疫苗研發(fā)

通常，一種疫苗從研發(fā)到上市，至少要經過8年甚至20余年漫長的研發(fā)歷程。

臨床前研究 毒株、細胞篩選是保證疫苗安全、有效、持續(xù)供應的基礎保障。以病毒疫苗為例，實驗室階段需進行毒株的篩選、必要的毒株減毒、毒株對培育細胞基質適應及傳代過程中的穩(wěn)定性研究，并探索工藝質量穩(wěn)定性，建立動物模型等。根據每個疫苗情況選擇小鼠、豚鼠、兔或猴等進行動物試驗。在初步提示工藝可控、質量穩(wěn)定及安全有效的前提下，可以向國家藥品監(jiān)督管理部門申請進行臨床試驗。臨床前研究一般需要5～10年。

申報臨床 企業(yè)申請預防用疫苗臨床試驗，需向國家藥品監(jiān)督管理部門報送藥學、藥理毒理、臨床等不同專業(yè)的研究資料。根據不同疫苗的情況，有時研究資料達200余本，其中包括疫苗毒株/細胞種子庫建立、生產工藝研究、質量研究、穩(wěn)定性研究、動物安全性評價和有效性評價以及臨床試驗方案等。生物制品藥學、藥理毒理學、臨床等相關領域專家根據國家《藥品注冊管理辦法》及疫苗相關的技術評價要求對全套研究資料進行技術審評，符合要求的獲發(fā)疫苗臨床試驗批件。質量控制及安全有效性達不到臨床試驗要求的，企業(yè)需完善并補充各種試驗或申報資料。有的申請會經過很多次的溝通補充完善，對涉及重大公共衛(wèi)生的申請還要召開專家咨詢會，直至申報資料符合要求，才會獲發(fā)疫苗臨床試驗批件。

臨床試驗機構申請 企業(yè)獲發(fā)疫苗臨床批件后，要根據國家《一次性疫苗臨床試驗機構資格認定管理規(guī)定》選擇符合要求的臨床研究現場和臨床研究者，并向監(jiān)管部門提出疫苗一次性臨床試驗機構認定申請。國家藥品監(jiān)督管理部門組織認證查驗專家組對疫苗臨床試驗機構進行現場檢查，包括人員資質、硬件與軟件等。符合要求的，國家藥品監(jiān)督管理部門核發(fā)一次性臨床試驗機構批件，方可進行臨床試驗。臨床試驗所用樣品必須在符合國家《藥品生產質量管理規(guī)范》（GMP）要求的廠房生產，企業(yè)自檢結果和中檢院檢定結果均需合格。

注冊臨床試驗 一般分為I/Ⅱ/Ⅲ期三個研究階段。國家對疫苗人體臨床試驗有嚴格的管理規(guī)定，包括《藥物臨床試驗質量管理規(guī)范》《疫苗臨床試驗質量管理指導原則》《倫理委員會藥物臨床試驗倫理審查工作指導原則》《藥品不良反應報告和監(jiān)測管理辦法》《疫苗臨床試驗技術指導原則》《臨床試驗數據管理工作技術指南》等。各期臨床試驗從人員到現場以及監(jiān)查都有嚴格的標準操作程序（SOP）要求。

I期臨床試驗 初步考察人體安全性，一般受試者為幾十至百例。鑒于首次進行人體I期臨床的重要性，國家專門發(fā)布《藥物Ⅰ期臨床試驗管理指導原則》。若疫苗I期臨床結果顯示安全性良好，方可進行Ⅱ期臨床試驗。

Ⅱ期臨床試驗 主要進行疫苗的劑量探索研究，以及初步的有效性評價并考察進一步擴大人群后的安全性。一般受試者為幾百到上千例。Ⅱ期臨床試驗達到預期目的后，方可進行Ⅲ期臨床試驗。

Ⅲ期臨床試驗 采用隨機、盲法、安慰劑對照（或對照苗）設計，全面評價疫苗的有效性和安全性，一般受試者為數千到幾萬例不等。該期是疫苗上市獲得注冊批準的基礎。若關鍵性Ⅲ期臨床試驗獲得預期臨床保護效果，安全性良好，企業(yè)方可將臨床數據資料遞交國家藥品監(jiān)督管理部門申報生產。

全部臨床試驗一般耗時至少3～8年，有的甚至長達10年以上。每期臨床試驗都設有嚴密的安全性監(jiān)測、嚴格的終止標準，每個疫苗都可能因為達不到預設目的或預期要求在臨床期間被叫停，甚至被終止。

疫苗上市

完成疫苗臨床試驗后，企業(yè)需按照《藥品注冊管理辦法》規(guī)定提交申報生產的研究資料。經生物制品藥學、藥理毒理學、臨床及生物統計等相關領域專家審評，認為疫苗安全、有效、質量可控，并經臨床數據核查后，國家藥品監(jiān)督管理部門即發(fā)給企業(yè)生產現場檢查通知。企業(yè)要在180天內準備好符合《藥品生產質量管理規(guī)范》要求的生產車間，在檢查組檢查期間進行三批生產車間系統驗證，三批疫苗一致性系統驗證，驗證均為生產全過程的系統性動態(tài)驗證，包括從投料開始直至形成最終產品的各個生產環(huán)節(jié)，并實施全過程控制，對關鍵中間品進行抽樣、檢定。檢查組將對三批檢查期間的產品現場封樣，送中檢院檢定。待中檢院檢定合格后，國家藥品監(jiān)督管理部門將現場動態(tài)檢查結果、中檢院檢定結果，與注冊審評意見進行三合一綜合評價，對認為安全、有效、工藝真實、質量可控的疫苗，將給企業(yè)核發(fā)生產批件，附帶質量標準、生產工藝和使用的說明書/標簽。

企業(yè)拿到生產批件后，方可在“GMP車間”生產疫苗。疫苗上市后還要進行上市后擴大人群的IV期臨床研究和觀察，對疫苗在更大規(guī)模人群的安全性和有效性進行持久的評價。

疫苗生產

疫苗企業(yè)的生產流程通常包括培養(yǎng)擴增、純化、配制、灌裝等，除進行自檢外，還需中檢院進行批簽發(fā)。

同時，隨著法規(guī)升級、上市后監(jiān)測的風險反饋提示、新技術的發(fā)展等，在確保每年幾億劑次疫苗供應的情況下，疫苗企業(yè)也一直在進行工藝的優(yōu)化改進工作，如轉瓶培養(yǎng)向細胞工廠、生物反應器培養(yǎng)轉變，以減少污染提高均質性；去除不必要的添加成分，以減少外來過敏原等。

疫苗生產企業(yè)在生產過程中要遵循的2010年修訂版《藥品生產質量管理規(guī)范》，該版規(guī)范可謂歐盟《藥品生產質量管理規(guī)范》“漢化版”，與國際接軌。

2010版《藥品生產質量管理規(guī)范》要求生產企業(yè)做到以下幾個必須。

疫苗生產企業(yè)必須在合格供應商處采購原材料。

必須使用驗證合格的廠房設施設備。

必須保證工作人員持續(xù)培訓考核。

必須遵循藥監(jiān)部門批準的工藝生產。

必須做好各環(huán)節(jié)中間品、原液、半成品、成品的檢定放行，并按要求存儲。

所有這些環(huán)節(jié)，還必須做到事無巨細真實完整的記錄，這樣才能保證生產出的每一支疫苗都是合格的產品。

如疫苗生產的配制、過濾、轉運、灌裝等過程生產環(huán)境潔凈級別須在B級背景下的A級（ISO 4 .8）操作，A級的潔凈級別是什么意思呢？不允許檢出細菌！每立方米空氣中粒徑≥ 0.5 微米的塵埃粒子不能超過20個！這是一個相當嚴苛的標準，而且有環(huán)境監(jiān)測在線監(jiān)測報警設施，確保隨時監(jiān)控。

疫苗質量標準控制指標

疫苗的質量標準是廣義的質量標準，包括全過程控制，即在對生產工藝參數進行嚴格規(guī)定的基礎上，對每個生產環(huán)節(jié)均需設置檢測點和控制要求，且終產品含有安全、有效性等控制指標。以2015年版《中國藥典》中收載的“A 群C 群腦膜炎球菌多糖結合疫苗”為例，生產過程包括不低于53項的中間品檢測，在此基礎上成品檢定項下還包括以下13項檢測指標：鑒別試驗、外觀、裝量差異、水分、pH值、滲透壓摩爾濃度、多糖含量、游離多糖含量、效力試驗、無菌檢查、熱原檢查、細菌內毒素檢查、異常毒性檢查。

其中，無菌檢查、熱原檢查、細菌內毒素、異常毒性檢查是與安全性緊密相關的指標，多糖含量、游離多糖含量、效力試驗是與疫苗有效性緊密相關的指標，其他外觀性狀等是通用性的質控指標。