張照陽

［作者單位］450000河南鄭州，河南中醫(yī)藥大學第三附屬醫(yī)院檢驗科（張照陽）

根據(jù)《血站質(zhì)量管理規(guī)范》設立規(guī)范的血液檢測實驗室，建立完善的血液制備管理體系，確保血液安全有效并嚴格執(zhí)行隔離與放行制度［1］。血標本在全自動核酸檢測儀器（nucleic acid amplifica－tion testing，NAT）下檢測乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、獲得性免疫缺陷病毒（HIV），該檢測儀器的靈敏度、特異性度高，檢測為假陽性的概率低，保證檢測結(jié)果的正確性和可信性。另外，我國于2015年制定了《血站技術操作規(guī)程》［2］，進一步對核酸檢測做了規(guī)范性的指導，試驗中將嚴格按照指導規(guī)范操作，保證結(jié)果的正確和可信。提高核酸試劑的效能和利用率是現(xiàn)在研究的一項重點工作，為了探索最佳檢測方式，故筆者對核酸試劑采用不同方式進行檢測，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料2016年、2017年市中心血站無償獻血者標本分別為8000份、8500份 （快速HBsAg和ALT試紙檢測血液標本合格）。獻血者需根據(jù)《獻血者健康檢查要求》［3］和《中華人民共和國獻血法》［4］選取。

1.2 試劑與儀器HIV、HCV、HBV ANT聯(lián)合測試（北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)）；全自動核酸檢測系統(tǒng)（北京博暉創(chuàng)新光電技術股份有限公司生產(chǎn)）；3k30德國SIGMA低溫高速離心機 （上海基匯生物科技有限公司），儀器都經(jīng)過校準并在有效期內(nèi)。

1.3 方 法

1.3.1 分組方法 對照組：2016年度實驗站對實行批放行的血液樣本進行血型、ANT、ELISA等常規(guī)初檢，若ELISA初檢時樣本結(jié)果為“反應性”則進行雙孔復檢，若復檢為“反應性”無須進行核酸試驗，所有檢測結(jié)果為“無反應性”的標本均需進行核酸試驗。先對8個標本采用核酸檢測系統(tǒng)進行混檢并于48h內(nèi)檢測完畢，對于混檢為陽性的再做拆分測試，在此過程中記錄報廢試劑的原因及狀況并進行總結(jié)。核酸檢測操作步驟如下：取5 ml標本放入低溫高速離心機內(nèi)離心，離心條件為1600 g、20 min，標本需在4 h內(nèi)離心防止RNA降解，離心后置于4℃冰箱內(nèi)靜置30 min；將離心完畢后樣本、HIV、HCV、HBV ANT聯(lián)合測試試劑及芯片置于全自動核酸檢測系統(tǒng)相應位置，關閉儀器門并點擊運行，即可得到檢測結(jié)果。研究組：于2017年按照要求嚴格實行隔離與放行的血液管理制度。優(yōu)化操作人員技術水平、提高室內(nèi)環(huán)境并加強儀器的管理質(zhì)量，試驗站對每天采集的血標本定為1個大的檢測批，同樣先對血標本行血型、ANT、ELISA（兩次）等常規(guī)初檢，對血液標本檢查為“無反應”的結(jié)果進行“滿架”核酸混檢，每天的檢測總量為25個，將剩余的標本在冷凍室保存（4℃），每天按此循環(huán)。根據(jù)對照組的方式進行拆分單檢，對于不合格及“無反應性”的血標本禁止核酸檢測，所有測試均在72 h內(nèi)完成，血液質(zhì)量合格的做好標記核對再批放行，同樣在操作過程中記錄報廢試劑的原因及狀況并進行總結(jié)。

1.3.2 數(shù)據(jù)整理 每天記錄好實驗室核酸測試。包括每天標本總數(shù)和試劑總數(shù)、混檢標本數(shù)和試劑用量、拆分試劑用量和報廢的試劑量，做好報廢原因的記錄并進行總結(jié)分析。

1.3.3 計算公式 總有效利用率=實際測試量/試劑標定測試量×100%。

1.3.4 觀察指標 測試完結(jié)后，對比兩種檢測方式的有效利用率和廢用率。

1.3.5 統(tǒng)計學分析 采用SPSS 19.0軟件處理數(shù)據(jù)，核酸的總有效利用率與總報廢率計數(shù)資料以%表示，數(shù)據(jù)比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測方式下核酸有效利用率的比較檢測后，研究組的總有效率高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=15.312，P＜0.01）。 見表 1。

2.2 兩種檢測方法的試劑報廢率比較檢測后，研究組的廢棄率低于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（χ2=14.312，P＜0.01）。 見表 2。

表 1 兩種檢測方式下核酸有效利用率的比較

表 2 兩種檢測方法的試劑報廢原因比較

3 討論

做好血液的篩查工作，保證血液質(zhì)量的安全，是臨床患者用血的根本。全自動化核酸檢測可以減少工作量、減少樣本的污染、高效提取樣本的核酸、實施過程監(jiān)護等。但其成本比較高，為了減少浪費，所以本次實驗采用兩種不同的管理方式對其利用率進行比較且須在48 h完成檢測。據(jù)結(jié)果顯示，優(yōu)化檢測模式可提高試劑有效利用率［5］。

此次研究采用了兩個年度血標本進行試驗，分別采用血液批模式和血液隔離放行模式完成檢測，并在研究組血液隔離放行模式中完善了操作人員技術水平并加強了環(huán)境管理制度。根據(jù)兩次檢測結(jié)果可知研究組中核酸試劑的利用率優(yōu)于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），研究組中的報廢率顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。說明研究組的檢測方式更具有優(yōu)勢，可有效提高試劑利用率，減少資源浪費，可能是研究組中完善了檢測流程，提高了管理方式。李天君等［6］學者指出導致試劑浪費的原因多是因為檢測流程安排的不夠完善。

綜上所述，強化操作流程、提高工作人員的專業(yè)水平、完善環(huán)境的管理、做好儀器的保管工作，采用研究組方法進行檢測，可進一步的提高核酸檢測的利用率，減少資源的浪費。隨著科技不斷進步，全自動ANT檢測儀器也會升級換代，檢測技術也將會不斷完善，以后還需做更多血液檢測模式的研究以適用臨床需求。