徐俊杰，佘寧

（四川省生豬無抗養(yǎng)殖工程技術研究中心，齊全農牧集團研究院，四川 遂寧 629000）

益生菌被稱為活性微生物飼料添加劑，能夠維持機體腸道的穩(wěn)態(tài)，也能夠顯著影響機體的免疫性能。剛出生仔豬的腸道是無菌的，出生之后通過接觸母體和外界環(huán)境，微生物在7日齡后逐漸定植于腸道[1]。而定植前幾天人為添加有益菌將對仔豬的腸道健康發(fā)育至關重要。研究發(fā)現，乳酸菌能顯著促進機體的健康快速生長[2]，枯草芽孢桿菌具有增強動物免疫力的作用。前期已有研究表明，給仔豬飼喂益生菌能夠顯著提高仔豬胃腸道內的微生物群落多樣性[3]。本試驗通過給初生仔豬飼喂乳酸菌、枯草芽孢桿菌及這兩種益生菌的組合，研究其對仔豬生長、抗氧化性能及免疫功能的影響，為益生菌在養(yǎng)殖生產中的推廣提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗設計 試驗在齊全農牧集團股份有限公司的豬場進行。采用全進全出飼養(yǎng)管理模式，半漏縫地面飼養(yǎng)，定時清理糞便，豬舍溫度控制在25～30℃，每個圈（1.5×2.0 m2）均配有 2個乳頭式飲水器和1個4孔料槽，自由采食和飲水。按照豬場常規(guī)程序進行免疫和保健。

試驗選用出生兩天內的杜×長×大三元雜交仔豬24只，采用完全隨機區(qū)組設計，分為4個處理（每個處理6只）：對照組C，乳酸菌組L（根據產品推薦水平添加約0.2%），枯草芽孢桿菌組B（根據產品推薦水平添加約0.2%），混合組M（乳酸菌+枯草芽孢桿菌），其中乳酸菌制劑的活菌數為8×106CFU/g。仔豬出生2d后開始試驗，將活菌制劑與全脂奶粉混合，調制成糊狀，用湯勺放入仔豬舌根部，讓其吃下，每日2次（上午、下午各一次），14d后每7d測量各組仔豬的采食量和體重。試驗共持續(xù)28d。

1.2 測定指標 試驗結束后屠宰所有仔豬，采集血液，采用黃嘌呤氧化物酶測定超氧化物歧化酶活力，利用T-AOC（HY-60021）試劑盒測定總抗氧化指標活力，采用GSH-PX（HY-60005）試劑盒測定谷胱甘肽過氧化物酶活力。采集仔豬十二指腸的黏膜組織，利用酶聯免疫法測定免疫球蛋白G（IgG）和分泌型免疫球蛋白A（SIgA）的含量。

1.3 數據統(tǒng)計 用Excel 2016軟件對數據進行整理，用SPSS 21.0軟件對不同組別間的含量差異進行分析；采用的數據分析方法是單因素方差分析（ANOVA）中的最小顯著差異（LSD）法，結果以“平均值±標準差”表示。

2 結果

2.1 添加益生菌對仔豬生長性能的影響 依據表1可得，與對照組相比，添加益生菌對仔豬的采食量沒有顯著影響，但能顯著提高仔豬的日增重，且以乳酸菌和枯草芽孢桿菌混合添加組的效果最顯著，日增重從226.66g提高到258.66g（P＜0.01）。

2.2 添加益生菌對仔豬抗氧化性能的影響 為了更進一步地分析益生菌對仔豬抗氧化性能的影響，我們在試驗結束時隨意采集了4組仔豬（每組3頭）的血清樣本進行檢測。結果發(fā)現，添加益生菌會影響仔豬血清中的超氧化物歧化酶含量和總抗氧化能力，其中總抗氧化能力指標顯著提高（P＜0.01），但是對血清中的谷胱甘肽過氧化物酶指標無顯著影響，除了芽孢桿菌添加組。

2.3 添加益生菌對仔豬免疫性能的影響 為了更清楚地分析仔豬小腸黏膜上的免疫指標變化，我們采集每組仔豬的十二指腸黏膜組織，測定其免疫球蛋白G（IgG）和分泌型免疫球蛋白A（SIgA）的含量。結果發(fā)現，試驗組（L、B、M）的 IgG 指標顯著低于對照組（P＜0.01）（圖 1），混合組（M）的SIgA指標顯著高于對照組（P＜0.01）（圖2）。由此可見，添加益生菌能夠顯著提高仔豬機體的免疫能力。

3 討論

3.1 豬作為單胃動物，腸道微生物主要集中在盲腸和結腸部位，腸道微生物對于機體的營養(yǎng)吸收具有重要作用。仔豬在出生后很容易受外源有害菌的入侵，導致機體出現腹瀉等一系列疾病，而添加益生菌對于仔豬抵制有害菌至關重要。前人研究發(fā)現，益生菌發(fā)酵飼料能夠顯著提高仔豬的生長性能[4]（這與我們的研究結果一致），并能夠促進仔豬的腸道發(fā)育。李旋亮等[5]用含有乳酸菌和芽孢桿菌的基礎日糧飼喂斷奶仔豬，發(fā)現添加益生菌能夠顯著提高仔豬腸道的絨毛高度，說明益生菌能夠改善仔豬的腸道組織形態(tài)，有利于仔豬機體的營養(yǎng)吸收。

表1 添加益生菌對仔豬生長性能的影響g

表2 添加益生菌對仔豬抗氧化性能的影響 U/mL

圖1 不同組之間仔豬小腸黏膜免疫球蛋白指標（IgG）的變化

圖2 不同組之間仔豬小腸分泌型免疫球蛋白指標（SIgA）的變化

3.2 另外，我們的試驗結果還發(fā)現，添加益生菌能夠顯著提高仔豬血清的抗氧化指標。高建忠等[6]給仔豬添加富硒益生菌，結果發(fā)現富硒益生菌能夠顯著改善仔豬的抗氧化能力，與本研究結果一致。就調節(jié)機體免疫性能而言，益生菌可作為非特異免疫調節(jié)因子，通過細菌本身或細胞壁成分特別是肽聚糖，刺激宿主免疫細胞和吞噬細胞的活力或作為佐劑發(fā)揮作用[7]。Che等[8]的前期研究結果表明，給仔豬飼喂益生菌能夠增加腸黏膜中IL-4的分泌量和SIgA的分泌量，從而提高仔豬腸道黏膜免疫力，這與本試驗的研究結果也基本一致。

3.3 本試驗結果表明，給初生仔豬添加一定量的益生菌，對于預防仔豬腹瀉具有正面效果，且不同種類益生菌混合添加的效果優(yōu)于單一添加（以乳酸桿菌和芽孢桿菌混合較好）。添加時間以出生第2 d仔豬開始吃食初乳后為宜，延續(xù)添加時間以3～5 d為佳。從理論上講，初生仔豬48 h內吸食到初乳有利于提升免疫力，因為此時仔豬腸道是以“胞飲”方式直接吸收免疫球蛋白的。

4 結論

本試驗表明，給初生仔豬飼喂飼用益生菌能夠顯著提高仔豬的日增重，顯著提升仔豬的抗氧化能力和腸道免疫功能，尤其以添加復合益生菌（乳酸桿菌+芽孢桿菌）的效果最為明顯。