陳禮芬 岳海林 謝秀鳳 梁春輝

（廣東農(nóng)工商職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣東 廣州 510000）

淮山（Dioscorea fordiiPrain et Burkill），又名薯蕷，俗稱廣山藥、懷山藥、淮山藥，簡(jiǎn)稱“淮山”，為薯蕷科（Dioscoreaceae）薯蕷屬（Dioscorea L.）攀緣性草本植物［1］，在我國(guó)已有2 500年以上的栽培歷史，是一種藥食兼用的高產(chǎn)、高效經(jīng)濟(jì)作物［2］?；瓷揭郧o和珠芽（中藥稱為零余子，俗稱山藥蛋）入藥，塊莖含皂甙、甘露聚糖、膽堿、多巴胺、山藥素Ⅰ、精氨酸、蛋白質(zhì)和碘質(zhì)等成分，性平、味甘，具有健脾止瀉、補(bǔ)肺益腎等功能。塊莖同時(shí)含有豐富的淀粉、糖纖維素等碳水化合物，除藥用外，還是味美可口的食物［3-4］。

紫淮山為薯蕷科薯蕷屬藤本植物，塊莖長(zhǎng)紡錘或柱形，表皮紫褐色，塊莖斷面顯紫色，屬于紫紅肉品種群。目前，紫淮山主要分布在我國(guó)南方沿海地區(qū)，并有向南方其他城市深入推廣和繁育的趨勢(shì)［1-2］。據(jù)《本草綱目》記載，淮山有益腎氣、健脾胃、止瀉痢、潤(rùn)皮毛等功效［3］。隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，對(duì)淮山成分的研究日趨精細(xì)化，有關(guān)淮山藥食性的利用研究也日趨廣泛［4-5］。

1 材料與方法

1.1 材料

以溫室大棚中培育的紫淮山為組培材料，選取健壯的、無(wú)病蟲害的莖段，剪取莖粗2 mm以上的健壯莖段。

1.2 方法

1.2.1 無(wú)菌材料的獲得。將剪取的莖粗2 mm以上的健壯莖段用自來(lái)水沖洗2 h后，剪去葉片，切成中間只留一個(gè)芽的3 cm莖段，用洗潔精洗一次，自來(lái)水沖洗三四次，再用0.1%氯化汞溶液滅菌12 min，用無(wú)菌水沖洗6次，再用75%酒精滅菌30 s，用無(wú)菌水沖洗3次［6］。需要注意的是，一般初代取干凈無(wú)毒無(wú)病菌的莖段，越是嫩的莖段（幼嫩紫淮山見圖1），其全能性的表達(dá)越強(qiáng)，嫩芽作為初代材料時(shí)消毒時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則很容易對(duì)嫩芽造成傷害。

圖1 紫淮山

1.2.2 不同濃度NAA對(duì)紫淮山初代培養(yǎng)的影響。將莖段插入不同配方的培養(yǎng)基中，其中1號(hào)培養(yǎng)基的成分為MS+BA 2.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L+糖30.0 g/L+瓊脂6.8 g/L，2號(hào)為MS+BA2.0mg/L+NAA1.0mg/L+糖30.0 g/L+瓊脂6.8 g/L，3號(hào)為MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+糖30.0 g/L+瓊脂6.8 g/L，以上培養(yǎng)基的pH值為5.8。培養(yǎng)條件：溫度為24～26℃，光照強(qiáng)度為1 000～1 800 lx，光照時(shí)間12～14 h/d。觀察并記錄。

1.2.3 不同濃度6-BA對(duì)紫淮山增殖培養(yǎng)的影響。將初代長(zhǎng)出的萌芽接到3種培養(yǎng)基中，其中1號(hào)培養(yǎng)基的成分為MS+KT 2.0 mg/L+BA 0.5 mg/L+糖30.0 g/L+瓊脂6.8g/L，2號(hào)為MS+KT2.0mg/L+BA1.0mg/L+糖30.0g/L+瓊脂6.8 g/L，3號(hào)為MS+KT 2.0 mg/L+BA 1.5 mg/L+糖30.0 g/L+瓊脂6.8 g/L，以上培養(yǎng)基的pH值為5.8。培養(yǎng)條件：溫度為24～26℃，光照強(qiáng)度為1 000～1 800 lx，光照時(shí)間12～14 h/d。觀察并記錄。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度NAA對(duì)紫淮山初代培養(yǎng)的影響

如圖2所示，接種30 d后，1號(hào)與2號(hào)培養(yǎng)基的材料只生長(zhǎng)根，腋芽的萌發(fā)受到抑制，營(yíng)養(yǎng)大多數(shù)供于根的生長(zhǎng)，因此，紫淮山不僅存在頂端優(yōu)勢(shì)（其頂芽的生長(zhǎng)會(huì)抑制側(cè)芽的生長(zhǎng)），而且存在根與芽的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，在環(huán)境許可的情況下，紫淮山的根生長(zhǎng)旺盛會(huì)抑制腋芽的生長(zhǎng)。3號(hào)培養(yǎng)基中，腋芽萌發(fā)最好，生長(zhǎng)旺盛，根的生長(zhǎng)被抑制。

2.2 不同濃度6-BA對(duì)紫淮山增殖培養(yǎng)的影響

如圖3所示，在增殖培養(yǎng)過(guò)程中，2號(hào)培養(yǎng)基中芽生長(zhǎng)情況最好。1號(hào)芽的分生多，但長(zhǎng)勢(shì)較弱，葉子為淡綠色；2號(hào)培養(yǎng)基中材料葉子是紫紅色，發(fā)育較快；3號(hào)長(zhǎng)勢(shì)也很好，較為粗壯，但是芽的分生少。培養(yǎng)基中添加1.0 mg/L 6-BA時(shí)有利于促進(jìn)紫淮山的芽分化和發(fā)育，濃度過(guò)高會(huì)抑制芽的分化，太低會(huì)影響芽的生長(zhǎng)。

圖2 不同濃度NAA培育的初代紫淮山

圖3 不同濃度6-BA增殖培養(yǎng)的紫淮山

3 結(jié)論

為了找到紫淮山的初代培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)的配方，為建立紫淮山快速繁殖體系提供一定的參考，本文利用不同培養(yǎng)基對(duì)紫淮山的外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)。結(jié)果表明，初代培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為MS+BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+糖30.0 g/L+瓊脂6.8 g/L，增殖培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方為MS+KT 2.0 mg/L+BA1.0 mg/L+糖30.0 g/L+瓊脂6.8 g/L。