孫全文, 韓 昱, 趙治海, 范光宇, 郭 鵬, 劉春陽, 孫茂紅, 靳玲品, 趙月平
(1.河北北方學(xué)院,河北張家口 075000;2.張家口市農(nóng)業(yè)科學(xué)院,河北張家口 075000;3.北京好友巡天生物技術(shù)有限責(zé)任公司,北京海淀 100080)
張雜谷秸稈中所含的粗蛋白質(zhì)為6.22%~7.35%,其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值與有“飼草之王”稱號(hào)的苜蓿接近,高于其他禾本科牧草。由此看來,“張雜谷”在飼料業(yè)方面也有著很大的開發(fā)前景。
奶牛采食量、產(chǎn)奶量、原料奶質(zhì)量和奶牛的健康受粗飼料品質(zhì)影響很大,粗飼料的品質(zhì)除了受到播種土地、環(huán)境以及加工工藝影響外,最重要的還受其收割時(shí)期的影響。不同的牧草收割期會(huì)很大程度上影響牧草干物質(zhì)(DM)、粗蛋白質(zhì)(CP)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)和水溶性碳水化合物(WSC)等營(yíng)養(yǎng)成分含量,因此合適的收割期會(huì)帶來最大的經(jīng)濟(jì)效益(Coblentz,1998)。
微生物發(fā)酵飼料是以植物性農(nóng)副產(chǎn)品為主要原料,在有益微生物的代謝作用下,部分蛋白質(zhì)、脂肪和多糖等大分子物質(zhì)被降解,生成可溶性多肽和有機(jī)酸等小分子物質(zhì),最終產(chǎn)生活菌含量高、適口性好、營(yíng)養(yǎng)豐富的生物飼料。其有效成分包括酶類、有益微生物菌體蛋白、氨基酸、活性益生菌、有機(jī)酸等。通過發(fā)酵處理不僅可以提高飼料的消化利用率、改善飼料品質(zhì),還能調(diào)節(jié)動(dòng)物體內(nèi)的微生態(tài)平衡,實(shí)現(xiàn)增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗腹瀉、促生長(zhǎng)等作用(孫汝江,2012)。
張雜谷是一類高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量的飼料,蛋白質(zhì)、維生素、礦物質(zhì)等含量均高于其他谷草(邱風(fēng)倉,2013)。然而,目前關(guān)于不同收割時(shí)期的張雜谷及其發(fā)酵處理,其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值有何變化以及作為奶牛日糧對(duì)其瘤胃降解率影響的相關(guān)研究鮮有報(bào)道。因此,本試驗(yàn)研究收割期及發(fā)酵處理對(duì)張雜谷常規(guī)營(yíng)養(yǎng)組分及氨基酸含量的影響,以及分析不同收獲期及發(fā)酵處理后的張雜谷對(duì)奶牛瘤胃發(fā)酵性能的影響,以期為張雜谷在奶牛業(yè)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
1.1 張雜谷處理 試驗(yàn)用張雜谷在4月下旬開始種植,8月中旬進(jìn)行早期收割。在草地中隨機(jī)選取5塊15 m2大小的地塊,在每個(gè)地塊中隨機(jī)割取4~5 kg張雜谷,作為早期收割樣本。待谷草繼續(xù)生長(zhǎng)半個(gè)月后,在同樣5個(gè)地塊中繼續(xù)隨機(jī)割取4~5 kg張雜谷,作為晚期收割樣本。將所取樣本分為4組。每個(gè)早期收割及晚期收割的樣本各留一半,即為早期收割干草組(EH組)和晚期收割干草組(LH組)。另外分取一半進(jìn)行發(fā)酵處理,即為早期收割發(fā)酵干草組(EF組)和晚期收割發(fā)酵干草組(LF組)。將該2組干草切短成5~8 cm,選擇活化后2 h活菌數(shù)達(dá)到20億/mL的細(xì)菌,30℃厭氧發(fā)酵7 d后,粉碎處理,并過40目篩保存?zhèn)溆?。?5℃下烘48 h,取出后在空氣中放置48 h。
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及日糧配方 選擇4頭體況良好,年齡、體重、胎次相近,安裝永久性瘤胃瘺管的健康荷斯坦青年牛作為供體牛,按照1.3倍維持需要配制日糧,基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。
表1 基礎(chǔ)日糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平(DM基礎(chǔ))
1.3 試驗(yàn)方法
1.3.1 張雜谷營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定 參考 《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》,分別測(cè)定4個(gè)組中張雜谷樣本的營(yíng)養(yǎng)成分。
1.3.2 奶牛瘤胃降解率測(cè)定 采用尼龍袋法測(cè)定張雜谷在奶牛瘤胃內(nèi)的降解率,試驗(yàn)方法參見Фrskov(1979)及馮仰廉(2004)方法。 選用 40 ~60 mm孔徑的尼龍布,制成8 cm×12 cm的尼龍袋,袋底部?jī)山浅殊g圓形。選擇直徑為0.5~0.8 cm的半軟塑料管,長(zhǎng)度為50 cm,用橡皮筋將裝好樣品的尼龍袋綁緊,在塑料管另一端用尼龍線系緊,將塑料管固定在瘤胃瘺管蓋。測(cè)定22個(gè)飼料樣本在奶牛瘤胃內(nèi) 0、4、8、12、24、48、72 h 的 DM、CP、NDF及ADF的實(shí)時(shí)降解率并基于實(shí)時(shí)降解率值計(jì)算有效降解率和瘤胃發(fā)酵參數(shù)。
1.4 數(shù)據(jù)處理
1.4.1 目標(biāo)成分實(shí)時(shí)降解率的測(cè)定 裝袋樣品逃逸率、校正裝袋樣品量、目標(biāo)成分降解量和目標(biāo)成分實(shí)時(shí)降解率的計(jì)算公式如下:
校正裝袋樣品量/g=實(shí)際裝袋樣品量×[1-樣品逃逸率];
某目標(biāo)成分某培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)的降解量/g=[校正裝袋樣品量/g×空白試驗(yàn)殘余物中某目標(biāo)成分的含量/%]- [某培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)殘余物的重量/g×某培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)殘余物中某目標(biāo)成分的含量/%];
某目標(biāo)成分某培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)的實(shí)時(shí)降解率/g=
1.4.2 降解參數(shù)的計(jì)算 飼料中某成分在瘤胃中的實(shí)時(shí)降解率符合指數(shù)曲線:
式中:P為t時(shí)刻被測(cè)樣品某目標(biāo)成分的實(shí)時(shí)瘤胃降解率,%;a為被測(cè)樣品某目標(biāo)成分的快速降解部分,%;b為被測(cè)樣品某目標(biāo)成分的慢速降解部分,%;c為b部分的降解速率,%/h;t為飼料在瘤胃內(nèi)停留的時(shí)間,h。
利用各培養(yǎng)時(shí)間點(diǎn)實(shí)時(shí)降解率的數(shù)據(jù) (P和t),采用飼料瘤胃降解參數(shù)計(jì)算軟件,計(jì)算式中a、b和c值。
1.4.3 有效降解率的計(jì)算 利用計(jì)算結(jié)果(a、b、c值)采用下式計(jì)算待測(cè)飼料目標(biāo)成分的有效降解率:
式中:P為待測(cè)樣品某目標(biāo)成分的有效降解率,%;a為待測(cè)樣品某目標(biāo)成分的快速降解部分,%;b為待測(cè)樣品某目標(biāo)成分的慢速降解部分,%;c為b部分的降解速率,%/h;k為待測(cè)樣品某目標(biāo)成分的瘤胃外流速率,%/h。
表2 收割時(shí)間與發(fā)酵處理對(duì)張雜谷營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)的影響
式中的k值為0.025。試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel整理統(tǒng)計(jì)后,試驗(yàn)按照兩因素設(shè)計(jì),采用SAS 9.2的MIXED程序進(jìn)行分析。數(shù)據(jù)采用以下分析模型:Y=F1+F2+F1×F2+μ,所有數(shù)據(jù)采用Tukey檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較。
2.1 收割時(shí)期及發(fā)酵處理對(duì)張雜谷營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)的影響 由表2可知,隨著植物生長(zhǎng)時(shí)間延長(zhǎng),成熟度提高,早期收割張雜谷粗灰分、粗蛋白質(zhì)、NDF及ADF的含量極顯著低于晚期收割張雜谷 (p<0.01)。說明早期收割的張雜谷纖維和有機(jī)物含量?jī)?yōu)于晚期收割張雜谷,但蛋白質(zhì)含量較晚期收割張雜谷較低。發(fā)酵處理極顯著降低張雜谷干物質(zhì)含量 (p<0.01),顯著降低張雜谷粗蛋白質(zhì)含量(P < 0.05);顯著增加 WSC 含量(P < 0.05)。收割時(shí)間和發(fā)酵處理二因素互作對(duì)張雜谷粗灰分、ADF及WSC含量有顯著影響 (p<0.05),EF組張雜谷WSC含量最優(yōu)。
2.2 收割時(shí)期及發(fā)酵處理對(duì)張雜谷氨基酸含量的影響 由表3可知,早期收割張雜谷的賴氨酸、精氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、甘氨酸含量均顯著低于晚期收割張雜谷(p<0.05),亮氨酸和谷氨酸的含量顯著高于晚期收割張雜谷(P < 0.05)。
發(fā)酵處理張雜谷中天冬氨酸及脯氨酸含量顯著降低(p<0.05),谷氨酸、甘氨酸和丙氨酸含量顯著增加(p<0.05)。天冬氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、甘氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、精氨酸、脯氨酸亮氨酸和賴氨酸含量受到收割時(shí)間與發(fā)酵處理交互作用的影響(p<0.05)。
綜上所述,EF組張雜谷WSC含量及絲氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、異亮氨酸和亮氨酸含量較高。
2.3 收割時(shí)間與發(fā)酵處理對(duì)張雜谷干物質(zhì)有效降解率的影響 由表4和圖1可知,收割時(shí)期對(duì)張雜谷在瘤胃內(nèi)干物質(zhì)有效降解率無顯著影響,發(fā)酵處理對(duì)早期收割張雜谷在瘤胃內(nèi)干物質(zhì)有效降解率有降低的趨勢(shì)(P=0.07),收割時(shí)間及發(fā)酵處理對(duì)張雜谷干物質(zhì)有效降解率有顯著互作效應(yīng)(P=0.05),EF組張雜谷干物質(zhì)有效降解率(35.05%)低于 EH 組(39.05%)、LF 組(37.76%)及LH 組(37.70%)。
表3 收割時(shí)間與發(fā)酵處理對(duì)張雜谷氨基酸含量的影響%
表4 收割時(shí)間與發(fā)酵處理對(duì)張雜谷干物質(zhì)有效降解率的影響
圖1 干物質(zhì)有效降解率
2.4 收割時(shí)間與發(fā)酵處理對(duì)張雜谷粗蛋白質(zhì)有效降解率的影響 由表5和圖2可知,早期收割張雜谷粗蛋白質(zhì)有效降解率顯著低于晚期收割張雜谷(p<0.05),發(fā)酵處理張雜谷粗蛋白質(zhì)有效降解率顯著低于未發(fā)酵張雜谷(p<0.05)。收割時(shí)間及發(fā)酵處理互作效應(yīng)對(duì)張雜谷粗蛋白質(zhì)有效降解率無顯著影響。然而,EF組張雜谷粗蛋白質(zhì)有效降解率(31.87%)低于其他三組。
表5 收割時(shí)間與發(fā)酵處理對(duì)張雜谷粗蛋白有效降解率的影響
2.5 收割時(shí)間與發(fā)酵處理對(duì)張雜谷有機(jī)物有效降解率的影響 由表6和圖3可知,收割時(shí)期、發(fā)酵處理二者互作效應(yīng)對(duì)張雜谷有機(jī)物有效降解率無顯著的影響(P>0.05)。
圖2 粗蛋白有效降解率
表6 收割時(shí)間與發(fā)酵處理對(duì)張雜谷有機(jī)物有效降解率的影響
圖3 有機(jī)物有效降解率
2.6 收割時(shí)間與發(fā)酵處理對(duì)張雜谷中性洗滌纖維有效降解率的影響 由表7和圖4可知,早期收割張雜谷NDF有效降解率顯著低于晚期收割張雜谷(p<0.05),發(fā)酵處理及二者互作效應(yīng)對(duì)張雜谷NDF有效降解率無顯著影響。EF組張雜谷NDF有效降解率(23.45%)低于其他三組(EH組25.20%、LF組31.12%、LH組30.68%)。
表7 收割時(shí)間與發(fā)酵處理對(duì)張雜谷中性洗滌纖維效降解率的影響
圖4 NDF有效降解率
飼料成本占奶牛總成本的60%~70%,其中優(yōu)質(zhì)粗飼料在奶牛日糧中占有至關(guān)重要的地位。粗飼料來源廣泛,種類繁多,常規(guī)的一般為各類青貯、干草和作物秸稈。在我國(guó)奶牛飼養(yǎng)中,干草主要有羊草、燕麥草和苜蓿,但是國(guó)內(nèi)種植的品質(zhì)普遍不如進(jìn)口品質(zhì)高,因此常需從國(guó)外進(jìn)口,增加飼料成本;羊草主要來自于天然草場(chǎng),因此在牧草中常?;煊衅渌敛?,而且由于天然草場(chǎng)比較貧瘠,能夠生長(zhǎng)在天然草場(chǎng)上的牧草中營(yíng)養(yǎng)成分也很低,同時(shí)還受到氣候的影響,這樣導(dǎo)致羊草的營(yíng)養(yǎng)成分并不是很穩(wěn)定(孫茂紅,2015)。
張雜谷由張家口農(nóng)科院研制而成,截至目前,已育成“張雜谷”品種9個(gè)。張雜谷的高產(chǎn)高抗性能是人們最關(guān)注的,其和普通谷子的干物質(zhì)積累雖都表現(xiàn)出“慢-快-慢”的生長(zhǎng)規(guī)律,但張雜谷的干物質(zhì)積累量比普通谷子有明顯優(yōu)勢(shì) (盧海博,2014;邱風(fēng)倉,2013)。有研究表明,用張雜谷谷草完全代替羊草作為飼草對(duì)奶牛采食量、乳脂率和乳蛋白率等乳成分指標(biāo)幾乎無影響,而且日產(chǎn)奶量有增加趨勢(shì),其間未見奶牛有不良反應(yīng) (孫茂紅,2015)。
本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),早期收割并經(jīng)過發(fā)酵處理的張雜谷WSC及蘇氨酸、絲氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸和亮氨酸含量較高。早期收割并經(jīng)過發(fā)酵處理的張雜谷總能含量為16.71 MJ/kg,粗蛋白質(zhì)含量為8.93%,NDF含量為52.77%,ADF含量為28.59%,粗灰分含量?jī)H為6.93%。從營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)分析,品質(zhì)優(yōu)于一般的羊草及秸稈類飼草,與優(yōu)質(zhì)燕麥草營(yíng)養(yǎng)組分相似,以營(yíng)養(yǎng)組分為評(píng)定指標(biāo),可作為奶牛日糧的一種優(yōu)質(zhì)禾本科牧草。
瘤胃作為奶牛重要的消化器官,可以被看作是一個(gè)厭氧的發(fā)酵罐,內(nèi)容物包括原蟲、厭氧真菌及細(xì)菌等,飼料在瘤胃內(nèi)的降解能力受到這些內(nèi)容物的影響。雖然針對(duì)瘤胃內(nèi)進(jìn)行的消化和代謝研究不能代表全部消化道的真實(shí)結(jié)果(Alhadhrami,1992),但由于瘤胃獨(dú)有的微生物降解、發(fā)酵產(chǎn)酸和產(chǎn)氣等生理過程使得其一直作為研究奶牛營(yíng)養(yǎng)的重點(diǎn)。因此,飼料在奶牛瘤胃內(nèi)的降解率對(duì)于評(píng)定飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值有重要意義。研究發(fā)現(xiàn),不同飼料在瘤胃內(nèi)的降解率都隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加而顯著升高,但不同飼料的降解速度和降解參數(shù)差異很大。谷物類型和粗飼料類型均對(duì)瘤胃發(fā)酵有顯著影響,但二者之間無交互作用 (曹善勇,2015)。 另有研究發(fā)現(xiàn) (李洪濤,2016),小麥和玉米 DM、OM、NDF和 ADF的降解特性不同,谷物類型顯著影響NDF和ADF的降解特性,而DM和OM的降解特性受谷物類型和淀粉性質(zhì)的共同影響。
本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),奶牛瘤胃可消化并降解部分張雜谷的營(yíng)養(yǎng)成分,早期收割且經(jīng)過發(fā)酵處理的張雜谷營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)(DM、CP和OM)在奶牛瘤胃內(nèi)有效降解率較低,過瘤胃效果較好,為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入后腸道消化提供良好條件。
對(duì)張雜谷進(jìn)行早期收割并發(fā)酵處理,能夠比較明顯地改善其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,在飼喂奶牛時(shí),張雜谷中的營(yíng)養(yǎng)成分能夠較多的被奶牛消化吸收,從而在奶牛業(yè)中發(fā)揮重要作用。