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        不同年份和不同大小太子參的質(zhì)量研究

        2018-12-13 07:29:14李文貴沈震亞李小鳳
        關(guān)鍵詞:太子參蒸餾水年份

        李文貴 沈震亞 李小鳳

        (江中藥業(yè)股份有限公司 江西 南昌 330004)

        太子參主產(chǎn)于福建、貴州和安徽,在市場(chǎng)上,不同質(zhì)量的太子參價(jià)格也參差不齊。太子參為多年生草本植物,由種子無性繁殖[1],每年6~7月份產(chǎn)新一次。太子參以曬干的新品(儲(chǔ)存時(shí)間在1年以內(nèi))質(zhì)量為最佳,價(jià)格最貴,陳年太子參(放置1年以上)質(zhì)量次之,價(jià)格也相應(yīng)更低;太子參一般以個(gè)大者為佳,價(jià)格最高,個(gè)小的太子參和個(gè)大的太子參價(jià)格相差也較大。太子參的主要有效成分為多糖和皂苷[2]。本研究為了進(jìn)一步研究不同年份和不同大小太子參的質(zhì)量差異,對(duì)不同年份和不同大小太子參的性狀、薄層鑒別、多糖含量及皂苷含量進(jìn)行了研究?,F(xiàn)報(bào)道如下:

        1 儀器與材料

        1.1 儀器 UV2450紫外分光光度計(jì)(日本島津公司)、MS204S電子天平(美國梅特勒-托利多公司)。

        1.2 試藥與試劑 太子參對(duì)照藥材(121004-201408,TLC法鑒別)、D-無水葡萄糖對(duì)照品(110833-201205,含量測(cè)定)和人參皂苷Rb1(110704-201424,含量測(cè)定),均購于中國食品藥品檢定研究院;其它試劑均為分析純;太子參樣品均由江中藥業(yè)股份有限公司提供。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 太子參的性狀比較

        2.1.1 方法 太子參按照直徑大小可分為4類。見表1。

        表1 太子參按直徑分類

        2.1.2 不同年份太子參的性狀差異比較 不同年份太子參的斷面顏色、形態(tài)特征和氣味等均存在差異,年份越久,斷面顏色越深,且氣味越淡,可以用作判斷不同年份太子參的主要依據(jù)之一。見圖1和表2。

        圖1 不同年份的太子參斷面圖

        表2 不同年份太子參性狀結(jié)果

        2.2 不同年份和不同大小太子參的薄層鑒別[3]

        2.2.1 方法 取不同年份和不同大小太子參粉末各1 g,加 10 ml甲醇,溫浸,振搖 30 min,濾過,濾液濃縮至1 ml,作為供試品溶液。另取太子參對(duì)照藥材1 g,同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn),吸取上述對(duì)照藥材溶液及供試品溶液各1 μl,同時(shí)點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶1)為展開劑,預(yù)飽和15 min后展開,取出,晾干。噴以0.2%茚三酮乙醇溶液,于105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。在與對(duì)照藥材色譜中相應(yīng)位置的上,供試品色譜應(yīng)顯相同顏色的斑點(diǎn)。

        2.2.2 結(jié)果 (1)不同年份太子參的薄層鑒別結(jié)果:分別取2008年、2012年和2013年產(chǎn)太子參進(jìn)行了薄層鑒別,發(fā)現(xiàn)不同年份的太子參薄層斑點(diǎn)顏色深淺無明顯差異。見圖2。

        圖2 不同年份的太子參薄層色譜圖

        (2)不同大小太子參的薄層鑒別:直徑在4 mm以上的太子參斑點(diǎn)最為清晰,而直徑小于2 mm的太子參斑點(diǎn)顏色次之,直徑2~3 mm和直徑3~4 mm兩種規(guī)格的太子參顏色較淡,顏色深淺無明顯規(guī)律,因此,無法從薄層鑒別圖譜的結(jié)果判定不同大小太子參的內(nèi)在質(zhì)量。見圖3。

        圖3 不同大小的太子參薄層圖

        2.3 不同年份太子參的皂苷含量比較[4]

        2.3.1 供試品溶液的制備 取太子參藥材細(xì)粉2.0 g,精密稱定,加20 ml水超聲處理30 min,提取液加入約2.8倍量乙醇,靜置過夜,抽濾,減壓濃縮至干,殘?jiān)?0 ml蒸餾水超聲使混懸,用水飽和的正丁醇萃取3次,20 ml/次,合并萃取液后,用正丁醇飽和的蒸餾水50 ml洗滌,收集正丁醇液,減壓蒸干,殘?jiān)眉状既芙獠⒍ㄈ葜?0 ml,即得。

        2.3.2 對(duì)照品溶液的制備 取人參皂苷Rb1對(duì)照品適量,精密稱定,加甲醇適量溶解并配制成1.0 mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

        2.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液40 μl、60 μl、80 μl、100 μl和 120 μl,分別置于 10 ml具塞試管中,以微熱風(fēng)吹去溶劑,加入5%香草醛冰醋酸溶液0.2 ml和高氯酸0.8 ml,混勻,密塞,置60℃水浴中加熱15 min后立即冷卻至室溫,再加冰醋酸5 ml,搖勻,同時(shí)設(shè)置試劑空白對(duì)照,于560 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。并繪制濃度-吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線,經(jīng)計(jì)算得回歸方程y=0.012 54x-0.064 02,r=0.998 67。

        2.3.4 測(cè)定 精密移取太子參供試品溶液50 μl,置于10 ml具塞試管中,以微熱風(fēng)吹去溶劑,加入5%香草醛冰醋酸溶液0.2 ml和高氯酸0.8 ml,混勻,密塞,置60℃水浴中加熱15 min后立即冷卻至室溫,加冰醋酸5 ml,搖勻,同時(shí)設(shè)置試劑空白對(duì)照,于560 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,計(jì)算含量。

        2.3.5 結(jié)果 (1)不同年份太子參的皂苷含量比較:不同年份福建產(chǎn)太子參的皂苷含量為0.39%~0.44%,不同年份安徽產(chǎn)太子參的皂苷含量為0.36%~0.39%,不同年份貴州產(chǎn)太子參的皂苷含量為0.35%~0.38%。不同年份相同產(chǎn)地的太子參的皂苷含量無明顯差異。(2)不同大小太子參中的皂苷含量比較:不同大小福建產(chǎn)太子參的皂苷含量為0.39%~0.41%,不同大小安徽太子參的皂苷含量為0.34%~0.36%,不同大小貴州產(chǎn)太子參的皂苷含量為0.32%~0.34%。不同大小相同產(chǎn)地的太子參的皂苷含量無明顯差異。見表3、表4。

        表3 不同年份太子參中的皂苷含量比較(%)

        表4 不同大小太子參中的皂苷含量比較(%)

        2.4 不同年份產(chǎn)太子參中多糖的含量比較[5]

        2.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 取105℃下干燥至恒重的D-無水葡萄糖對(duì)照品適量,精密稱定,加適量蒸餾水使溶解并稀釋成1.045 mg/ml的對(duì)照品溶液。精密吸取該對(duì)照品溶液 10 μl、20 μl、40 μl、60 μl、80 μl和 100 μl,分別置 15 ml具塞試管中,分別用蒸餾水補(bǔ)充至2.0 ml,設(shè)置2.0 ml蒸餾水為空白對(duì)照,各管再加入1.0 ml苯酚試液(苯酚試液的配置:取苯酚100 g,加鋁片0.1 g和碳酸氫鈉0.05 g,常壓蒸餾,收集182℃餾分10 g,加蒸餾水190 ml使溶解,置冰箱中備用),搖勻,各管再迅速加入濃硫酸5 ml,搖勻后放置5 min,置沸水中加熱15 min,取出冷至室溫,于490 nm處測(cè)定吸收度,繪制濃度-吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算得回歸方程得:y=0.063 34x-0.008 32,r=0.997 99。

        2.4.2 換算因子的測(cè)定 多糖的提取與精制[6]:稱取已干燥的太子參粗粉(60目)200 g,用95%乙醇回流提取6 h,回收乙醇。殘?jiān)鼡]干后,用蒸餾水回流提取3次,提取液減壓濃縮后,加95%乙醇使含醇量達(dá)80%,靜置過夜,濾取白色沉淀,用蒸餾水溶解,用Sevag法去蛋白質(zhì),上清液加90%乙醇使含醇量達(dá)80%,靜置過夜,濾取沉淀,用無水乙醇、丙酮、乙醚依次洗滌多次,真空干燥,得太子參多糖。精密稱取干燥至恒重的太子參多糖10.50 mg,置100 ml容量瓶中,加蒸餾水適量使溶解并稀釋至刻度,搖勻。精密吸取該溶液1.0 ml照標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下方法,測(cè)定多糖供試液中葡萄糖的濃度,按下式計(jì)算換算因子:f=W/(C×D),式中W為多糖的重量(μg),C為多糖稀釋液中葡萄糖的濃度(μg/ml),D為多糖的稀釋倍數(shù)。最終測(cè)得f=2.652。

        2.4.3 樣品溶液的制備 精密稱取太子參樣品0.10 g,置 100 ml燒瓶中,加 80%乙醇 80 ml,置 90℃水浴中回流提取60 min,趁熱濾過,殘?jiān)?0%熱乙醇30 ml分3次洗滌,棄去醇液,將濾紙連同殘?jiān)萌霟恐校诱麴s水80 ml,90℃水浴中回流提取1 h,并趁熱過濾,用20 ml熱蒸餾水分4次洗滌殘?jiān)盁?,并入濾液,放冷后轉(zhuǎn)移至100 ml量瓶中,用蒸餾水定容,搖勻,備用。

        2.4.4 樣品多糖含量的測(cè)定 精密移取各供試品液500 μl于具塞試管中,補(bǔ)充蒸餾水至2 ml,按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下方法,測(cè)定供試液中葡萄糖的含量,按下式計(jì)算樣品中多糖的含量:多糖含量(%)=(C×D×f/W)×100%。式中C為供試液中葡萄糖的濃度(μg/ml),D為供試液的稀釋倍數(shù),f為換算因子,W為供試品的重量(μg)。

        2.4.5 測(cè)定結(jié)果 (1)不同年份太子參的多糖含量比較:不同年份福建產(chǎn)太子參的多糖含量為14.3%~14.8%,不同年份安徽產(chǎn)太子參的多糖含量為13.2%~14.0%,不同年份貴州產(chǎn)太子參多糖含量為13.2%~13.6%。不同年份相同產(chǎn)地的太子參的多糖含量無明顯差異。見表5。

        表5 不同年份太子參的多糖含量比較(%)

        (2)不同大小太子參的多糖含量比較:不同大小福建產(chǎn)太子參的多糖含量為14.2%~14.5%,不同大小安徽產(chǎn)太子參的多糖含量為13.2%~13.7%,不同大小貴州產(chǎn)太子參的多糖含量為13.1%~13.4%。不同大小相同產(chǎn)地的太子參的多糖含量無明顯差異。見表6。

        表6 不同大小太子參的多糖含量比較(%)

        3 討論

        綜合分析不同年份、不同大小的太子參的質(zhì)量研究結(jié)果可以看出:不同年份的太子參的性狀存在明顯差異,如斷面顏色、氣味等,可以用作鑒別太子參年份的依據(jù);不同年份產(chǎn)太子參的薄層鑒別、皂苷含量及多糖含量均無明顯差異;不同大小的太子參的薄層鑒別、皂苷含量及多糖含量也無明顯差異。直徑<2 mm與直徑>4 mm的太子參中的皂苷和多糖含量相比較,二種規(guī)格的太子參并無顯著性差異,常規(guī)對(duì)太子參的質(zhì)量根據(jù)其直徑判斷的經(jīng)驗(yàn)與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相悖,有待于進(jìn)一步考證。綜上所述,太子參的內(nèi)在質(zhì)量與其年份和大小無明顯關(guān)系。

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