倫韋丹，項(xiàng)衛(wèi)衛(wèi)，盧玲，梁艷，廖園美

（贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院血液病實(shí)驗(yàn)室，江西 贛州 341000）

急性髓系白血病屬于急性白血病的常見類型，主要是指造血系統(tǒng)的髓系原始細(xì)胞出現(xiàn)克隆性惡性增殖性病變[1-2]，患病人群以成年群體為主。目前，臨床主要對(duì)該類患者實(shí)施化學(xué)藥物治療，但較多研究顯示[3-4]，大約有20%～40%的患者不能達(dá)到完全緩解，且患者復(fù)發(fā)率較高，所以，為改善患者預(yù)后，應(yīng)盡早對(duì)患者預(yù)后效果進(jìn)行評(píng)估和預(yù)測(cè)，并采取相關(guān)的干預(yù)措施。以往，臨床常將脾腫大、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和骨髓原始細(xì)胞數(shù)等指標(biāo)作為評(píng)價(jià)患者預(yù)后的常見方法，但上述指標(biāo)的敏感性及特異性不高。所以，為便于指導(dǎo)治療，尋找早期、可靠的預(yù)測(cè)預(yù)后指標(biāo)十分重要[5]。本院對(duì)82例急性髓系白血病患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，以探究白血病細(xì)胞CD56抗原表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系，見如下報(bào)道。

1 資料和方法

1.1 臨床資料 以2015年2月～2017年2月本院82例急性髓系白血病患者為觀察對(duì)象，結(jié)合CD56抗原表達(dá)情況將其分為CD56+組（30例）、CD56-組（52例）。CD56+組30例患者年齡為18～58歲，平均年齡（35.75±8.73），男女分別為17（56.67%）、13（43.33%）例，其中18例患者CD56陽(yáng)性率≥50%，12例患者CD56陽(yáng)性率＜50%。CD56-組52例患者年齡為19～57歲，平均年齡（35.69±8.65），男女分別為30（57.69%）、22（42.31%）例。CD56+組和CD56-組患者的資料經(jīng)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 方法 采集骨髓標(biāo)本2～3 ml于肝素抗凝管中，所有標(biāo)本于采集后48小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)。取骨髓細(xì)胞懸液100 ul加入試管中，向其中加入CD56單克隆抗體10 ul，單抗均購(gòu)自BD公司，室溫暗處孵育15 min，使抗體與細(xì)胞結(jié)合達(dá)飽和，然后加入紅細(xì)胞裂解液（BD公司）2.0 ml，震蕩15 s，室溫暗處孵育15分鐘，1600轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，棄上清，加PBS液2.0 ml，震蕩15 s，1600轉(zhuǎn)/分鐘再離心5 min，棄上清，加PBS液0.5 ml，震蕩15 s混勻制成懸液，采用美國(guó)BD FACS Calibur型流式細(xì)胞儀采集數(shù)據(jù)，CellQuest軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行多重設(shè)門顏色示蹤法分析。用同一設(shè)定條件檢測(cè)，收集每管中的100 000個(gè)細(xì)胞。采用CD45-Log為縱坐標(biāo)，SSC-Log為橫坐標(biāo)，建立CD45／SSC散點(diǎn)圖根據(jù)不同細(xì)胞CD45表達(dá)的強(qiáng)度和細(xì)胞內(nèi)顆粒的大小，將淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及幼稚紅細(xì)胞區(qū)分開。并分析白血病細(xì)胞群CD56免疫表型表達(dá)情況，以CD56抗原的表達(dá)大于20%為表達(dá)陽(yáng)性，反之為陰性[6]。

1.3 評(píng)估指標(biāo) 隨訪一年，研究對(duì)比CD56+組和CD56-組患者首次化療后完全緩解率、累積完全緩解率、中位生存時(shí)間、中位無(wú)病生存時(shí)間及復(fù)發(fā)率。骨髓完全緩解[7]：骨髓形態(tài)學(xué)檢查顯示原始細(xì)胞和幼稚細(xì)胞比例≤例%。復(fù)發(fā)[8]：包括以下3種情況，①骨髓原始細(xì)胞比例≥例原%；②骨髓原始細(xì)胞比例介于5%～20%，且經(jīng)有效抗白血病治療一個(gè)療程后療效仍未達(dá)到完全緩解；③骨髓外白血病細(xì)胞浸潤(rùn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 選擇統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 21.0進(jìn)行指標(biāo)對(duì)比，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)比分析CD56+組和CD56-組患者首次化療后完全緩解率、累積完全緩解率及復(fù)發(fā)率 CD56+組患者首次化療后完全緩解率、累積完全緩解率相比CD56-組（57.69%、88.46%）明顯更低（P＜0.05），且復(fù)發(fā)率相比CD56-組明顯更高（P＜0.05），見表1。

表1 對(duì)比分析CD56+組和CD56-組首次化療后完全緩解率、累積完全緩解率及復(fù)發(fā)率[n（%）]

2.2 對(duì)比分析CD56+組和CD56-組患者中位生存時(shí)間、中位無(wú)病生存時(shí)間 CD56+組患者中位生存時(shí)間、中位無(wú)病生存時(shí)間相比CD56-組患者明顯更短（P＜0.05），見表2。

表2 對(duì)比分析CD56+組和CD56-組患者中位生存時(shí)間、中位無(wú)病生存時(shí)間

2.3 對(duì)比分析CD56+組不同陽(yáng)性表達(dá)率患者首次化療后完全緩解率、累積完全緩解率及復(fù)發(fā)率 CD56+組陽(yáng)性表達(dá)率≥50%患者的完全緩解率及復(fù)發(fā)率和陽(yáng)性表達(dá)率＜50%患者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但陽(yáng)性表達(dá)率＜50%患者的累積完全緩解率相比陽(yáng)性表達(dá)率≥50%組明顯更高（P＜0.05），見表3。

表3 對(duì)比分析CD56+組不同陽(yáng)性表達(dá)率患者首次化療后完全緩解率、累積完全緩解率及復(fù)發(fā)率[n（%）]

2.4 對(duì)比分析CD56+組不同陽(yáng)性表達(dá)率患者中位生存時(shí)間、中位無(wú)病生存時(shí)間CD56+組陽(yáng)性表達(dá)率≥50%患者的中位生存時(shí)間、中位無(wú)病生存時(shí)間相比陽(yáng)性表達(dá)率＜50%組患者明顯更短（P＜0.05），見表4。

表4 對(duì)比分析CD56+組不同陽(yáng)性表達(dá)率患者的中位生存時(shí)間、中位無(wú)病生存時(shí)間

3 討論

較多研究證實(shí)[9-10]，免疫表型可有效幫助臨床醫(yī)師對(duì)急性髓系白血病進(jìn)行診斷和分型判斷，但對(duì)于能否將其作為評(píng)估患者預(yù)后的指標(biāo)依然存在一定爭(zhēng)議。

白血病細(xì)胞CD56抗原屬于超免疫球蛋白之一，是人類天然免疫系統(tǒng)的重要組成部分，臨床上常將其稱為“橋梁細(xì)胞”，該分子不僅具有自然殺傷功能，還具有一定的自我保護(hù)作用，較多研究發(fā)現(xiàn)，該分子在抗腫瘤以及抗肝炎病毒感染中具有較重要的作用[11-12]。本研究為探究白血病細(xì)胞CD56抗原表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系，對(duì)82例急性髓系白血病患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，研究發(fā)現(xiàn)，CD56+組患者首次化療后完全緩解率、累積完全緩解率相比CD56-組明顯更低，復(fù)發(fā)率相比CD56-組明顯更高，且CD56+組患者中位生存時(shí)間、中位無(wú)病生存時(shí)間相比CD56-組患者明顯更短，這提示白血病細(xì)胞CD56抗原表達(dá)陽(yáng)性的AML患者的預(yù)后較CD56抗原表達(dá)陰性患者更差，因此，可將白血病細(xì)胞CD56抗原表達(dá)陽(yáng)性作為評(píng)估患者預(yù)后不良的有效指標(biāo)。

同時(shí)，數(shù)據(jù)顯示，CD56+組陽(yáng)性表達(dá)率≥50%患者的完全緩解率及復(fù)發(fā)率和陽(yáng)性表達(dá)率＜50%患者的比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但陽(yáng)性表達(dá)率＜50%患者的累積完全緩解率相比陽(yáng)性表達(dá)率≥50%組明顯更高，且CD56+組陽(yáng)性表達(dá)率≥50%患者的中位生存時(shí)間、中位無(wú)病生存時(shí)間相比陽(yáng)性表達(dá)率＜50%組患者明顯更短，這提示白血病細(xì)胞CD56抗原表達(dá)陽(yáng)性率越高，則AML患者的預(yù)后越差，兩者存在正相關(guān)性，這亦提示我們?cè)趯?duì)白血病細(xì)胞CD56抗原表達(dá)陽(yáng)性患者實(shí)施治療時(shí)，應(yīng)結(jié)合患者的陽(yáng)性率為其制定合適的干預(yù)方案，對(duì)于陽(yáng)性率較高的患者，可對(duì)其實(shí)施更強(qiáng)的化療方案，或?qū)颊邔?shí)施多種聯(lián)合治療方案。

綜上所得，白血病細(xì)胞CD56抗原表達(dá)陽(yáng)性是急性髓系白血病患者預(yù)后不良的高危因素，且抗原表達(dá)陽(yáng)性率越高，則患者預(yù)后越差。