮重要的作用,對病理狀態(tài)導(dǎo)致的血管內(nèi)皮炎性損傷具有重要的評估意義義8-9]。ET-1其廣泛存在于血管內(nèi)皮,在多類血管疾病發(fā)生發(fā)展中扮演重要角色,當(dāng)血管內(nèi)皮受損時(shí),其表達(dá)增強(qiáng),同時(shí)受損的內(nèi)皮細(xì)胞將其釋放入血,血液中呈現(xiàn)出濃度增加狀態(tài),因此對ET-1的監(jiān)測也具有重要的臨床意義[10-11]。NO則在受損的血管內(nèi)皮中呈現(xiàn)含量減低,在調(diào)節(jié)血液與血管壁的屏障間呈現(xiàn)較強(qiáng)的作用,同時(shí)對血管壁的通透性有調(diào)節(jié)作用,當(dāng)其表達(dá)較低時(shí),說明血管壁屏障受損,因此對其表達(dá)的監(jiān)測與調(diào)控具有重要意義[12-13]。關(guān)于自發(fā)性高血壓大鼠血管內(nèi)皮受損的研究多見,表現(xiàn)為上述主動脈血管內(nèi)皮功能相關(guān)因子表達(dá)情況的異常[14],而近年來關(guān)于皂苷類成分對血管內(nèi)皮功能的改善作用不斷增多,但是對于其對自發(fā)性高血壓大鼠上述方面的調(diào)節(jié)作用研究差異較大。

表3 4組治療后的主動脈血管內(nèi)皮功能相關(guān)因子表達(dá)比較(pg/mg pro)Tab.3 Comparison of expression of endothelial function-related factors in aorta after treatment in four groups (pg/mg pro)

與D組比較,*P<0.05;與C組比較,#P<0.05;與B組比較,&P<0.05

本文中就中藥皂苷成分對高血壓大鼠主動脈血管內(nèi)皮功能相關(guān)因子影響情況進(jìn)行觀察與研究。結(jié)果顯示,采用皂苷成分進(jìn)行干預(yù)的大鼠,治療后的收縮壓與舒張壓降低幅度明顯,明顯好于未用藥治療及應(yīng)用卡托普利的大鼠,且用藥治療后的血漿及血管內(nèi)皮上述因子表達(dá)均明顯改善。說明中藥皂苷成分有效地改善了大鼠的高血壓狀態(tài),對血管內(nèi)皮功能相關(guān)指標(biāo)的表達(dá)也有更好的調(diào)節(jié)作用。這可能與中藥皂苷成分對動脈平滑肌的增殖具有調(diào)節(jié)作用,且對細(xì)胞內(nèi)鈣離子的流動有關(guān),因此降壓效果較好；同時(shí)本藥對于氧自由基的清除作用較好,因此血管受損的情況控制較高[15-16]。綜上所述,我們認(rèn)為中藥皂苷成分對高血壓大鼠的降壓效果較好,且對主動脈血管內(nèi)皮功能相關(guān)因子的影響更為積極。