姜明，周客軒，彌春霞

(牡丹江師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，黑龍江牡丹江157012)

食用菌菌糠主要原料是鋸木屑、玉米芯、棉籽殼、稻草及秸稈等，是食用菌栽培后形成廢棄培養(yǎng)基，其中含有大量的菌絲體，含有粗纖維、粗脂肪、粗蛋白、總糖及多種維生素、礦物元素、豐富的有機(jī)酸、氮、磷、鉀、腐殖質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)，經(jīng)加工之后可以用作飼料、土壤改良劑、有機(jī)肥等[1-4]。目前我國食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，食用菌經(jīng)采收后剩下菌糠的數(shù)量極大，絕大多數(shù)菌糠被廢棄，這會(huì)給食用菌產(chǎn)業(yè)帶來很大隱患,給農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境造成巨大破壞。若菌糠能被再次利用，這不僅能降低其對環(huán)境的污染，而且能夠?qū)崿F(xiàn)菌糠變廢為寶。本實(shí)驗(yàn)將元蘑菌糠按照一定比例添加到土壤中栽培百日草(Zinniaelegans)，通過比較添加不同比例元蘑菌糠的土壤對百日草生長的影響，看其是否能促進(jìn)百日草生長，這對于菌糠的再次利用及食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有一定意義。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

供試菌糠：采用的菌糠為牡丹江師范學(xué)院所提供出菇3茬后的元蘑菌糠?；脚囵B(yǎng)料原始配方：木屑78%，麩皮20%，蔗糖1%，石膏1%。采取3茬元蘑后的培養(yǎng)料作為供試菌糠，從中挑選菌絲白密、料塊結(jié)實(shí)的菌糠塊，將其曬干，壓碎備用。

土壤：腐殖土(土表層中的枯枝殘葉經(jīng)過長時(shí)期腐爛發(fā)酵形成的土壤，具有一定的肥力)、普通土(含沙量多的土，肥力低)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 添加不同比例元蘑菌糠的土壤對百日草種子發(fā)芽影響

(1)配制不同比例元蘑菌糠的土壤：將粉碎后的元蘑菌糠按照0%、10%、20%、30%、40%比例分別添加到腐殖土、普通土中，設(shè)計(jì)2組實(shí)驗(yàn)，以添加濃度為0%元蘑菌糠的腐殖土或普通土作為對照組，以添加濃度為10%、20%、30%、40%元蘑菌糠的腐殖土或普通土作為實(shí)驗(yàn)組。將其充分混勻后再分別裝進(jìn)留有漏水口花盆中。將花盆中含有元蘑菌糠的土壤表面呈水平面狀態(tài)，用標(biāo)簽紙和記錄筆標(biāo)好號(hào)并貼在花盆的邊緣。

(2)播種：挑取飽滿、無損壞、無發(fā)霉現(xiàn)象的百日草種子，再將挑好的種子分別置于已挖好坑的花盆土壤中并且每個(gè)坑中1個(gè)種子，每盆放12顆種子且每盆做3次平行實(shí)驗(yàn)。相鄰種子的間距保持一致，土壤中每顆種子的深度保持一致，并將每顆種子標(biāo)好號(hào)。

(3)發(fā)芽：在埋好的種子土壤上方澆水，澆水太多容易造成土壤不透氣，從而影響種子發(fā)芽效果。每2天澆1次水，使花盆中的土壤保持濕度。在菌糠土壤中的種子全部發(fā)芽前，每天都要來觀察并記錄百日草發(fā)芽個(gè)數(shù)，并取3次實(shí)驗(yàn)中百日草種子發(fā)芽個(gè)數(shù)的平均數(shù)。

(4)計(jì)算百日草種子的發(fā)芽率，其計(jì)算公式為：

GR=ΣGt/T×100%(Gt為10天內(nèi)的發(fā)芽數(shù)；T為供試種子數(shù))[5]。

1.2.2 添加不同比例元蘑菌糠的土壤對百日草株高的影響。在百日草種子最終發(fā)芽的種子數(shù)不變后，拔掉多余的百日草苗，使花盆中百日草苗的數(shù)量保持在6株。在花盆中的土壤保持水平面狀態(tài)的前提下，用格尺或卷尺測定百日草頂芽距土壤表面的高度，即株高。每隔2天來測定百日草的株高并作好記錄，全部數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2010作圖，并用單因素方差進(jìn)行分析。

1.2.3 添加不同比例元蘑菌糠的土壤對百日草生長速率的影響。由于百日草進(jìn)入花期后，其植株不再生長。測定每盆百日草的株高并記錄測定時(shí)的天數(shù)，取每盆百日草株高的平均值，再計(jì)算百日草生長速率。得出全部數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2010作圖，并分析添加元蘑菌糠的土壤對百日草種子生長速率的影響。

1.2.4 添加不同比例元蘑菌糠的土壤對百日草開花時(shí)間的影響。當(dāng)百日草進(jìn)入花蕾期時(shí)，記錄添加不同濃度梯度的元蘑菌糠土壤中百日草的開花時(shí)間，每天來記錄百日草的開花時(shí)間，通過對比分析添加元蘑菌糠的土壤對百日草開花時(shí)間的影響。

1.2.5 添加不同比例元蘑菌糠的土壤對土壤微生物的影響。當(dāng)百日草進(jìn)入花期后，從添加不同濃度梯度的元蘑菌糠的土壤中取出離土壤表面5cm以下的土壤，置于干凈的三角瓶中備用，用標(biāo)簽紙和筆標(biāo)好號(hào)。制備土壤稀釋溶液，并取0.1mL適當(dāng)稀釋度的土壤稀釋液接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(用于細(xì)菌培養(yǎng))、高氏1號(hào)培養(yǎng)基(用于放線菌培養(yǎng))、馬鈴薯培養(yǎng)基(PDA)(用于霉菌培養(yǎng))表面，將高氏1號(hào)平板、馬鈴薯平板倒置于28℃溫箱中培養(yǎng)，放線菌培養(yǎng)時(shí)間為5～7d，霉菌培養(yǎng)時(shí)間為3～5d，將牛肉膏蛋白胨平板倒置于37℃溫箱中培養(yǎng)，細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間為1～2d。細(xì)菌、放線菌、霉菌分別培養(yǎng)1～2d、5～7d、3～5d之后，取出培養(yǎng)皿，首先挑選同一稀釋度的平均菌落數(shù)在30～300之間進(jìn)行計(jì)數(shù)。確定培養(yǎng)皿合適的稀釋倍數(shù)D，然后計(jì)算出某一稀釋度下幾個(gè)平板上的菌落平均數(shù)X，依據(jù)平板上加入菌液量Y(0.1mL)和含菌樣品克數(shù)Z(g)，得出每克土壤中微生物的活菌數(shù)(CFU/g)=(X×D)/(Y×Z)[6]。全部數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2010分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加不同比例元蘑菌糠的土壤對百日草種子發(fā)芽影響的結(jié)果

不同梯度菌糠的土壤中，每個(gè)梯度做3盆平行樣，每盆放12顆百日草種子，最后取平均值計(jì)算百日草種子發(fā)芽率。

表1 添加不同濃度梯度的菌糠土壤對百日草種子發(fā)芽的影響

由表1得知：在腐殖土中添加濃度為10%元蘑菌糠時(shí)百日草種子發(fā)芽率最高，添在普通土中添加濃度為20%元蘑菌糠時(shí)百日草種子發(fā)芽率最高，兩種土壤綜合比較：添加濃度為10%元蘑菌糠的腐殖土中百日草種子的發(fā)芽率最高。

2.2 添加不同比例元蘑菌糠的土壤對百日草株高影響的結(jié)果

圖1 添加不同濃度梯度菌糠的腐殖土或

利用添加不同比例元蘑菌糠的腐殖土或普通土栽培百日草，栽培67天后，進(jìn)入花期時(shí)，植物停止生長，測量百日草最終株高，取不同比例菌糠的土壤中百日草株高的平均值，作柱狀圖進(jìn)行分析。由圖1得知：經(jīng)單因素方差分析，由于F>F0.05，P<0.05，說明不同比例元蘑菌糠的土壤對百日草株高的影響顯著差異。在腐殖土和普通土中，隨著元蘑菌糠施用量的增加，百日草的平均株高呈現(xiàn)先增后減，2種土壤綜合比較，發(fā)現(xiàn)元蘑菌糠濃度為10%的腐殖土栽培的百日草株高最高。

2.3 添加不同比例元蘑菌糠的土壤對百日草生長速率影響的結(jié)果

圖2 添加不同濃度梯度菌糠的腐殖土或普通土栽培百日草67天測的平均生長速率

由圖2得知：在腐殖土和普通土中，隨著元蘑菌糠施用量的增加，百日草的平均生長速度呈現(xiàn)先增后減，腐殖土中元蘑菌糠濃度為10%時(shí)百日草的平均生長速率最快，普通土中元蘑菌糠濃度為10%時(shí)百日草的平均生長速率最快；兩種土壤對比發(fā)現(xiàn)，添加濃度為10%元蘑菌糠的腐殖土栽培的百日草的生長速率最高。

2.4 添加不同比例元蘑菌糠的土壤對百日草開花時(shí)間影響的結(jié)果

圖3 添加不同濃度梯度菌糠的土壤栽培百日草

由圖3所示，黑色編號(hào)的為添加不同濃度元蘑菌糠的腐殖土，黃色編號(hào)為添加不同濃度元蘑菌糠的普通土，添加元蘑菌糠的腐殖土中栽培的百日草的開花時(shí)間比未添加元蘑菌糠的腐殖土早，同一時(shí)期添加元蘑菌糠的腐殖土栽培的百日草的開花時(shí)間比添加同濃度元蘑菌糠的普通土早，添加濃度為10%元蘑菌糠的腐殖土中百日草開花時(shí)間最早。

2.5 添加不同比例元蘑菌糠的土壤對土壤微生物影響的結(jié)果

2.5.1 添加不同比例元蘑菌糠的土壤對土壤細(xì)菌影響的結(jié)果

表2 添加不同濃度元蘑菌糠的土壤中細(xì)菌數(shù)量統(tǒng)計(jì)

由表2得知：在腐殖土和普通土中，細(xì)菌的數(shù)量隨著元蘑菌糠濃度遞增出現(xiàn)先增后減；腐殖土中元蘑菌糠濃度為10%時(shí)細(xì)菌的數(shù)量最高，普通土中元蘑菌糠濃度為20%時(shí)細(xì)菌的數(shù)量最高，2種土壤中細(xì)菌數(shù)量相比較可知：添加濃度為10%元蘑菌糠的腐殖土中細(xì)菌數(shù)量最高。

2.5.2 添加不同比例元蘑菌糠的土壤對土壤中霉菌影響的結(jié)果

表3 添加不同濃度元蘑菌糠的土壤中霉菌數(shù)量統(tǒng)計(jì)

由表3得知：在腐殖土中，元蘑菌糠濃度為10%的腐殖土中霉菌數(shù)量最高，霉菌的數(shù)量隨著元蘑菌糠濃度的增加出現(xiàn)先增后減；在普通土中，元蘑菌糠濃度為20%的普通土中霉菌數(shù)量最高，霉菌的數(shù)量也隨著元蘑菌糠濃度的增加出現(xiàn)先增后減；2種土壤中霉菌的數(shù)量相比較可知：添加濃度為10%元蘑菌糠的腐殖土中霉菌數(shù)量最高。

2.5.3 添加不同比例元蘑菌糠的土壤對土壤中放線菌影響的結(jié)果

表4 添加不同濃度元蘑菌糠的普通土

由表4得知：在腐殖土中，元蘑菌糠濃度為10%的腐殖土中放線菌的數(shù)量最高，放線菌的數(shù)量隨著元蘑菌糠濃度的增加出現(xiàn)先增后減；在普通土中，元蘑菌糠濃度為10%的普通土中放線菌的數(shù)量最高，放線菌的數(shù)量隨著元蘑菌糠濃度的增加出現(xiàn)先增后減。2種土壤中放線菌的數(shù)量相比較可知：添加濃度為10%元蘑菌糠的腐殖土中放線菌的數(shù)量最高。

3 結(jié)論

3.1 添加濃度為10%元蘑菌糠的腐殖土對百日草的發(fā)芽率、株高、生長速率有顯著地促進(jìn)作用，百日草開花時(shí)間最早。

3.2 元蘑菌糠濃度為10%的腐殖土中細(xì)菌、霉菌、放線菌的數(shù)量最高，添加元蘑菌糠的腐殖土中微生物的數(shù)量明顯比添加同濃度元蘑菌糠的普通土高。因此，當(dāng)腐殖土中添加濃度為10%的元蘑菌糠能增加土壤中微生物的數(shù)量。

3.3 元蘑菌糠中含有菌體蛋白、微量元素、次生代謝產(chǎn)物等營養(yǎng)物質(zhì)，當(dāng)施入到土壤中，進(jìn)一步被微生物分解成腐殖質(zhì)。由于腐殖土比普通土中微生物的含量豐富，元蘑菌糠施入到腐殖土中更容易被微生物分解成腐殖質(zhì)，從而使土壤變得肥沃，有助于植物的生長。綜合上述可知：可用添加10%比例元蘑菌糠的腐殖土來栽培百日草。