盛清凱 趙紅波 張伶燕 金娉婷 王星凌 李祥明

摘要：

為促進(jìn)全株青綠玉米的應(yīng)用，本試驗(yàn)研究貯藏時(shí)間（1、8、16、24 d）和貯藏溫度（低溫0～4℃、中溫16～20℃和高溫30～34℃）對(duì)全株青綠玉米低溫制粒顆粒料自由基、自由基清除劑、淀粉酶活性、pH值、乳酸菌、霉菌及黃曲霉毒素等指標(biāo)的影響。結(jié)果表明貯藏時(shí)間和貯藏溫度對(duì)過(guò)氧化氫、乳酸菌、霉菌和黃曲霉毒素的含量及pH值影響顯著（P<0.05）。隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，低溫下1～24 d各指標(biāo)無(wú)顯著變化（P>0.05）；高溫下過(guò)氧化氫、丙二醛含量及過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化物酶活性、pH值表現(xiàn)為先升高后降低，第8 d時(shí)達(dá)到高峰；高溫下霉菌和黃曲霉毒素含量逐漸增加，乳酸菌含量逐漸降低；大腸桿菌各處理均未檢出。建議高溫下貯藏時(shí)間不超過(guò)8 d，低溫下可以適當(dāng)延長(zhǎng)貯藏時(shí)間。

關(guān)鍵詞：全株青綠玉米；低溫制粒顆粒料；貯藏；溫度；時(shí)間；霉變

中圖分類號(hào)：S816.5+3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A 文章編號(hào)：1001-4942（2018）08-0157-04

Effects of Storage Time and Temperature on

Low-Temperature Pelletizing of Whole Plant Green Corn

Sheng Qingkai1， Zhao Hongbo1， Zhang Lingyan1， Jin Pingting1， Wang Xingling1， Li Xiangming2

（1. Institute of Animal Science and Veterinary Medicine， Shandong Academy of Agricultural Sciences/

Shandong Provincial Key Laboratory of Animal Disease Control and Breeding， Jinan 250100， China；

2. Institute of Shandong Provincial Feed Quality Inspection， Jinan 250022， China）

Abstract In order to promote the application of whole plant green corn， the present study investigated the effects of storage times （1， 8， 16， 24 d） and temperatures （low temperature 0℃ to 4℃， middle temperature 16℃ to 20℃ and high temperature 30℃ to 34℃） on the whole plant green corn granulated at low temperature， its indicators included free radicals， free radical scavengers， amylase， pH， lactic acid bacteria， mould， mycotoxin and others. The results showed that storage times and temperatures had a significant effect on the content of hydrogen peroxide， lactic acid bacteria， mould and mycotoxin and pH value（P<0.05）. With the extension of the storage time， all the indexes had no significant change from 1 to 24 d at low temperature （P>0.05）. At high temperature， the content of hydrogen peroxide， malondialdehyde， catalase， peroxidase and pH value increased first and then decreased and reached the peak at the 8th day. The content of mold and the mycotoxin gradually increased and lactic acid bacteria gradually decreased at high temperature. The experiment results suggested that the storage time should not exceed 8 days at high temperature and could be prolonged suitably at low temperature.

Keywords Whole plant green corn pelleted in low temperature； Storage； Temperature； Time； Deterioration

發(fā)酵的全株青綠玉米具有改善飼料適口性、促進(jìn)豬生長(zhǎng)、降低豬糞臭味、改善肉品質(zhì)的良好效果[1，2]，但是發(fā)酵的全株青綠玉米為濕料，水分含量高達(dá)60%左右。由于目前大規(guī)模豬場(chǎng)的飼料自動(dòng)運(yùn)輸系統(tǒng)為干顆粒料運(yùn)輸系統(tǒng)，不適用于運(yùn)輸發(fā)酵的全株青綠玉米，影響其大規(guī)模飼用。發(fā)酵的全株青綠玉米高溫烘干制粒，理論上可以應(yīng)用于大規(guī)模豬場(chǎng)，但高溫制粒耗能，且破壞益生菌、生物酶、維生素等熱敏物質(zhì)[3]；低溫制粒，則在保留其中益生菌、酶、維生素等物質(zhì)活性的同時(shí)便于大規(guī)模豬場(chǎng)的應(yīng)用，但低溫制粒的玉米水分含量仍然高于15%，容易變質(zhì)，如何貯藏成為難題。飼料變質(zhì)是自由基紊亂[4]、菌群改變[5]的結(jié)果，霉變過(guò)程受貯藏溫度、時(shí)間等外界條件的影響[6]。為此，本試驗(yàn)研究貯藏時(shí)間及溫度對(duì)發(fā)酵全株青綠玉米的自由基、酶、霉菌及黃曲霉毒素等指標(biāo)的影響，以期為全株青綠玉米低溫制粒顆粒料合理貯藏提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

參考盛清凱等[7]的方法進(jìn)行全株青綠玉米低溫制粒：將乳熟期收割的全株青綠玉米粉碎至0.2～0.4 cm，并噸包厭氧發(fā)酵120 d，與玉米、豆粕等原料組成的全價(jià)配合飼料按重量比1∶4混勻，添加微量添加劑后于30℃環(huán)境下制粒。將顆粒料裝入呼吸膜塑料袋中，根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)分別貯藏。全株玉米低溫制粒顆粒料的初始水分含量為27.53%，pH值為3.9。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用兩因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，兩因素分別為貯藏溫度與貯藏時(shí)間。貯藏溫度設(shè)低溫（0～4℃）、中溫（16～20℃）和高溫（30～34℃），貯藏時(shí)間設(shè)1、8、16、24 d。將樣品根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)分為三組，分別存放于低溫、中溫和高溫環(huán)境中，每組10袋，每袋2 kg。試驗(yàn)開始時(shí)上午8∶00起至次日上午8∶00為第1 d，其余類推。每次上午8∶00取樣100 g，然后立即將呼吸膜塑料袋封閉并擠壓排出空氣；將樣品按重量∶體積=1∶10快速溶于蒸餾水中， 3 000×g離心5 min，取上清液進(jìn)行分析。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)

過(guò)氧化氫、丙二醛、過(guò)氧化氫酶、淀粉酶等試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所，黃曲霉毒素酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒購(gòu)自上海優(yōu)甘生物公司，呼吸膜塑料袋購(gòu)自沃進(jìn)公司，乳酸菌、大腸桿菌、霉菌采用平板計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用SAS （V9.2） 軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，采用TWO-WAY ANNOVA進(jìn)行方差分析，采用Student-Newmnan-Keuls法進(jìn)行多重比較，P<0.05 為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。數(shù)據(jù)以平均值表示。

2 結(jié)果及分析

2.1 貯藏時(shí)間及溫度對(duì)全株玉米顆粒料自由基的影響

由表1看出，除低溫外，貯藏時(shí)間對(duì)過(guò)氧化氫含量有極顯著影響（P<0.01），對(duì)丙二醛含量無(wú)顯著影響（P>0.05）；溫度對(duì)過(guò)氧化氫和丙二醛都有極顯著影響（P<0.01）。高溫時(shí)，過(guò)氧化氫和丙二醛含量都極顯著高于低溫和中溫（P<0.01），表明高溫不利于貯藏。隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，過(guò)氧化氫和丙二醛含量（除中溫外）均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，第8 d時(shí)過(guò)氧化氫含量和丙二醛含量達(dá)到最大值。

2.2 貯藏時(shí)間及溫度對(duì)全株玉米顆粒料自由基清除劑的影響

由表2看出，貯藏時(shí)間對(duì)過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化物酶活性均無(wú)顯著影響（P>0.05），而溫度對(duì)兩者均有顯著影響（P<0.05）。隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，低溫與中溫下過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化物酶活性呈降低趨勢(shì)，高溫下先升高后降低，第8 d達(dá)到最大值。

2.3 貯藏時(shí)間及溫度對(duì)全株玉米顆粒料pH值及淀粉酶活性的影響

由表3看出，除低溫外，貯藏時(shí)間對(duì)pH值有極顯著影響（P<0.01），而對(duì)淀粉酶活性無(wú)顯著影響（P>0.05），溫度對(duì)pH值有極顯著影響（P<0.01），對(duì)淀粉酶有顯著影響（P<0.05）。隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，低溫下pH值基本無(wú)變化；中溫下pH值先升高后降低，第16 d達(dá)到最高值；高溫下pH值先升高后降低，第8 d達(dá)到最大值。低、中溫條件下，淀粉酶活性隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)先降低后有所回升；高溫條件下則持續(xù)降低。

2.4 貯藏時(shí)間及溫度對(duì)全株玉米顆粒料霉菌和黃曲霉毒素的影響

由表4看出，除低溫外，貯藏時(shí)間對(duì)霉菌和黃曲霉毒素含量影響顯著（P<0.05），溫度對(duì)霉菌和黃曲霉毒素含量影響極顯著（P<0.01）。隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，低溫下霉菌和黃曲霉毒素含量無(wú)顯著差異（P>0.05）；中溫下逐漸升高，第16 d時(shí)兩者含量顯著高于第1 d（P<0.05）；高溫下霉菌和黃曲霉毒素含量也逐漸升高，第8 d時(shí)顯著高于第1 d（P<0.05），表明高溫下全株玉米顆粒料貯藏期不應(yīng)高于8 d。

2.5 貯藏時(shí)間及溫度對(duì)全株玉米顆料粒乳酸菌和大腸桿菌的影響

由表5看出，貯藏時(shí)間和溫度對(duì)乳酸菌含量皆有顯著影響（P<0.05）。隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，低溫下乳酸菌含量逐漸降低，但差異不顯著（P>0.05）；中溫下第16 d乳酸菌含量與第1 d無(wú)顯著差異，但顯著低于第8 d，顯著高于第24 d（P<0.05）；高溫下乳酸菌含量逐漸降低，第8 d乳酸菌含量顯著低于第1 d，顯著高于第16、24 d，表明高溫下全株玉米顆粒料貯藏時(shí)間以不高于8 d為好，中溫下不超過(guò)16 d為好，低溫下貯藏時(shí)間可適當(dāng)延長(zhǎng)。試驗(yàn)期內(nèi)大腸桿菌未檢出。

3 討論與結(jié)論

由于低溫制粒的全株玉米顆粒料水分含量仍超過(guò)15%以上，遠(yuǎn)高于高溫制粒的10%，因此低溫制粒后的全株青綠玉米如何貯藏成為制約大規(guī)模豬場(chǎng)廣泛應(yīng)用全株青綠玉米的關(guān)鍵問(wèn)題之一。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)全株青綠玉米顆粒料在呼吸膜塑料袋中低溫下貯藏期較長(zhǎng)，貯藏24 d各指標(biāo)仍較好，而高溫下貯藏期不超過(guò)8 d，這有助于大規(guī)模豬場(chǎng)實(shí)現(xiàn)對(duì)全株青綠玉米顆粒料的合理應(yīng)用。

本試驗(yàn)中隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，高溫下全株青綠玉米顆粒料中過(guò)氧化氫含量先顯著升高后逐漸降低，而過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化物酶活性明顯降低，表明隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，原有的自由基產(chǎn)生與清除平衡被打破，自由基過(guò)量產(chǎn)生，過(guò)量的自由基攻擊細(xì)胞膜、線粒體等，導(dǎo)致物料變質(zhì)。該推論與Yano[8]、Halliwell[9]等自由基紊亂導(dǎo)致食物變質(zhì)的結(jié)論相似。本試驗(yàn)中過(guò)氧化氫先升高后降低的原因可能與低溫制粒過(guò)程中或開袋取樣過(guò)程中厭氧發(fā)酵的全株玉米與外界氧氣接觸[10]或與環(huán)境溫度升高[11]有關(guān)。全株玉米與氧氣接觸后，乳酸菌等厭氧菌受到抑制，霉菌等好氧菌繁殖，好氧微生物活性增加，導(dǎo)致過(guò)氧化氫等自由基過(guò)量產(chǎn)生[12]。另一方面，貯藏環(huán)境溫度升高，微生物活性提高，自由基產(chǎn)生量增加，環(huán)境溫度可能通過(guò)微生物間接途徑導(dǎo)致食物變質(zhì)[13，14]。試驗(yàn)后期過(guò)氧化氫含量降低的原因可能與塑料袋中的氧氣消耗殆盡、塑料袋內(nèi)環(huán)境重新恢復(fù)到厭氧狀態(tài)有關(guān)。

本試驗(yàn)全株青綠玉米顆粒料低溫較高溫貯藏時(shí)間長(zhǎng)的結(jié)果與食品加工業(yè)的一些研究報(bào)道[15，16]相似。低溫較高溫貯藏時(shí)間長(zhǎng)的原因可能與低溫抑制了微生物活性或降低了自由基活性有關(guān)。Mannaa等[17]報(bào)道高溫有助于霉菌的生長(zhǎng)和霉菌毒素的產(chǎn)生，低溫作用相反。Mondal 等[18]報(bào)道高溫增加了過(guò)氧化氫等自由基的活性，高溫較低溫貯藏時(shí)間短。貯藏溫度及貯藏時(shí)間對(duì)于微生物活性及自由基代謝是否存在交互作用還需進(jìn)一步研究。

本試驗(yàn)沒有檢測(cè)出大腸桿菌，可能與試驗(yàn)前期所用的全株青綠玉米及所用的呼吸膜塑料袋有關(guān)。全株青綠玉米厭氧發(fā)酵后碳水化合物降解，產(chǎn)生乳酸等有機(jī)酸，pH值降低至3.7，抑制了大腸桿菌的生長(zhǎng)[1]。呼吸膜塑料袋有助于飼料的厭氧發(fā)酵[19]，使飼料維持在厭氧的酸性環(huán)境中。

貯藏時(shí)間和貯藏溫度影響低溫制粒全株青綠玉米顆粒料自由基的代謝、菌群的變動(dòng)和飼料品質(zhì)。高溫下全株青綠玉米低溫制粒顆粒在呼吸膜塑料袋中貯藏期不超過(guò)8 d，中溫下不超過(guò)16 d，低溫下貯藏時(shí)間可適度延長(zhǎng)。

參 考 文 獻(xiàn)：

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