張向東 趙福琴 穆寶正

(1.唐山職業(yè)技術(shù)學院,河北 唐山 063000；2.滄州濟生動物醫(yī)院,河北 滄州 061000)

雞傳染性支氣管炎 （Infectious bronchitis，IB）是由雞傳染性支氣管炎病毒（Infectious bronchitisvirus，IBV）引起的急性、高度接觸性傳染病。IBV主要侵害雞的呼吸道、泌尿生殖道、消化道等。臨床表現(xiàn)為咳嗽、氣管啰音、噴嚏、腎臟病變、產(chǎn)蛋雞群產(chǎn)蛋量及蛋品質(zhì)下降。雛雞可因為感染后的呼吸道和腎臟的病變造成死亡，同時可引起生殖系統(tǒng)受損傷，造成輸卵管永久性退化，導致生產(chǎn)力下降；產(chǎn)蛋雞感染會引起產(chǎn)蛋數(shù)量與品質(zhì)下降，死淘率增加；肉雞感染，尤其混合感染引起氣囊炎使肉雞在加工過程中被淘汰。傳染性支氣管炎于1930年首先發(fā)現(xiàn)于美國，我國在1953年就有呼吸型IB發(fā)生的報道。1982年鄺榮祿等在廣東首次報道腎型IB的發(fā)生。1995年杜元釗在中國膠東地區(qū)從產(chǎn)蛋雞群分離出嗜輸卵管和卵巢型IBV變異株。從那以后，我國又有關(guān)于腺胃型IBV變異株的報道。IBV變異性強，血清型較多，又具有高度傳染性，因此雞群易同時感染不同毒株的IBV，且弱毒疫苗的使用導致IBV發(fā)生基因重組而不斷變異，使其對雞體的靶器官也相應發(fā)生變化。雞發(fā)生腎型傳染性支氣管炎后，腎臟受損嚴重，除腎炎表現(xiàn)外，腎及輸尿管還出現(xiàn)尿酸鹽結(jié)石，導致雞群死亡率升高，給養(yǎng)雞業(yè)造成嚴重危害。本課題組結(jié)合中獸醫(yī)辯證施治理論與腎型傳染性支氣管炎發(fā)病機制、病理變化特點，發(fā)現(xiàn)治療本病的關(guān)鍵是清熱解毒，利尿、排石、通淋，扶正固本、恢復腎氣。課題組在確定了此研究方向的基礎上，結(jié)合查閱資料、市場調(diào)研等，最終研發(fā)出了一種治療雞腎型傳染性支氣管炎的中藥復方制劑。經(jīng)試驗，取得了理想的治療效果，且使用方便，劑型穩(wěn)定，質(zhì)量可控，無毒副作用。現(xiàn)已經(jīng)申報了發(fā)明專利?，F(xiàn)將試驗情況報告如下。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗動物

供試雞為1日齡無腎傳支抗體健康海蘭褐雛雞，購自寧夏某種雞廠。試驗前常規(guī)飼喂全價配合飼料，飼料中不含任何抗菌藥物，自由采食及飲水，同時注意觀察，及時剔除弱雛。飼養(yǎng)至21日齡備用（期間不接種任何疫苗）。

1.2 試驗用病毒

腎型IBV由課題組提供病料 （病料采自發(fā)生腎型IB的雞場）、瑞普生物藥業(yè)有限公司分離鑒定而得，并承蒙瑞普生物藥業(yè)有限公司確定了雛雞腎型IBV的感染劑量，即10 ELD50 0.1 mL人工感染21日齡雛雞使其發(fā)病。

1.3 自研中藥配方及制備

1.3.1 自研中藥配方。石葦5%、木通5%、車前子5%、瞿麥5%、赤茯苓3.5%、滑石10%、冬葵子10%、金錢草10%、海金沙9%、紫花地丁10%、金銀花10%、連翹5%、蒲公英10%、甜甘草2.5%。

1.3.2 制備及用法用量。①選取原料藥：石葦50g、木通 50g、車前子 50g、瞿麥 50g、赤茯苓 35g、滑石 100g、冬葵子100g、金錢草100g、海金沙90g、紫花地丁100g、金銀花 100g、連翹 50g、蒲公英 100g、甜甘草25g，原料藥總重量為1000g；②將上述原料藥混勻，加入5000g的水浸泡30min，然后大火煮沸，再文火煎煮30min，過濾，濾出藥液；再將藥渣中重新加入3000g水，先大火煮沸，再文火煎煮45min，過濾，濾出藥液。合并兩次藥液，混勻，備用；③制粒：用濃縮法將以上合并混勻的藥液水分蒸發(fā)掉，直至成浸膏狀，得到濃縮藥物，濃縮藥物重量為200g，然后加入300g無水葡萄糖，混勻，經(jīng)60～65℃烘干，制成可溶性小顆粒，裝袋，密封保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 主要儀器

IDEXX Catalyst One全自動生化分析儀。

1.5 試驗過程

雛雞飼養(yǎng)至20日齡時進行稱重并隨機分組。單只雛雞體重為200～250g，并隨機分為治療組（90只）、陽性對照組（30只）、陰性對照組（30只），共150只，其中治療組又設高、中、低3個不同劑量組，每組30只，21日齡攻毒。攻毒后，在治療組雞群出現(xiàn)典型癥狀時（即25日齡時），按高（每次每只雞2g）、中（每次每只雞1g）、低（每次每只雞0.5g）3個不同劑量分別給予中藥可溶性顆粒（混飲），1次/d，連續(xù)用藥5 d。采血時間為20、25、30、35日齡。陽性對照組在攻毒后不用任何藥物、隔離飼養(yǎng)；陰性對照組則不攻毒、不給藥，隔離飼養(yǎng)。陽性、陰性對照組的采血時間亦為20、25、30、35 日齡。

1.6 血樣采集及血生化檢驗

每只雞采血量為1.5 ml，于4000 r/min離心15 min，分離血清，并用IDEXX Catalyst One全自動生化分析儀進行腎功能檢驗。

2 結(jié)果與分析

2.1 結(jié)果

表1 試驗動物20日齡時腎功能檢驗結(jié)果

表2 試驗動物23日齡時腎功能檢驗結(jié)果

表3 試驗動物30日齡時腎功能檢驗結(jié)果

表4 試驗動物35日齡時腎功能檢驗結(jié)果

表5 試驗動物40日齡時腎功能檢驗結(jié)果

依據(jù)試驗結(jié)果，最終確定該中藥方劑用法用量為：雞群按每次每公斤體重4～6g可溶性顆粒加2倍量水混飲，每天1次，連用7d。

2.2 分析

該中藥方劑中，金銀花、甘寒，具有清熱解毒之效；連翹、苦寒，清熱解毒，消腫散結(jié)，二者相須，作為君藥。紫花地丁、苦寒，清熱解毒，利濕消腫；蒲公英、甘寒，清熱解毒，消腫散結(jié)，利水通淋，共為臣藥、輔君藥，具有抗病毒，退熱等功效，起到治療病毒性腎型傳染性支氣管炎的對因治療，名曰治本。石葦，清熱通淋，涼血止血；木通，清熱利尿，清心降火；車前子，利水通淋，清肝明目；瞿麥，清熱、利水、通淋；赤茯苓，清熱滲濕，健脾和中；滑石，利水通淋；金錢草，除濕退黃，利水通淋，清熱消腫；海金砂，清熱解毒，利水通淋；冬葵子，清熱利濕，通淋，共為佐藥，起到利水通淋、排石的功效，解決腎傳支病雞因為輸尿管結(jié)石阻塞造成批量死亡的表癥，甘草調(diào)和諸藥起到藥寒而不傷脾胃，利水而不太過的功效。全方配合起到標本同治，真正起到緩能治其本，急能治其標的作用。