張培東

（山東省高密市畜牧局 261500）

大腸桿菌病是獸醫(yī)臨床上的常見疾病，能引起多種動物發(fā)病。近年來，隨著養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，抗生素在疾病的防治過程中起著至關(guān)重要的作用，但由于抗生素頻繁使用及大量濫用，耐藥菌株不斷增多，特別是多重耐藥菌株的出現(xiàn)，對大腸桿菌病的防治帶來極大困難，通過開展耐藥性試驗(yàn)分析，可以為養(yǎng)殖業(yè)戶提高可靠的臨床用藥指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌種

經(jīng)分離鑒定得到的120株大腸桿菌。

1.1.2 培養(yǎng)基

普通營養(yǎng)瓊脂、營養(yǎng)肉湯。

1.1.3 主要儀器

醫(yī)用凈化工作臺、電熱恒溫培養(yǎng)箱、空氣浴振蕩器、可調(diào)式微量移液器等。

1.1.4 藥敏紙片

紅霉素、阿奇霉素、克拉霉素、四環(huán)素、多西環(huán)素、阿米卡星、大觀霉素、頭孢噻吩、頭孢唑啉、頭孢呋辛等均購自杭州天和微生物試劑有限公司。

1.2 方法

1.2.1 菌液制備

取一環(huán)之前分離保存的菌株分區(qū)劃線接種于培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)，得到單一菌落后，無菌操作接種于營養(yǎng)肉湯的試管中，放入搖床培養(yǎng)12h，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 耐藥試驗(yàn)

取200μl菌液于培養(yǎng)基中，涂布均勻，待菌液吸收后，用無菌鑷子將藥敏紙片貼到瓊脂平板表面，均勻分布，間隔一定距離，每個平板分布7種藥敏紙片，壓實(shí)紙片，倒置平板，37℃培養(yǎng)18h后觀察結(jié)果，測量抑菌圈直徑，根據(jù)《抗菌藥物敏感性試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)解讀》進(jìn)行耐藥性結(jié)果判定[1]。

2 結(jié)果與分析

2.1 多重耐藥試驗(yàn)結(jié)果

對120株大腸桿菌進(jìn)行多重耐藥現(xiàn)象分析，結(jié)果見圖1。

從圖1中可看出，該雞場多重耐藥嚴(yán)重，耐17種藥物的菌株數(shù)最多，有27株，達(dá)到20.78%，存在6株大腸桿菌耐20種藥物。

圖1 多重耐藥試驗(yàn)結(jié)果

2.2 整體耐藥試驗(yàn)結(jié)果

對120株大腸桿菌進(jìn)行耐藥性檢測，結(jié)果見圖2。

圖2 總體耐藥實(shí)驗(yàn)結(jié)果

從圖2可以看出，大環(huán)內(nèi)酯類中紅霉素99%耐藥；四環(huán)素類中四環(huán)素99%耐藥；氟喹諾酮類60%～80%耐藥；氨基糖苷類中鏈霉素90%耐藥，其余兩種50%耐藥；青霉素類、頭孢類大部分98%以上耐藥，第四代頭孢50%耐藥。

3 討論

本次試驗(yàn)?zāi)退幮暂^高的有紅霉素、四環(huán)素、鏈霉素、阿莫西林、氯霉素及頭孢類抗生素藥物占87.6%～99.2%，其中第四代頭孢耐藥性較低占45.3%。氨基糖苷類的阿米卡星和大觀霉素敏感性較好，敏感性基本保持在40%～50%。

4 小結(jié)

紅霉素、四環(huán)素、阿莫西林、第一代頭孢、第二代頭孢、第三代頭孢、氯霉素的耐藥性很高，阿米卡星的敏感性最強(qiáng)，多重耐藥情況嚴(yán)重。