李海琴，康昭風，譚美芳，曾艷兵，季華員

(江西省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所，江西南昌330200)

豬偽狂犬病(Pseudorabies,PR)是由偽狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的一種急性傳染病，臨床上主要表現為妊娠母豬流產、產死胎、木乃伊胎及弱仔，新生仔豬出現明顯的神經癥狀以及腹瀉死亡，育肥豬突然發(fā)熱和呼吸道等癥狀[1]，是危害養(yǎng)豬業(yè)最嚴重的傳染病之一。PRV基因組序列測定發(fā)現其由72個閱讀框組成，編碼70種蛋白[2-4]。偽狂犬野毒包括有gE、gB、gI、gG、TK等基因，其中gE基因是PRV的主要毒力相關基因[5]，也是世界動物衛(wèi)生組織所規(guī)定基因缺失疫苗的首選缺失基因，偽狂犬野毒抗體包含上述所有基因對應的抗體，我國用于預防豬偽狂犬病的疫苗主要是gE基因缺失的疫苗，配套使用gE缺失疫苗的豬場，使用PRV gE基因抗體檢測試劑盒能夠方便、快速、準確檢測PRV野毒抗體，從而評價豬群PRV野毒感染狀況[6]；gB抗體ELISA檢測，可以了解豬場接種豬偽狂犬疫苗后的免疫保護情況，若gB-ELISA 抗體檢測為陰性，則說明豬群不受免疫保護。近幾年來全國主要養(yǎng)豬地區(qū)均不同程度出現規(guī)模豬場豬偽狂犬病轉陽病例[7-8]，引起行業(yè)內高度的關注。江西是個養(yǎng)豬大省，規(guī)?；i場數量較多，迫切需要對江西省規(guī)?；i場豬偽狂犬病的流行現狀進行跟蹤與調查，為此，本研究對2016—2017年江西部分地區(qū)規(guī)模化豬場進行PRV抗體分析，初步分析了PRV抗體在不同年份、不同區(qū)域、不同豬群和不同季節(jié)的感染狀況。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物 被檢血清來自江西部分地區(qū)(南昌、九江、吉安、新余、東鄉(xiāng)、撫州、贛州、上饒)的規(guī)?；i場，其中哺乳仔豬(0～30日齡)、保育仔豬(30～70日齡)、生長育肥豬(70～180日齡)、后備豬為180日齡以后至配種前、母豬是能繁母豬、公豬為成年公豬，送檢豬場都免疫PRV gE缺失疫苗。

1.1.2 樣品采集與處理 2016年1月—2017年12月，在江西省不同地區(qū)的32個豬場共采集樣本1 820份，血清的采集方法是每只豬耳靜脈采集全血1 mL裝于2 mL滅菌離心管中。豬偽狂犬gE、gB抗體ELISA檢測試劑盒，購自美國IDEXX公司。

1.2 試驗方法

按常規(guī)方法分離所得血液的血清，然后按試劑盒的使用說明書進行樣品的處理及檢測。

2 結果與分析

2.1 不同年份江西省PRV gE抗體監(jiān)測情況

由表1可知，在監(jiān)測的32個規(guī)模豬場中，2016年監(jiān)測豬場數為16個，血清樣品為901份，PRV gE抗體陽性場數為11個，抗體陰性場數為5個，場陽性率為68.8%(11/16)；PRV gE樣品陽性數為362份，樣品陽性率為40.1%(362/901)。2017年監(jiān)測豬場數為16個，血清樣品為919份，PRV gE抗體陽性場數為10個，抗體陰性場數為6個，場陽性率為62.5%(10/16)；PRV gE樣品陽性數為318份，樣品陽性率為34.6%(318/919)。

2.2 江西省不同地區(qū)PRV血清學檢測結果

由表2可知，本研究從江西省南昌、九江、吉安、贛州、新余、上饒、宜春、撫州8個地區(qū)的32個規(guī)?；i場采集血清樣品，PRV gE抗體檢測結果顯示江西地區(qū)豬偽狂犬gE抗體總的陽性率為37.4%，九江市gE抗體陽性率最高，達到52.2%；其次依次為撫州、宜春、南昌、贛州、吉安、新余；上饒市gE抗體陽性率最低，為13.2%。PRV gB抗體檢測結果顯示gB抗體總陽性率為93.2%，南昌和贛州PRV gB抗體陽性率最高，為97.8%；其次依次為新余、九江、撫州、宜春、吉安；上饒地區(qū)的gB抗體陽性率最低，為74.7%。

表1 不同年份江西省PRV gE抗體檢測結果

表2 江西省不同地區(qū)PRV gE、gB抗體檢測結果

2.3 不同階段豬群PRV血清學檢測結果

從不同階段豬群PRV gE抗體陽性率結果(表3)來看，育肥豬的PRV gE陽性率最高(48.9%)，其次為母豬(44.2%)和公豬(35.8%)，依次是哺乳仔豬(33.5%)和后備豬(32.7%)，保育豬的陽性率最低(29.2%)；PRV gB抗體陽性率最高的是公豬(98.2%)，其次是哺乳仔豬(97.4%)和母豬(95.7%)，依次是后備豬(93.6%)和保育仔豬(87.6%)，育肥豬最低為(82.5%)。

表3 江西省不同階段豬群PRV gE、gB抗體檢測結果

2.4 不同季度PRV血清學檢測結果

對不同季度規(guī)模豬場PRV gE抗體陽性率進行統(tǒng)計，結果(表4)顯示，4個季度的PRV gE陽性率均在30%以上，其中第四季度PRV gE抗體陽性率最高(43.0%)，第三季度PRV gE抗體陽性率最低為30.5%；其中第四季度PRV gB抗體陽性率最高(94.4%)，第三季度PRV gB抗體陽性率最低為92.1%。

表4 2016—2017年江西省不同季度PRV gE、gB抗體檢測結果

3 小結與討論

本研究通過對江西省不同地區(qū)32個規(guī)?；i場的1 820份血清進行了豬偽狂犬血清學調查，2016年與2017年被調查的豬場gE抗體陽性率分別為68.8%和62.5%，因為送檢豬場均免疫PRV gE缺失疫苗，使用PRV gE基因抗體檢測試劑盒能夠準確檢測PRV野毒抗體，從而評價豬群PRV野毒感染狀況，被檢豬場gE抗體陽性率結果說明江西省豬偽狂犬野毒感染已十分普遍，2016年與2017年血清樣品gE抗體陽性率分別為40.1%和34.6%，PRV gE抗體總陽性率達37.4%，這比前期對江西省豬偽狂犬野毒感染的血清學調查結果更高[9-10]，結果表明江西省豬偽狂犬野毒感染已更嚴重。

從江西省8個地區(qū)采集的樣品檢測PRV感染的情況來看，九江市、撫州市、宜春市、南昌市和贛州市PRV gE抗體陽性率都較高，吉安市、新余市，上饒市PRV gE抗體陽性率較低；不同地區(qū)檢出率的差異與區(qū)域內豬場的疫苗種類，免疫程序，養(yǎng)殖密度，生物安全等諸多因素有關。

從不同階段豬群gE抗體陽性率來看，哺乳仔豬和保育仔豬PRV gE抗體陽性率偏低，這可能是受母源抗體的干擾，據報道，母豬產前30 d免疫偽狂犬疫苗，其仔豬30日齡時獲得母源抗體合格率為93.33%以上，且母源抗體可以維持到60日齡[11]；而隨著日齡增長，生長育肥豬的感染率顯著增高(48.9%)，原因可能是育肥豬舍的消毒衛(wèi)生和生物安全工作較差，這也是育肥豬感染率居高不下的重要原因，結果提示商品豬的偽狂犬疫苗免疫也是豬偽狂犬防控和凈化的關鍵環(huán)節(jié)；公豬和母豬及后備豬的PRV野毒感染率也較高，均在30%以上，種豬野毒陽性率居高不下，容易造成豬場內豬偽狂犬病毒循環(huán)傳播。

2016—2017年4個季度的PRV gE抗體陽性率均在30%以上，其中第四季度gE抗體陽性率最高(43%)，說明豬偽狂犬病四季都可能發(fā)生，沒有明顯的季節(jié)差異性，但以冬季較為多發(fā)，這與其他研究結果一致[12-14]。監(jiān)測結果表明氣候也是影響豬偽狂病野毒感染的因素之一，可能原因是低溫有利于病毒存活，冬季寒冷，豬舍內通風不良，易導致有害氣體聚集，易于病毒的傳播。

豬偽狂犬病gB抗體檢測結果顯示，南昌和贛州地區(qū)PRV gB抗體陽性率最高(97.8%)，但PRV gE野毒感染率也較高，分別為42%和35.2%；宜春地區(qū)的PRV gB抗體陽性率相對較低(93.4%)，gE抗體陽性率卻高為47.3%；公豬的PRV gB陽性率最高(98.2%)，但是公豬的PRV gE野毒感染率也較高，這種現象表明較高的gB抗體陽性率不能說明豬群未受到偽狂犬野毒的感染。

2012年國務院辦公廳頒布的《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃2012—2020》中要求，到2020年全國所有種豬場豬偽狂犬要達到凈化標準，面對我省如此嚴峻的偽狂犬流行情況，凈化豬偽狂犬病已迫在眉睫。疫苗免疫接種是預防和控制豬偽狂犬病的根本措施，我們需要制定科學的免疫方案，配合抗體檢測驗證免疫效果，采取嚴格的生物安全措施，并做好消毒工作及血清學監(jiān)測工作，加強豬場飼養(yǎng)管理，嚴格把好引種關，爭取在2020年達到凈化標準。