田 進 王曉鳳

深圳市坪山區(qū)人民醫(yī)院，廣東深圳 518118

潰瘍性結腸炎（ulcerative colitis，UC）作為消化道疾病中常見的疑難病，主要是累及直腸、乙狀結腸的黏膜、黏膜下層的慢性非特異性炎癥[1]。該病發(fā)病率較高，多集中在25～50歲發(fā)病，我國UC的發(fā)病率約為11.6/10萬人[2]，導致UC的原因主要有環(huán)境因素、心理因素、遺傳因素及腸道菌群的綜合作用，可啟動腸道免疫及非免疫系統(tǒng)，促進機體產(chǎn)生免疫反應，導致腸道發(fā)生炎癥，UC臨床病程較長，遷延不愈，嚴重影響患者的生活質(zhì)量。目前治療方法主要采取藥物治療，包括氨基水楊酸類制劑、糖皮質(zhì)激素與免疫抑制劑，但上述藥品不良反應較重，且給患者帶來較大的經(jīng)濟負擔，導致患者依從性差[3]。益生菌作為新型微生態(tài)制劑，運用到UC治療中不僅耐受性好，而且不良反應低，改善臨床癥狀效果明顯，患者依從性好[4]。雙歧三聯(lián)活菌膠囊由長型雙歧桿菌、保加利亞乳桿菌、噬熱鏈球菌組成，在改善UC患者腸道內(nèi)菌群平衡具有較好的效果。本研究通過設計前瞻性對照試驗觀察微生態(tài)制劑雙歧三聯(lián)活菌膠囊輔助治療UC，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2016年1月～2018年1月收治的潰瘍性結腸炎患者共198例，納入標準：（1）患者滿足潰瘍性結腸炎診斷標準[5]。（2）病情處于活動期。（3）UC病情為輕度、中度。（4）納入研究前三個月內(nèi)未接受過糖皮質(zhì)激素、免疫性制劑、細胞毒等藥物治療。排除標準：（1）UC病情為重度。（2）UC臨床分型為急性暴發(fā)型。（3）孕婦或哺乳期婦女。（4）依從性差或患有精神疾病者。（5）不愿簽署研究知情同意書的患者。本研究獲得醫(yī)院倫理委員會同意，患者及家屬簽訂研究知情同意書。將所有患者按照隨機數(shù)表法分為對照組與觀察組，對照組98例，男52例，女46例，年齡32～54周歲，平均（43.2±9.8）周歲，平均病程（2.01±0.78）年，病情輕度63例，中度35例。觀察組100例，男58例，女42例，年齡30～56周歲，平均（44.2±9.1）周歲，平均病程（2.04±0.76）年，病情輕度71例，中度29例。兩組患者一般資料性別、年齡、病程等差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 治療方法

對照組患者接受潰瘍性結腸炎常規(guī)治療與護理，口服抗生素、5-氨基水楊酸類制劑：奧沙拉嗪鈉膠囊（浙江華潤三九眾益制藥股份有限公司，H20010061，0.25g×24粒），1.0g/次，口服，1 次 /d，治療周期為6個月。觀察組在對照組治療基礎上給與雙歧三聯(lián)活菌膠囊治療，具體方法為：雙歧三聯(lián)活菌膠囊（上海上藥信誼藥廠有限公司，S10950032，0.21g×30粒），0.84g/次，2次 /d，口服，治療周期為6個月。

1.3 觀察指標

比較兩組患者UC治療效果、治療前后潰瘍性結腸炎結腸炎癥積分、CD4、CD25調(diào)節(jié)性T細胞占CD4 T細胞比例及IL-10水平。

UC治療效果結合患者臨床癥狀、內(nèi)鏡下黏膜情況分為[6]（1）痊愈：患者臨床癥狀、體征完全消失，內(nèi)鏡下可見病變黏膜恢復正常。（2）顯效：患者臨床癥狀、體征基本消失，在內(nèi)鏡下可見病變黏膜部分恢復正常，或病變程度減輕。（3）無效：患者臨床癥狀、體征未消失，或出現(xiàn)加重的情況，內(nèi)鏡下可見黏膜病變程度加重?？傆行?（痊愈例數(shù)+顯效例數(shù)）/總例數(shù)×100%。

結腸炎癥積分評判標準由兩位病理學檢驗人員對6塊活組織進行雙盲評定，在3個高倍鏡觀察下取平均值，分為：0分，顯微鏡下黏膜完全正常；1分：顯微鏡下上皮或黏膜下出現(xiàn)輕微的炎性滲出、水腫或糜爛；2分：顯微鏡下1分的區(qū)域超過50%；3分：顯微鏡下可見潰瘍深達黏膜肌層或黏膜下肌層，可見以中性粒細胞為主的炎性滲出[6]。CD4、CD25測定采用密度梯度離心法，將外周血單個核細胞進行分離，加入抗人CD4-FITC與CD25-APC，在空白對照管內(nèi)加入同等量的FITC與APC標記過的Ig-G，在4℃低溫下保存30min，將未結合的抗體洗去后加入破膜固定劑，1h后加入PBS溶液，使用流式細胞儀測定CD4、CD25占調(diào)節(jié)性T細胞比例。IL-10測定采取ELISA法，抽取清晨空腹靜脈血5mL，-20℃保存后使用IL-10單克隆抗體試劑盒進行檢測。

1.4 統(tǒng)計學處理

本研究采取SPSS23.0軟件分析，計量資料采用（x±s）表示，符合正態(tài)分布的獨立資料采用t檢驗，計數(shù)資料以百分比表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組治療效果及結腸炎癥積分比較

觀察組治療總有效率為84.00%，明顯高于對照組治療總有效率74.49%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。兩組患者治療前結腸炎癥積分比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），治療后觀察組結腸炎癥積分明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組治療效果及結腸炎癥積分比較

表2 兩組治療前后CD4、CD25、占調(diào)節(jié)性 T細胞比例及IL-10水平比較（± s）

表2 兩組治療前后CD4、CD25、占調(diào)節(jié)性 T細胞比例及IL-10水平比較（± s）

組別 CD4/CD25 CD4、CD25占調(diào)節(jié)性T細胞比例 IL-10（ng/L）治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后對照組（n=98） 35.32±4.08 33.01±3.98 5.56±0.85 6.69±0.91 15.32±1.88 16.02±1.79觀察組（n=100） 35.01±3.98 26.21±4.32 5.58±0.91 9.41±0.77 15.61±1.92 19.92±2.01 t 0.541 11.523 0.160 22.683 1.074 14.425 P＞0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05

2.2 兩組治療前后CD4/CD25、占調(diào)節(jié)性T細胞比例及IL-10水平比較

兩組患者治療前CD4/CD25、占調(diào)節(jié)性T細胞比例與IL-10比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。治療后，觀察組CD4/CD25水平明顯高于對照組，CD4、CD25占調(diào)節(jié)性T細胞比例明顯大于對照組，IL-10水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表2。

3 討論

現(xiàn)代醫(yī)學對于潰瘍性結腸炎的發(fā)病機制研究的還不透徹，目前認為影響UC的因素主要有遺傳、環(huán)境、飲食、心理作用，此外腸道菌群可影響腸道免疫系統(tǒng)，導致腸道炎癥進一步加重[6]。研究表明[7]，雖然UC發(fā)病影響因素較多，但多具有關聯(lián)性，如精神心理因素可導致交感、副交感神經(jīng)興奮，產(chǎn)生一系列免疫功能調(diào)節(jié)異常。關于UC治療方法除常規(guī)運用5-氨基水楊酸類制劑、糖皮質(zhì)激素及細胞毒藥物外，微生態(tài)制劑逐漸被人們所重視。研究表明[7]，UC患者的腸道菌群處于失調(diào)狀態(tài)。微生態(tài)制劑除調(diào)節(jié)腸道菌群具有較好的效果外，不良反應也較少，患者經(jīng)濟負擔小，依從性較好。

本研究主要對比觀察雙歧三聯(lián)活菌膠囊輔助治療UC的效果，結果發(fā)現(xiàn)，觀察組服用雙歧三聯(lián)活菌膠囊后UC治療總有效率為84.00%，明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。雙歧三聯(lián)活菌膠囊主要由長型雙歧桿菌、保加利亞乳桿菌、噬熱鏈球菌組成，這三種菌群為重要的腸道益生菌，不僅能夠促進腸道內(nèi)菌群平衡，還有利于維持腸道微生態(tài)內(nèi)環(huán)境，可以有效阻止病原體的侵入[8-9]。本研究觀察組結腸炎癥積分治療后明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），說明雙歧三聯(lián)活菌膠囊能減輕結腸黏膜炎癥水平，對UC患者結腸炎癥具有一定的緩解或治療作用。研究表明[10]，雙歧三聯(lián)活菌膠囊能有效降低UC患者臨床癥狀積分與結腸炎癥積分，與本研究結果一致。關于雙歧三聯(lián)活菌膠囊在UC中的藥理機制目前研究還較少，但對于奧沙拉嗪治療UC藥理機制較明確，即作為新型5-ASA衍生物，通過抑制前列腺素的合成，并增強細胞膜通透性，從而減輕或抑制炎癥反應[11]，但UC患者一旦停服奧沙拉嗪，病情就會反復，且長期服藥帶來的不良反應：腹瀉、軟便等，嚴重影響患者的生活質(zhì)量[12]。所以輔助用藥就顯得尤為關鍵，本研究發(fā)現(xiàn)雙歧三聯(lián)活菌影響免疫系統(tǒng)主要通過影響CD4、CD25細胞，而這兩類免疫細胞具有免疫抑制性、免疫無能性兩大特征[13-14]，其作用于免疫系統(tǒng)是通過抑制免疫性T細胞活性，促進抑制性細胞因子例如IL-10、TGF-β的活性，從而起到抑制炎癥反應的作用[15]。本研究觀察組治療后CD4/CD25水平明顯高于對照組，占調(diào)節(jié)性T細胞比例明顯大于對照組，IL-10水平明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），說明了雙歧三聯(lián)活菌膠囊對CD4、CD25的直接影響作用。目前認為[14-15]，CD4、CD25調(diào)節(jié)性T細胞的變化可能與腸道菌群有關，一方面CD4、CD25細胞是由于腸道在正常菌群產(chǎn)生的外源性抗原誘導產(chǎn)生，此外，腸道正常菌群可組織非成熟樹突狀細胞成熟，從而促進CD4、CD25調(diào)節(jié)性T細胞成熟，因此，正常菌群失調(diào)可導致CD4/CD25細胞比例發(fā)生變化[16-17]。

綜上所述，雙歧三聯(lián)活菌膠囊輔助運用于潰瘍性結腸炎的治療中，能有效提高治療效果，降低結腸炎癥積分，改善患者免疫功能，值得臨床運用。