王孝宇，楊嚴(yán)鷗

(安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，安徽 合肥 230036)

宛曉春

(安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)茶與食品科技學(xué)院，農(nóng)業(yè)部茶葉生物技術(shù)重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室，安徽 合肥 230036)

岳鼎鼎

(安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，安徽 合肥 230036)

陳路

(農(nóng)業(yè)農(nóng)村部華南水產(chǎn)與畜禽飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東恒興飼料實(shí)業(yè)股份有限公司，廣東 湛江 524094)

鐘娟

(安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，安徽 合肥 230036)

我國(guó)茶葉種類繁多，按發(fā)酵程度與發(fā)酵時(shí)間，可分為綠茶、紅茶、黃茶以及其他各類茶葉。近年來(lái)，人們將茶葉下腳料應(yīng)用到水產(chǎn)養(yǎng)殖中，但主要是關(guān)于綠茶的利用研究[1～4]，也有研究探討了紅茶對(duì)草魚(yú)肝臟幾項(xiàng)關(guān)鍵調(diào)控酶的影響，顯示紅茶對(duì)草魚(yú)轉(zhuǎn)氨酶及脂肪代謝酶活性有抑制作用[5]。不同茶葉成分差異較大，綠茶是非發(fā)酵茶，茶葉中的重要成分是茶多酚，常占其干重的30%左右，而紅茶是完全發(fā)酵茶，重要成分是茶多酚氧化后形成的茶色素[6～8]，黃茶是輕發(fā)酵茶，加工工藝近似綠茶，但在干燥過(guò)程的前或后有“悶黃”工藝，促使多酚等物質(zhì)氧化。本研究選擇我國(guó)重要的養(yǎng)殖品種草魚(yú)(Ctenopharyngodonidellus)為試驗(yàn)對(duì)象，探討黃茶對(duì)草魚(yú)代謝酶活性的影響，以為在生產(chǎn)中更好地利用茶葉資源提供依據(jù)，為開(kāi)發(fā)茶葉在魚(yú)類健康養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)魚(yú)取自安徽合肥巢湖三珍養(yǎng)殖場(chǎng)，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后用2%食鹽水消毒，放入循環(huán)水水族箱內(nèi)暫養(yǎng)2周，暫養(yǎng)設(shè)施與試驗(yàn)設(shè)施相同，暫養(yǎng)期間投喂基礎(chǔ)飼料。

基礎(chǔ)飼料自行配制，具體配方參見(jiàn)文獻(xiàn)[9]。試驗(yàn)飼料為在基礎(chǔ)飼料中加入黃茶(霍山黃芽)，具體制作時(shí)選取黃茶加工后產(chǎn)生的下腳料磨成粉，過(guò)60目篩，再將茶粉按不同添加量與各種粉狀飼料原料混勻，以飼料機(jī)制成粒徑1.5mm 顆粒飼料，65℃烘干后于-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)飼料共7種，其黃茶含量分別為0%(對(duì)照組)、0.075%、0.15%、0.30%、0.60%、1.20%和2.40%，每種飼料設(shè)3個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)開(kāi)始前，將魚(yú)饑餓24h后隨機(jī)取樣稱重，每箱每尾魚(yú)初始平均體重為(5.45±0.52)g，每箱放25尾。養(yǎng)殖試驗(yàn)持續(xù)56d，每天9:00和15:00各投適量飼料1次，1 h后回收殘餌，70°C烘干，用以矯正攝食量。

循環(huán)水養(yǎng)魚(yú)系統(tǒng)為21只塑料水族箱 (規(guī)格60cm×60cm×65cm，有效水體180L)，試驗(yàn)水溫為(28±2)℃ ，日光燈照明時(shí)間為07:00～19:00，其他水質(zhì)條件參見(jiàn)文獻(xiàn)[9]。

試驗(yàn)結(jié)束后取肝胰臟測(cè)定蛋白質(zhì)與脂肪的酶活指標(biāo)。取肝胰臟前先將養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束的魚(yú)饑餓24h，再每箱隨機(jī)取7尾，冰盤解剖取部分肝胰臟，等量混合后置于液氮罐保存。測(cè)定采用上海將來(lái)生物試劑公司試劑盒，方法參見(jiàn)試劑盒說(shuō)明書(shū)。

1.3 數(shù)據(jù)分析

描述性統(tǒng)計(jì)值用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。用單因素方差分析(ANOVA)后進(jìn)行組間差異的多重比較(Duncan’s procedure)。顯著性水平設(shè)置為α = 0.05，統(tǒng)計(jì)軟件為SPSS 16.0。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃茶對(duì)草魚(yú)肝臟轉(zhuǎn)氨酶等酶活性的影響

試驗(yàn)期間無(wú)死魚(yú)現(xiàn)象，各組間生長(zhǎng)無(wú)顯著差異。由表1可知，黃茶添加組的γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶的活性變化基本呈遞減趨勢(shì)，黃茶添加量越高則酶活性越低，除乳酸脫氫酶的0.075%與0.15%組外，其余都顯著低于對(duì)照組(P<0.05)；谷草轉(zhuǎn)氨酶活性在0.15%～0.60%試驗(yàn)組與對(duì)照組無(wú)顯著差異，其余各試驗(yàn)組均顯著低于對(duì)照組，堿性磷酸酶除0.60%組顯著高于對(duì)照組外(P<0.05)，其余各試驗(yàn)組基本與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表1 黃茶對(duì)草魚(yú)肝臟轉(zhuǎn)氨酶及脫氫酶等酶活性的影響

注：同行數(shù)據(jù)不同上標(biāo)字母表示有組間顯著差異(P<0.05)，表2同。

2.2 黃茶對(duì)草魚(yú)肝臟脂肪代謝酶等酶活性的影響

由表2可知，隨著飼料中黃茶添加量增加，脂肪酸合成酶、脂蛋白脂酶、肝脂酶活性以及總脂酶活性均比對(duì)照組顯著下降 (P<0.05)，其中脂肪酸合成酶、脂蛋白脂酶與總脂酶活性在各添加組之間基本無(wú)顯著差異。

表2 黃茶對(duì)草魚(yú)脂肪代謝酶等酶活性的影響

3 討論

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶可將谷胱甘肽上的γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)移到另一個(gè)肽或另一個(gè)氨基酸，主要作用是參與谷胱甘肽的代謝[10]。本研究中黃茶導(dǎo)致肝臟中γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶活性顯著降低，這可能意味著肝臟中谷胱甘肽的含量會(huì)有所增加，而谷胱甘肽是體內(nèi)重要的抗氧化劑和自由基清除劑[11]，因此，肝臟中的γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶活性顯著降低可能是對(duì)肝臟的一種保護(hù)。Burrells等也指出，當(dāng)飼料植物蛋白含量提高時(shí)，虹鱒的肝臟受到損傷，γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶的活性上升[12]。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶與谷草轉(zhuǎn)氨酶是廣泛存在于動(dòng)物組織細(xì)胞線粒體內(nèi)的重要氨基轉(zhuǎn)移酶，在機(jī)體蛋白質(zhì)代謝中起著重要的作用，其活性高低可以在一定程度上反映機(jī)體氨基的轉(zhuǎn)移活力[13,14]。由于谷丙轉(zhuǎn)氨酶能將其他氨基酸轉(zhuǎn)化成丙酮酸[15]，本研究中黃茶能顯著降低谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性，即可抑制丙酮酸的合成，同時(shí)一定劑量的黃茶對(duì)谷草轉(zhuǎn)氨酶活性也有降低作用。

脂蛋白脂酶是甘油三酯降解的限速酶，參加各種脂蛋白的代謝[16]，肝脂酶主要參與高密度脂蛋白的代謝[17,18]。本研究中，黃茶導(dǎo)致脂蛋白脂酶、肝脂酶的總脂酶(脂蛋白脂酶與肝脂酶的合稱)活性顯著下降，與紅茶作用趨勢(shì)與作用程度相似[5]。