（蘇州大學(xué)法醫(yī)系，江蘇 蘇州 215000）

法醫(yī)昆蟲學(xué)是應(yīng)用昆蟲學(xué)及其他自然科學(xué)的理論與技術(shù)，研究并解決司法實(shí)踐中有關(guān)昆蟲學(xué)問題的一門學(xué)科，其中死亡時間推斷是法醫(yī)昆蟲學(xué)的主要研究內(nèi)容[1]。本文將對法醫(yī)昆蟲學(xué)用于死亡時間推斷的理論基礎(chǔ)、技術(shù)操作規(guī)范以及應(yīng)用數(shù)據(jù)進(jìn)行闡述和總結(jié)。

1 昆蟲用于死亡時間推斷的機(jī)制

目前，我國已有多本出版物[1-3]闡述了法醫(yī)昆蟲學(xué)的機(jī)制，但因偏重于理論知識，可操作性不強(qiáng)，嚴(yán)重影響了一線工作者對法醫(yī)昆蟲學(xué)的應(yīng)用。昆蟲推斷死亡時間的機(jī)制[4-5]：蠅類昆蟲能夠很快到達(dá)尸體，到達(dá)尸體后會很快產(chǎn)下下一代，子代取食尸體并在尸體上生長，子代的年齡充當(dāng)了尸體存在時間（死亡時間）的計(jì)時器。尸體上的子代昆蟲大?。挲g）不一，法醫(yī)昆蟲學(xué)是根據(jù)最老的幼期（卵、幼蟲和蛹）個體估算死亡時間。例如，對于一個種類的昆蟲，若在現(xiàn)場發(fā)現(xiàn)了該種類的蛹，則同種類幼蟲不再有死亡時間推斷價(jià)值，如果現(xiàn)場出現(xiàn)了空蛹?xì)?，則同種類的幼蟲和蛹不再有死亡時間推斷價(jià)值[6]。在大多數(shù)情況下，一種蠅類昆蟲只能在尸體上繁殖一代，這一代不同種類的昆蟲足以將尸體的軟組織消耗干凈，但這一代包含了不同時間到達(dá)的不同批次[7]。

昆蟲是變溫動物，其體內(nèi)的化學(xué)反應(yīng)速度嚴(yán)格受環(huán)境溫度的影響：高溫下發(fā)育快，相應(yīng)的發(fā)育所經(jīng)歷時間則短；而低溫下發(fā)育慢，相應(yīng)的發(fā)育所經(jīng)歷時間長；在一個指定的溫度下昆蟲完成一個發(fā)育階段所經(jīng)歷時間（發(fā)育歷期）較為恒定[8]。昆蟲在生長發(fā)育過程中，須從外界攝取一定的熱量才能完成某一階段的發(fā)育，昆蟲各個發(fā)育階段所需要的總熱量是一個常數(shù)，這個熱量通過溫度和時間的乘積來衡量，而不是通過卡路里來衡量。昆蟲的發(fā)育基本上都是從某一個零上溫度開始的，而不是從零攝氏度開始的。昆蟲開始發(fā)育的溫度即發(fā)育起點(diǎn)溫度。只有當(dāng)環(huán)境溫度高于某種昆蟲的發(fā)育起點(diǎn)溫度時，該昆蟲才能有效地?cái)z取熱量進(jìn)行生長發(fā)育，昆蟲在發(fā)育起點(diǎn)溫度之上所累積的熱值為發(fā)育有效積溫[8]。對于一個昆蟲物種來說，相同蟲態(tài)的發(fā)育起點(diǎn)溫度和發(fā)育有效積溫是恒定的[9]。

自然變溫有很多種表現(xiàn)形式，在實(shí)驗(yàn)室很難模擬，因此法醫(yī)昆蟲學(xué)通常利用在實(shí)驗(yàn)室獲取的恒溫?cái)?shù)據(jù)來計(jì)算昆蟲在變溫環(huán)境中的發(fā)育[4]。大多數(shù)情況下，命案現(xiàn)場的昆蟲是在一個波動的溫度（變溫）下生長，白天溫度高而夜晚溫度低，大致按照正弦曲線的趨勢波動，在標(biāo)準(zhǔn)時區(qū)時間的 13：00～14：00 氣溫最高，而在太陽出來前的1～2h氣溫最低。由于變溫有各種各樣的表現(xiàn)形式，即使平均值相同但不同變溫條件下各時間點(diǎn)的溫度可能不同，如果某一天上午艷陽高照而中午突降大雨則該天變溫可能不符合正弦曲線。通常情況下，昆蟲在恒溫下的發(fā)育與平均值一樣的變溫下的發(fā)育基本一致的，只有當(dāng)變溫的閾值達(dá)到或超過昆蟲的最高或最低耐受溫度區(qū)間時，變溫與恒溫的發(fā)育才會出現(xiàn)差異。但由于一般的嗜尸性昆蟲對溫度的適應(yīng)性很強(qiáng)，絕大多數(shù)案件中的變溫不會超過昆蟲的適溫范圍（若超過，則應(yīng)根據(jù)昆蟲的發(fā)育有效積溫計(jì)算死亡時間）。因此，國際上的通用做法是用恒溫下取得的結(jié)果來實(shí)現(xiàn)對于變溫下昆蟲發(fā)育的估算[10]。

影響嗜尸性昆蟲的因素很多，如溫度、濕度、光照、地域、尸體死亡原因等，其中濕度主要影響尸體的干化速度和微生物生長，從而間接影響昆蟲的生長發(fā)育，但濕度對于昆蟲的發(fā)育速率沒有顯著影響。光照主要影響昆蟲在尸體上的分布。而地域主要影響昆蟲的種類及各種類昆蟲的發(fā)育速率，這里主要是指大的地域（如廣東、陜西），對于小的地域（如深圳、中山和廣州），昆蟲種類基本沒有差異。實(shí)際上影響昆蟲的主要因素是溫度，其他因素的影響可以忽略，推斷死亡時間時只把溫度作為環(huán)境參數(shù)[5]。

法醫(yī)昆蟲學(xué)推斷死亡時間的另一種方法是根據(jù)昆蟲在尸體上的演替規(guī)律，限于篇幅故不在本文中贅述。

2 常用昆蟲用于死亡時間推斷的指標(biāo)

法醫(yī)昆蟲學(xué)者已經(jīng)開發(fā)出一系列死亡時間推斷的昆蟲學(xué)指標(biāo)，分別為發(fā)育歷期與等蟲態(tài)線圖、體長與等長線圖、蛹內(nèi)形態(tài)變化等[11-13]。

2.1 發(fā)育歷期

昆蟲在胚后發(fā)育過程中，幼期發(fā)育為成蟲，所有的外部形態(tài)、內(nèi)部器官、生理、生活習(xí)性及行為和本能上的一切變化總和，叫作變態(tài)[10]。昆蟲的發(fā)育要經(jīng)過卵期、幼蟲期、蛹期、成蟲期四個階段，而幼蟲期也可以根據(jù)蛻皮次數(shù)分為若干齡期[14]。卵期是一個不活動的蟲態(tài)，從卵孵化出的幼蟲通常很小，取食生長后不斷長大，當(dāng)長大到一定程度時，由于堅(jiān)韌的幾丁質(zhì)體壁限制了其生長，就必須退去舊皮，代之以新表皮[10]。昆蟲從前一個幼蟲期向后一個幼蟲期的轉(zhuǎn)變過程稱為蛻皮。蠅類的幼蟲期一般有3個齡期[15]，甲蟲的幼蟲期因種類而不同，其中皮蠹有5～11個齡期[16]。蛹期是指完全變態(tài)類的昆蟲，在幼蟲變化成蛹，蛹變?yōu)槌上x之前的一段時期。昆蟲在該蟲態(tài)時往往不吃也不動，蛹?xì)け砻鎺缀鯖]有變化，但蛹?xì)?nèi)部卻發(fā)生著天翻地覆的改變[17]。蛹羽化后進(jìn)入成蟲期，昆蟲成蟲期的主要任務(wù)是交配和繁殖，新羽化的成蟲通常需要經(jīng)歷一段時間的性成熟期才能交配和繁殖。大多數(shù)種類一旦完成繁殖，成蟲就會很快死亡。

昆蟲每個發(fā)育階段所經(jīng)歷的時間，即發(fā)育歷期，就一個特定的昆蟲物種來說，在特定的溫度下，昆蟲的發(fā)育歷期是恒值。不僅整個發(fā)育期是恒值，而且每個階段，包括卵期、幼蟲期、蛹期都是恒值，幼蟲期的每個齡期也是恒值。昆蟲的發(fā)育歷期常常被法醫(yī)昆蟲學(xué)用來判斷昆蟲的年齡[1]。通常情況下，發(fā)育歷期是在實(shí)驗(yàn)室梯度恒溫[18-19]（如 12、16、20、24、28、32、36 ℃）下通過觀察得到。在應(yīng)用時，測量現(xiàn)場溫度，用最接近的實(shí)驗(yàn)室溫度來計(jì)算昆蟲年齡，即最短死亡時間。

目前，我國有12種具法醫(yī)學(xué)重要意義的昆蟲發(fā)育歷期已經(jīng)被系統(tǒng)研究，包括大頭金蠅[19]、緋顏裸金蠅[18]、亮綠蠅[20]、烏足錫蠅[21]、家蠅[22]、巨尾阿麗蠅[23]、絲光綠蠅[13]、棕尾別麻蠅[24]、野亞麻蠅[25]、瘦葉帶綠蠅[26]、黑水虻[27]和大隱翅甲[28]（附表 1～12）。

2.2 體長

尸體上的蠅類幼蟲，除少數(shù)體扁和體節(jié)上有棘突外，多數(shù)為圓柱形，前尖后鈍[29]。隨著幼蟲的生長，體長逐漸增長，這種體長變化可以準(zhǔn)確反映幼蟲的日齡。通過回歸方程可以模擬體長與發(fā)育時間的關(guān)系。幼蟲體長的增長呈S型，也就是說，低齡的時候體長增長比較緩慢，隨著幼蟲生長進(jìn)入中等大小，體長開始迅速增長，接近成熟時，體長變化又進(jìn)入緩慢階段，最后進(jìn)入平臺期。臨近化蛹，幼蟲體長還會縮短[18，30]。值得注意的是，法醫(yī)昆蟲學(xué)在推斷死亡時間時只采用取食期（平臺期之前）的幼蟲體長作為指標(biāo)，進(jìn)入離食期后（平臺期后）幼蟲體長不再變化甚至縮短，此時的幼蟲體長一般不作為死亡時間推斷的指標(biāo)[13]。另外，需要特別說明的是，幼蟲的體長變化不是均勻的，在實(shí)際應(yīng)用中不能定義為幼蟲體長增長趨勢是每天增長1mm[9]。

我國具法醫(yī)學(xué)重要意義昆蟲的體長變化規(guī)律見附表 13～19。

2.3 發(fā)育起點(diǎn)溫度和發(fā)育有效積溫

昆蟲的生長發(fā)育遵循有效積溫法則，即昆蟲各個發(fā)育階段所需要的總熱量是一個常數(shù)，其計(jì)算公式[31]為：

式中，K是總積溫 （常數(shù)），N為發(fā)育歷期即生長發(fā)育所需時間，T為發(fā)育期間的平均溫度，C為發(fā)育起點(diǎn)溫度。公式經(jīng)推演可得：

式中，V是發(fā)育速率，為N的倒數(shù)。一般測定K和C的方法是通過實(shí)驗(yàn)得到不同溫度（T）時的相應(yīng)V，然后推算求得K、C值[7]。目前，獲取K和C值的方法有人工恒溫法、多級人工變溫法和自然變溫法3種方法，其中最常用的方法為人工恒溫法[32]。

我國具重要法醫(yī)學(xué)意義的昆蟲發(fā)育起點(diǎn)溫度及積溫常數(shù)見附表20～26。

2.4 等蟲態(tài)線圖與等長線圖

等蟲態(tài)線圖是根據(jù)不同恒溫下（y軸）不同發(fā)育節(jié)點(diǎn)所經(jīng)歷的時間建立的散點(diǎn)圖。圖中每一條曲線表示昆蟲在不同恒溫下發(fā)育至一個特定發(fā)育節(jié)點(diǎn)所需的時間。圖中的發(fā)育節(jié)點(diǎn)實(shí)際上是發(fā)育歷期的另一種表示方法。例如，第一次蛻皮的時間即為一齡幼蟲的發(fā)育歷期，第二次蛻皮的時間即為一齡幼蟲的發(fā)育歷期與二齡幼蟲的發(fā)育歷期之和[5，33]。

等長線圖是一個等差線圖，圖中包含孵化后時間（x軸）、溫度（y軸）及幼蟲大?。▃軸）三個變量。 圖中每一條等差線對應(yīng)一個幼蟲體長，即幼蟲體長為3mm、4mm、5mm等時不同溫度下所對應(yīng)的幼蟲孵化后的生長發(fā)育時間[5，33]。

利用等蟲態(tài)線圖與等長線圖能夠方便、快速、準(zhǔn)確地推斷出最短死亡時間。例如，在一個平均環(huán)境溫度為27℃的死亡現(xiàn)場中發(fā)現(xiàn)了大頭金蠅的幼蟲、蛹和新羽化成蟲。顯然，新羽化的大頭金蠅成蟲是該現(xiàn)場最老的蟲態(tài)。在推斷最短死亡時間時，只需要在等蟲態(tài)線圖中以y軸的27℃為起點(diǎn)，作與x軸的平行線并與“羽化”的等蟲態(tài)線相交，則可直接讀出最短死亡時間為250h（圖1）。另一個平均環(huán)境溫度為28℃的死亡現(xiàn)場中，發(fā)現(xiàn)尸體上活躍著大量的大頭金蠅幼蟲，而在現(xiàn)場未發(fā)現(xiàn)大頭金蠅的離食期幼蟲和蛹。測量采集到的最老的幼蟲，得到最大平均體長為14mm。則根據(jù)等長線圖，以y軸28℃為起點(diǎn)，作與x軸平行的線并與“14 cm”的等長線相交，直接讀出最短死亡時間為 60h（圖 2）。

圖1 大頭金蠅等蟲態(tài)線圖[19]

圖2 大頭金蠅幼蟲從卵孵化到取食高峰的等長線圖[19]

由于圖片版權(quán)限制，本文只列舉了大頭金蠅的等蟲態(tài)線和等長線圖，其他具法醫(yī)學(xué)重要意義的種類，包括緋顏裸金蠅[18]、亮綠蠅[20]、家蠅[22]、巨尾阿麗蠅[23]、絲光綠蠅[13]、棕尾別麻蠅[24]、野亞麻蠅[25]、瘦葉帶綠蠅[26]和大隱翅甲[28]的等蟲態(tài)線和等長線圖可以根據(jù)文中所列的參考文獻(xiàn)進(jìn)行查閱。

3 現(xiàn)場標(biāo)準(zhǔn)化操作

3.1 昆蟲證據(jù)采集工具和設(shè)備

在進(jìn)入死亡現(xiàn)場前，法醫(yī)昆蟲學(xué)工作者應(yīng)根據(jù)法醫(yī)昆蟲學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化準(zhǔn)則準(zhǔn)備各種法醫(yī)昆蟲學(xué)采集工具和設(shè)備[4]。攜帶進(jìn)入現(xiàn)場的工具箱中應(yīng)配備：（1）捕蟲網(wǎng)，用于捕捉蠅類成蟲；（2）毒瓶（用棉花蘸取少量乙酸乙酯置于其中，使用前準(zhǔn)備），毒殺昆蟲；（3）黑色防水記號筆和標(biāo)簽紙，寫標(biāo)簽、做記錄；（4）不銹鋼鑷子，夾取昆蟲；（5）鐵鏟，挖掘和收集蠅蛆或蠅蛹；（6）軟毛筆，采集卵、收集微小或較柔軟的昆蟲；（7）≥90℃的熱水或乙醇-二甲苯混合溶液（xylene-alcohol solution，XA液），處理蠅類幼蟲，使蟲體盡量伸長；（8）燒杯，用于處理幼蟲樣本或扣捕昆蟲；（9）裝有80%乙醇溶液的塑料瓶（≥10個），用于昆蟲樣本保存；（10）具通風(fēng)功能的養(yǎng)蟲盒（≥5個），用于盛放和飼養(yǎng)采集到的活蟲樣本；（11）防護(hù)服、頭套、口罩、手套及鞋套，自身防護(hù)同時防止污染現(xiàn)場；（12）攝像機(jī)和照相機(jī)，記錄昆蟲活動、現(xiàn)場環(huán)境、尸體情況以及保證昆蟲證據(jù)鏈的完整性；（13）警用標(biāo)尺，拍照時使用；（14）普通溫度計(jì)，用于環(huán)境、尸體及蛆群溫度的直接測量；（15）電子溫度計(jì)，用于環(huán)境、尸體及蛆群溫濕度的長期監(jiān)測；（16）記錄文件夾，現(xiàn)場情況詳細(xì)記錄。

3.2 昆蟲標(biāo)本采集

法醫(yī)昆蟲學(xué)工作者應(yīng)穿戴防護(hù)服、頭套、口罩、手套及鞋套，在得到勘驗(yàn)現(xiàn)場的許可后方可進(jìn)入現(xiàn)場。進(jìn)入現(xiàn)場后，應(yīng)對以下情況進(jìn)行調(diào)查、記錄以及拍照：（1）尸體所處的環(huán)境類型，昆蟲的生長發(fā)育和演替規(guī)律主要受環(huán)境影響，進(jìn)入現(xiàn)場后應(yīng)首先確定現(xiàn)場環(huán)境。室內(nèi)案件要及時檢查門窗的封閉情況，而室外現(xiàn)場則要明確尸體所處的生境（如森林、農(nóng)田、草地或水域）。（2）詳細(xì)了解尸體概貌以及尸體上昆蟲的分布、數(shù)量及生長發(fā)育情況。昆蟲與尸體密切相關(guān)，切勿脫離尸體單純分析昆蟲證據(jù)，若昆蟲發(fā)生與尸體腐敗情況不一致，則很可能揭示其他案情。（3）簡要案情，案情對于法醫(yī)昆蟲學(xué)分析至關(guān)重要。

3.2.1 昆蟲證據(jù)及分布

卵、幼蟲、蟲蛻、蛹、蛹?xì)ぜ俺上x是現(xiàn)場最重要的昆蟲證據(jù)。此外，昆蟲殘肢、糞便以及活動形成的昆蟲血痕、化蛹孔及羽化孔也具有非常重要的價(jià)值。昆蟲證據(jù)絕不僅存在于尸體上，而是廣泛分布于以尸體為中心10m的范圍內(nèi)[34]。例如，大多數(shù)蠅類的幼蟲在進(jìn)入離食期后會大批量離開尸體鉆入周圍的泥土中化蛹。此外，有些種類的甲蟲，如大隱翅甲的成蟲和幼蟲常隱藏于尸體周圍的泥土中捕食離食期的蠅類幼蟲。因此，在昆蟲證據(jù)采集時，不僅要調(diào)查尸體上的昆蟲，還要仔細(xì)搜尋尸體周圍的地面及地下。值得注意的是，蠅類成蟲有時會鉆入口鼻腔深處產(chǎn)卵，昆蟲證據(jù)很難發(fā)現(xiàn)，特別是卵孵化干癟且幼蟲鉆入更深處取食時。因此，在面對一具較為新鮮但已經(jīng)有蠅類成蟲活動的尸體時，應(yīng)加倍仔細(xì)檢查尸體的天然開口，以作出正確的判斷。

3.2.2 蠅類成蟲

新羽化的成蟲是非常關(guān)鍵的昆蟲證據(jù)，可以用于準(zhǔn)確地推斷最短死亡時間。新羽化的成蟲通常很好辨認(rèn)：有的剛剛從蛹?xì)ぶ秀@出，額囊膨大、體表呈灰白色且羽翅尚未舒展，只能在地面上爬行；有的體表已經(jīng)完全著色且羽翅已經(jīng)舒展，但仍不善飛行且蟲體潔凈，很容易與老熟成蟲分區(qū)。新羽化的成蟲由于活動能力較弱可以直接用燒杯扣捕或戴手套抓捕。

從周圍環(huán)境中被尸體引來覓食、交配及產(chǎn)卵的成蟲，其發(fā)生和消失遵循昆蟲群落演替規(guī)律，也具有死亡時間推斷價(jià)值。揮動捕蟲網(wǎng)在成蟲大量活動的尸體上方揮動數(shù)下，使昆蟲進(jìn)入網(wǎng)兜底部，隨后迅速用手密閉網(wǎng)兜，將網(wǎng)兜放入毒瓶中約5min處死成蟲。對于微小的蠅類，如蚤蠅和酪蠅，可用洗耳球配合吸蟲管吸取。蠅類每種采集10頭左右即可，采集過程需拍照并做記錄[6]。

3.2.3 甲蟲成蟲

甲蟲成蟲的出現(xiàn)和消失遵循昆蟲群落演替規(guī)律，可以用于推斷死亡時間。甲蟲成蟲在現(xiàn)場的數(shù)量通常較少，建議盡量全部采集，采集時可以用鑷子夾取或直接戴手套捕捉。采集到的甲蟲成蟲直接放入80%乙醇溶液中并做好標(biāo)識。

3.2.4 卵

用鑷子小心夾取或用蘸過水的毛筆蘸取后放入80%乙醇溶液中保存。此外，建議采集一些卵放入養(yǎng)蟲盒中帶回實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)觀察，養(yǎng)蟲盒內(nèi)一定要添加新鮮肉類以供孵化后的幼蟲取食。

3.2.5 蠅類幼蟲

進(jìn)入現(xiàn)場后首先采集離食期的幼蟲，再收集取食期幼蟲。建議盡可能多地采集幼蟲樣本，收集時，可以用鐵勺舀取或用鑷子夾取。尸體上不同部位的蠅蛆分開采集。切記要把幼蟲先放入盛有≥90℃的熱水或XA液的燒杯中處理30 s，再轉(zhuǎn)移至裝有80%乙醇溶液的塑料瓶中。將注明采集時間、地點(diǎn)以及采集部位的標(biāo)簽貼于瓶身。另外，建議采集一些活的幼蟲放入養(yǎng)蟲盒中帶回實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)觀察。養(yǎng)蟲盒中要及時添加瘦肉供蛆蟲取食。養(yǎng)蟲盒必須具密封性，以防幼蟲逃脫。不同種類的蛆蟲要分開放置，以防相互殘殺。

3.2.6 甲蟲幼蟲

甲蟲幼蟲通常行動迅速且身形隱秘，調(diào)查時需仔細(xì)尋找，采用鑷子夾取或戴手套捕捉。尸體上甲蟲幼蟲的數(shù)量通常較少，但盡量保證每種幼蟲的個體數(shù)≥10頭。采集的幼蟲一部分直接放入80%乙醇溶液中保存，剩余的放進(jìn)養(yǎng)蟲盒中飼養(yǎng)。對于皮蠹及郭公甲這類以干燥食物為食的昆蟲，放入干肉以供其取食。而對于大隱翅甲及閻甲這類捕食性昆蟲，則放入蠅蛆或蠅蛹。活的甲蟲幼蟲絕不能混合放置，以防互相殘殺。

3.2.7 蠅類蛹

蠅類蛹期時間約占整個發(fā)育過程的50%，具有重要的最短死亡時間推斷價(jià)值[11]。室外現(xiàn)場中，大多數(shù)種類的蠅蛹隱蔽于尸體周圍10 m范圍的泥土中，而在地面堅(jiān)硬室內(nèi)現(xiàn)場，幼蟲則會在墻角、門縫、地毯、桌椅下等隱蔽的地方化蛹。此外，死者衣服的口袋或縫處也經(jīng)常會發(fā)現(xiàn)蠅蛹。個別種類，如烏足錫蠅金蠅和蚤蠅會直接在尸體殘骸上化蛹[35]。

蠅蛹大都分布在地下0～10cm的土壤中，在調(diào)查時應(yīng)充分挖掘尸體周圍的泥土并仔細(xì)檢查。采集到的蠅蛹一部分先放入裝有≥90℃熱水的燒杯中處理30s后，再放到80%乙醇溶液中保存[11]。其余的放入底層鋪有沙土的養(yǎng)蟲盒中帶回實(shí)驗(yàn)室內(nèi)飼養(yǎng)。以上過程均需拍照及做好標(biāo)簽。

3.2.8 甲蟲蛹

甲蟲的蛹數(shù)量少且化蛹場所隱蔽，通常很難發(fā)現(xiàn)，在調(diào)查過程中務(wù)必耐心尋找。甲蟲的蛹常會分布于髓腔中、顱骨內(nèi)、衣服內(nèi)側(cè)或者尸體周圍的石塊下方及土壤中。甲蟲蛹的處理方法與蠅類相同，一部分放入80%乙醇溶液中保存，其余放入養(yǎng)蟲盒中帶回實(shí)驗(yàn)室恒溫飼養(yǎng)[34-35]。

3.2.9 昆蟲證據(jù)實(shí)驗(yàn)室處理

采集到的昆蟲樣本應(yīng)第一時間帶回實(shí)驗(yàn)室處理。昆蟲證據(jù)的運(yùn)輸和處理過程應(yīng)在攝像機(jī)的監(jiān)控下進(jìn)行，以確保證據(jù)鏈的完整性。成蟲樣本一般做成針插標(biāo)本后進(jìn)行種類鑒定，標(biāo)簽中詳細(xì)注明采集時間、采集地點(diǎn)、案例號、采集部位及拉丁學(xué)名。幼蟲樣本在體視顯微鏡下鑒定種類和確定齡期，采用電子游標(biāo)卡尺進(jìn)行體長測量。采集的活蟲添加食物后要放入恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，每隔4 h觀察一次，記錄蟲體的化蛹及羽化時間。

3.3 氣象數(shù)據(jù)獲取和校正

相關(guān)氣象數(shù)據(jù)（最主要是日平均溫度）從距案發(fā)地最近的氣象站調(diào)取。根據(jù)預(yù)估死亡時間確定需要調(diào)取氣象數(shù)據(jù)的時間范圍。例如，根據(jù)昆蟲生長發(fā)育情況估計(jì)尸體死亡了20d，那么可向氣象站調(diào)取近一個月的日平均溫度數(shù)據(jù)。考慮到氣象站的溫度數(shù)據(jù)與現(xiàn)場可能存在差異，為了得到更為準(zhǔn)確的溫度數(shù)據(jù)，需要調(diào)查現(xiàn)場3～5d的環(huán)境溫度，與氣象站的溫度數(shù)據(jù)對比，建立回歸方程找出差異，得到案發(fā)時間內(nèi)準(zhǔn)確的環(huán)境溫度[4]。

4 小 結(jié)

本文闡述了法醫(yī)昆蟲學(xué)利用昆蟲生長發(fā)育規(guī)律推斷死亡時間的理論基礎(chǔ)和操作方法，歸納列舉出我國12種最常見嗜尸性昆蟲的發(fā)育數(shù)據(jù)，以期為我國法醫(yī)昆蟲學(xué)實(shí)踐提供參考和指導(dǎo)。

昆蟲生長發(fā)育規(guī)律是法醫(yī)昆蟲學(xué)最主要的研究方向之一，雖然在此方面我國已經(jīng)開展了較多研究，但從文中列舉的發(fā)育數(shù)據(jù)可以看出，目前發(fā)育研究的重點(diǎn)是蠅類，而有關(guān)在尸體腐敗晚期及白骨化階段出現(xiàn)的甲蟲的研究很少，這使得法醫(yī)學(xué)工作者在遇到相關(guān)案件時無數(shù)據(jù)可以參考。在今后的法醫(yī)昆蟲學(xué)研究中應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)甲蟲生長發(fā)育規(guī)律的研究。

此外，近年來已經(jīng)有研究證實(shí)了差異基因表達(dá)技術(shù)用于推斷嗜尸性蠅類年齡的價(jià)值[36-39]，而形態(tài)學(xué)和差異基因表達(dá)相結(jié)合有望實(shí)現(xiàn)更加精確的死亡時間推斷[37，40]。此方面必將成為近年來法醫(yī)昆蟲學(xué)發(fā)育研究的熱點(diǎn)。

（全文附表見官網(wǎng)電子版全文。）