馬繼榮，周景藝，顧 怡，沈文艷，沈 薇

（上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 200127）

C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）是一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，在機(jī)體受到感染或組織損傷時(shí)可急劇升高，是一種非特異性炎癥標(biāo)志物。對CRP的研究已有近80年歷史，各臨床實(shí)驗(yàn)室開展普遍，免疫比濁法為最常見的檢測方法。按標(biāo)本選擇，有血清和全血2種模式，前者多在生化或免疫特定蛋白分析儀上開展，后者多用于門、急診檢測，快速簡便。全血模式檢測CRP，各廠商按照血細(xì)胞比容（hematocrit，HCT）40%左右進(jìn)行換算，這種換算方法對正常人群（HCT為35%～45%）沒有太大影響，對異常標(biāo)本應(yīng)予以糾正[1-2]，但實(shí)際工作中往往難以做到。本研究擬評價(jià)采用HCT值實(shí)時(shí)修正全血CRP測定結(jié)果的價(jià)值。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2017年8月患者血常規(guī)標(biāo)本222例，其中5例標(biāo)本低于檢測限，統(tǒng)計(jì)時(shí)剔除，最后入組標(biāo)本217例，其中37例HCT＜35%、128例HCT為35%～45%，52例HCT＞45%。部分血常規(guī)標(biāo)本采取人工棄去部分血漿方式，以提高HCT結(jié)果準(zhǔn)確性。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集與測定 采集患者4 mL靜脈血，乙二胺四乙酸二鉀抗凝，所有標(biāo)本采集后2 h內(nèi)完成全血模式下血常規(guī)和CRP檢測。標(biāo)本經(jīng)800×g離心15 min后，分離血漿，用BN Ⅱ特定蛋白分析儀（德國西門子公司）檢測CRP。

1.2.2 儀器及試劑 XN 2800血常規(guī)CRP流水線（日本希森美康公司），流水線包含2臺(tái)XN-B4全自動(dòng)血液分析儀（日本希森美康公司）和1臺(tái)PA 990特定蛋白分析儀（深圳普門公司）。血常規(guī)試劑及CRP試劑（散射比濁法）均為原裝配套試劑。BN Ⅱ特定蛋白分析儀及配套CRP試劑盒（散射比濁法）。所有儀器在檢測標(biāo)本前均進(jìn)行了校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證。

1.3 根據(jù)HCT值實(shí)時(shí)糾正CRP結(jié)果

在臨床上CRP濃度均是指該標(biāo)本的血清CRP濃度值，為了與臨床上相統(tǒng)一，當(dāng)使用全血標(biāo)本進(jìn)行檢測時(shí)，需要將其直接測得的結(jié)果（濃度值）進(jìn)行換算，才能得到該標(biāo)本的血清CRP濃度值。換算公式為：

式中C全血標(biāo)本為全血標(biāo)本測試時(shí)，經(jīng)過HCT校正后的CRP濃度值；C直接測得為全血標(biāo)本直接測試，在標(biāo)準(zhǔn)曲線中回歸計(jì)算得到的CRP濃度值；HCT真實(shí)為全血標(biāo)本真實(shí)的HCT值。

當(dāng)HCT固定為40%時(shí)，為了實(shí)時(shí)糾正CRP的結(jié)果，減少HCT對測試結(jié)果的影響，應(yīng)對其結(jié)果進(jìn)行實(shí)時(shí)修正，其修正公式為：

式中C修正后為全血標(biāo)本測試時(shí)，經(jīng)過真實(shí)的HCT校正后的CRP濃度值；C測得為全血標(biāo)本測試，使用默認(rèn)40%的HCT值得到的CRP濃度值；HCT真實(shí)為全血標(biāo)本真實(shí)的HCT值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。以BN Ⅱ特定蛋白分析儀的測定結(jié)果為靶值進(jìn)行比較分析。

2 結(jié)果

HCT＜35%，HCT為35%～45%和HCT＞45%的標(biāo)本的不同分組間全血模式CRP結(jié)果用HCT固定40%和HCT實(shí)時(shí)糾正后，與血漿模式BNⅡ特定蛋白分析儀CRP結(jié)果的相關(guān)性見圖1～圖3。

HCT＜35%，HCT為35%～45%和HCT＞45%的標(biāo)本的全血模式CRP結(jié)果用HCT固定40%與實(shí)時(shí)糾正之間結(jié)果的偏差比較見表1、表2。

圖1 HCT＜35%的標(biāo)本用HCT糾正CRP前后與BN Ⅱ特定蛋白分析儀結(jié)果的比對

圖2 HCT為35%～45%的標(biāo)本用HCT糾正CRP前后與BN Ⅱ特定蛋白分析儀結(jié)果的比對

圖3 HCT＞45%的標(biāo)本用HCT糾正CRP前后與BN Ⅱ特定蛋白分析儀結(jié)果的比對

表1 HCT值最低和最高的標(biāo)本CRP檢測結(jié)果的比較

表2 固定HCT為40%與HCT實(shí)時(shí)糾正之間CRP結(jié)果的比較

3 討論

CRP主要用于評估炎癥，在細(xì)菌性疾病以及心血管疾病診斷中有較為廣泛的應(yīng)用。在門診和急診，CRP通常和血常規(guī)聯(lián)合檢測，用于快速鑒別診斷是細(xì)菌性炎癥還是病毒性炎癥，為治療提供依據(jù)。為了快速檢測，門診和急診CRP檢測一般使用乙二胺四乙酸抗凝全血，按HCT 40%左右進(jìn)行換算，使之與特定蛋白儀上血清CRP結(jié)果間有可比性，但這種換算方法對HCT為35%～45%的標(biāo)本基本可行，對HCT異常的標(biāo)本應(yīng)予以糾正[1-2]。眾所周知，門診和急診是檢驗(yàn)科中對時(shí)間要求最嚴(yán)格的科室，為了方便，糾正CRP的工作難以開展。本研究使用的XN 2800血常規(guī)CRP流水線可利用HCT值對全血CRP測定結(jié)果進(jìn)行實(shí)時(shí)糾正，理論上更為準(zhǔn)確。

通過對217份標(biāo)本進(jìn)行分析，本研究發(fā)現(xiàn)HCT＜35%和＞45%的標(biāo)本，通過利用HCT值實(shí)時(shí)糾正后的CRP結(jié)果與BN Ⅱ特定蛋白分析儀的相關(guān)性明顯提升；而HCT為35%～45%的標(biāo)本，修正與否無明顯差異。對于HCT＜35%的37份標(biāo)本，HCT未糾正的CRP結(jié)果與BN Ⅱ特定蛋白分析儀的相關(guān)方程為Y=1.191 9X+1.660 7（r2=0.9743）；HCT糾正后的相關(guān)方程為Y=1.047 9X+0.224 9（r2=0.982 6）。對于HCT為35%～45%的128份標(biāo)本，HCT未糾正的CRP結(jié)果與BN Ⅱ特定蛋白分析儀的相關(guān)方程為Y=1.152 7X-1.880 8（r2=0.985 7）；HCT糾正后的相關(guān)方程為Y=1.132 7X-1.288 2（r2=0.983）。對于HCT＞45%的52份標(biāo)本，HCT未糾正的CRP結(jié)果與BN Ⅱ特定蛋白分析儀相關(guān)方程為Y=0.580 7X+5.740 4（r2=0.949 8）；HCT糾正后的相關(guān)方程為Y=0.900 0X+2.839 1（r2=0.984 2）。同時(shí)對3個(gè)組的CRP結(jié)果與BN Ⅱ特定蛋白分析儀CRP結(jié)果之間的偏差進(jìn)行分析，結(jié)果顯示HCT＜35%的標(biāo)本，糾正后平均偏差從11.77 mg/L減少為2.75 mg/ L；HCT＞45%的標(biāo)本，糾正后的平均偏差從-11.84 mg/L減少到-1.35 mg/L，糾正前后數(shù)據(jù)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。顯而易見，利用HCT值糾正CRP能提高結(jié)果準(zhǔn)確性。

當(dāng)然，僅從相關(guān)性比較，雖然糾正后的相關(guān)性有所提高，但分析糾正前固定HCT為40%的CRP結(jié)果與BN Ⅱ特定蛋白分析儀之間的相關(guān)性，HCT＜35%和＞45%的標(biāo)本r2值分別達(dá)到了0.974 3和0.949 8，也能基本滿足臨床需求，因此我們重點(diǎn)關(guān)注了HCT最低和最高的標(biāo)本，對于HCT降低的標(biāo)本，偏差大小與HCT值降低呈負(fù)相關(guān)，對HCT升高的標(biāo)本，偏差大小與HCT值降低呈正相關(guān)?？梢娺@些極端標(biāo)本使用未糾正結(jié)果偏差很大，甚至影響到臨床治療，提醒無論有沒有全自動(dòng)儀器，檢驗(yàn)人員一定要有充分認(rèn)識(shí)，予以糾正。

綜上所述，本研究通過流水線將血常規(guī)與CRP檢測整合，證實(shí)了利用HCT值糾正CRP結(jié)果與BN Ⅱ特定蛋白分析儀的CRP結(jié)果有很好的符合性，尤其對HCT特別低或特別高的標(biāo)本有比較高的應(yīng)用價(jià)值。