梁海英,王雅麗，劉鐵梅,張麗榮

(1.吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院 輸血科；2.吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院 病理科,吉林 長春130033)

ABO血型鑒定是保證輸血安全的基礎(chǔ)，而對其亞型正確定型具有非常重要的臨床意義[1]。凡紅細胞上顯示較弱的B特異性抗原的血型稱為B亞型，B亞型在分類上與A亞型基本上平行。已經(jīng)報道有B3、BX、Bm及Bel等亞型，跟Aend及Ay相當?shù)腂亞型還沒見報道[2]。本科室應(yīng)一位無償獻血者要求對其血樣進行血型鑒定，發(fā)現(xiàn)該樣本出現(xiàn)正反定型不符現(xiàn)象，用不同試劑檢測出現(xiàn)不同的結(jié)果，并對其進行家系調(diào)查，現(xiàn)報告分析如下。

1 材料與方法

1.1樣本受檢者在加拿大獻血時，正定為O型，反定為B型，因正反定型不符而被拒絕，回國來本科室進行血型鑒定。因其母親為本院職工，母親同時也采集樣本。后來外婆在外院住院，外院檢測正定A型反定AB型，也采標本來本科室檢測，其余標本后來主動采集送檢。

1.2試劑抗-A、抗-B長春博德公司；抗-A、抗-B、抗-AB、抗-H上海市血液生物醫(yī)藥有限責任公司產(chǎn)品；人ABO血型反定型用紅細胞,為長春博迅公司產(chǎn)品。

1.3儀器Baso 2002-2離心機，恒溫水浴箱。

1.4正反定型測試方法正定型測試方法和反定型試驗方法正好相反，其中正定型測試方法為用2滴抗血清加上1滴待檢者的2%紅細胞懸液，輕搖離心，觀察有無凝集反應(yīng)，用“O”表示無凝集，用“+”表示凝集，分別在表格內(nèi)標記清楚；而反定型測試方法為用2滴待檢者的血清加1滴標準紅細胞懸液，輕搖離心(離心機1000 rpm)60 s，觀察有無凝集反應(yīng)，然后標記在相應(yīng)表格內(nèi)。

1.5吸收放散測試方法吸收用于驗證真假凝集反應(yīng)，方法有冷吸收和熱吸收，我們采用冷吸收方法。用反復(fù)鹽水洗滌的已知抗原的標準B型1 ml壓積紅細胞，加1 ml被檢血清即抗-B血清，混勻后置4℃冰箱內(nèi)吸收1 h，1 000 rpm離心,吸取上清液倍比稀釋，加標準B型紅細胞1滴，行吸收后血清效價分析，真凝集經(jīng)吸收后凝集減弱或呈陰性；假凝集經(jīng)吸收后凝集不變。

我們采用熱放散試驗方法，即將吸收后懷疑有抗體附著的紅細胞用生理鹽水洗洗5次，棄上清，加在壓積紅細胞中加等量的生理鹽水，60℃水浴中振蕩放散10 min，3 000 rpm高速離心2 min，取上清2排管，倍比稀釋，再分別加入標準的B型紅細胞懸液1滴和O型紅細胞懸液1滴，進行效價分析，如抗體較弱可預(yù)先用酶處理紅細胞后再做試驗。注意控制溫度，如果溫度降低，抗原抗體會重新結(jié)合。

1.6測定唾液血型物質(zhì)方法人的唾液中分泌有ABH抗原，如果6℃冰箱保存1周其抗原活性不變。取待測者唾液離心取上清，煮沸再離心取清液。將抗-A、抗-B、抗-H倍比稀釋后與相應(yīng)紅細胞反應(yīng)，唾液用標化血清(效價128)等體積混合，再用相應(yīng)的標準紅細胞檢測相應(yīng)的抗體,觀察有無凝集反應(yīng)進行分析判斷。

2 結(jié)果

2.1血型鑒定結(jié)果見表1。

表1 血型鑒定結(jié)果

2.2吸收放散檢測結(jié)果

吸收液與標準B型紅細胞反應(yīng)，待檢標本吸收液與標準B細胞的凝集強度比標準血清與標準B細胞吸收液的凝集強度低3個梯度；待檢標本放散液與標準B型、O型紅細胞反應(yīng)，待檢標本放散液與標準B細胞凝集，與標準O細胞不凝集，說明待檢標本含有B抗原。

2.3唾液血型物質(zhì)檢測結(jié)果

將處理過唾液和標化血清(效價為128)等體積混合,室溫放置10 min后，與標準B型紅細胞1 000 rpm離心60 s沒有凝集，從而判斷待檢唾液中含有B、H血型物質(zhì)。

2.4家系調(diào)查結(jié)果如下圖

先證者在加拿大留學期間獻血，被告知血型有問題沒能獻血，回國后想得到確切結(jié)果來本科室檢測，因檢測出其血型為B亞型中的Bm型，同時對其母親檢測得到同樣的結(jié)果。后來外婆住院血型同樣正反定型不符，正定A型，反定AB型，又采樣到本科室檢測得出為ABm型。因其三代均有這樣的血型，遂進行了家系調(diào)查，因外祖父已經(jīng)去世，沒法檢測，其余有親緣關(guān)系的均進行血型鑒定，得出結(jié)果如圖1。

3 討論

根據(jù)該標本的相應(yīng)血型血清學實驗結(jié)果，得出其血型為Bm型，這是B亞型的一種[3-5]。鑒于現(xiàn)在有些醫(yī)院，特別是二級醫(yī)院輸血科，雖然國家和省里的檢查總是要求受血者要進行ABO的正反定型檢測，仍然有部分醫(yī)院只做正定型，或者有的醫(yī)院即使做了正反定型，當正反定型不相符時只相信正定型，就按正定型來給患者輸血，這是非常危險的[6]。

當出現(xiàn)正反定型不符時應(yīng)分析原因，通過科學的實驗鑒定出準確的血型。就如本例如果做為受血者，按正定型給予少量的O型紅細胞可能不會有什么反應(yīng)，因為供者血血漿中的抗-B抗體可能被受血者血漿中的血型物質(zhì)中和；但是如果大量輸O型血，供者血中的抗-B抗體可能與受血者紅細胞發(fā)生溶血反應(yīng)。

對于一個擁有如此特殊血型的個體來說，有必要進行家系調(diào)查，讓直系家庭成員對自己的特殊血型有一定的了解，當發(fā)生需要輸血的情況時，為血型鑒定提供參考意見。