崔 凱，鄭尊濤，穆 蘭，秦冬梅，簡(jiǎn) 秋，龔 勇，李富根*

(1.農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所，北京 100125；2.江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與營(yíng)養(yǎng)研究所，江蘇 南京 210014)

枸杞(LyciumbarbarumL.)為茄科多年生落葉灌木，在我國(guó)主要分布在寧夏、內(nèi)蒙古、新疆等地。枸杞具有極高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，不僅含鐵、磷、鈣等元素，而且含有大量糖、脂肪、蛋白質(zhì)、色素和維生素等物質(zhì)，具有促進(jìn)免疫、抗衰老、抗腫瘤、清除自由基、抗疲勞、抗輻射、保肝等多種功效[2-3]。枸杞的果、葉、枝梢鮮嫩，含糖量高，營(yíng)養(yǎng)豐富，因此易遭受病蟲(chóng)危害，嚴(yán)重時(shí)可使枸杞減產(chǎn)50%以上，造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。目前，枸杞上常有木虱、薊馬、粉蚧、蚜蟲(chóng)等蟲(chóng)害發(fā)生，其中以蚜蟲(chóng)危害最為嚴(yán)重，目前的防治措施以化學(xué)農(nóng)藥為主，而隨著農(nóng)藥的大量使用，會(huì)帶來(lái)環(huán)境污染、農(nóng)藥殘留超標(biāo)等問(wèn)題，因此建立一套完整的快速、準(zhǔn)確、高效的農(nóng)藥殘留監(jiān)測(cè)方法，具有必要性。

目前，關(guān)于枸杞中農(nóng)藥殘留分析方法主要有液相色譜法(HPLC)[6-7]、氣相色譜法(GC)[8-9]、氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)[10-11]、液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)[12-13]等，其中GC具有分析速度快、分離效能高、靈敏度高、應(yīng)用范圍廣、同時(shí)分離分析多種組分等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥多殘留分析之中[14]。李飛飛等建立了GC-ECD同時(shí)檢測(cè)枸杞中聯(lián)苯菊酯、硫丹和高效氯氟氰菊酯的殘留量的方法，樣品采用丙酮提取，弗羅里硅土層析柱凈化，3種農(nóng)藥的平均回收率為84.30%～98.60%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.5%～7.6%，檢出限在0.02～0.04 mg/kg之間；張艷等結(jié)合GC-ECD，采用乙腈提取，弗羅里硅土柱凈化，測(cè)定了枸杞中六六六、滴滴涕、三氯殺螨醇3種有機(jī)氯農(nóng)藥，該方法的檢出限為0.084～1.6μg/kg，添加回收率為79.5%～120%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.09%～11.4%。本研究在參考已有報(bào)道的基礎(chǔ)上，采用QuEChERS凈化結(jié)合氣相色譜檢測(cè)技術(shù)，建立了同時(shí)檢測(cè)枸杞中3種農(nóng)藥殘留的分析方法，為枸杞中農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)提供了技術(shù)支持。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器 Agilent 7890A氣相色譜儀-ECD檢測(cè)器；OA-SYSN-EVAP 112氮吹儀；IKA ULTRA-TURRAX T25 digitel高速分散機(jī)；SIGAM 4-15離心機(jī)；METTLER AE240、PC4000分析天平；IKA VORTEX GENIUS 3渦旋混合儀；0.22 μm有機(jī)濾膜等其他實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。

1.2 主要試劑 乙腈、正己烷為色譜純，氯化鈉、無(wú)水硫酸鎂、檸檬酸為分析純，乙酸為優(yōu)級(jí)純，水為GB/T 6682中規(guī)定的一級(jí)水；標(biāo)準(zhǔn)品由農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所提供。

1.3 樣品前處理 稱取5.0 g枸杞樣品于100 mL塑料離心管中，加入20 mL純水，15 000 r/min勻漿30 s，加入20 mL乙腈劇烈震蕩1 min，再加入1.5 g檸檬酸、1 g氯化鈉，4 g無(wú)水硫酸鎂，劇烈震蕩1 min，4 000 r/min轉(zhuǎn)速下離心5 min，取上清液10 mL于15 mL塑料離心管中，加入0.4 gPSA、1.2 g無(wú)水硫酸鎂，劇烈震蕩至混合均勻后，渦旋混合3 min，4 000 r/min轉(zhuǎn)速下離心5 min，取4 mL上清液于刻度試管中，氮吹至近干，用正己烷定容至1 mL，渦旋混勻，過(guò)0.22 μm有機(jī)濾膜，上機(jī)待測(cè)。

1.4 檢測(cè)條件 進(jìn)樣口240℃不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量1μL，檢測(cè)器300 ℃，色譜柱：HP-5,30 m×0.25 mm×0.25μm,載氣流速1.3 mL/min，程序升溫：起始80℃以20 ℃/min的速率升至170 ℃，再以5 ℃/min的速率升至260℃，260℃保持15 min。

標(biāo)樣譜圖(圖1)。

圖1 標(biāo)樣0.1 mg/L譜圖注：1為氯氰菊酯，保留時(shí)間以第1個(gè)峰計(jì)，峰面積為4個(gè)峰之和；2為氰戊菊酯，保留時(shí)間以第1個(gè)峰計(jì)，峰面積為2個(gè)峰之和；3為溴氰菊酯，保留時(shí)間以第2個(gè)峰計(jì)，峰面積為2個(gè)峰之和。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線 準(zhǔn)確稱取一定量的標(biāo)準(zhǔn)品(精確至0.1 mg)，以正己烷溶解并稀釋，配制成一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度分別為0.02、0.05、0.1、0.5、1和2 mg/L，用1.4方法檢測(cè)，得到氯氰菊酯線性回歸方程y=214 927x-5 618，相關(guān)系數(shù)R2為0.998 2，保留時(shí)間為27.95 min；氰戊菊酯線性回歸方程y=595 716x-15 938，相關(guān)系數(shù)R2為0.993 3，保留時(shí)間為31.56 min；溴氰菊酯線性回歸方程y=435 304x-20 460，相關(guān)系數(shù)R2為0.998 1，保留時(shí)間為35.48 min。3種農(nóng)藥在0.02～2 mg/L濃度范圍內(nèi)標(biāo)曲線性關(guān)系良好。

2.2 添加回收 將空白枸杞樣品粉碎，加入標(biāo)樣，充分混勻后靜置2 h，做0.02、0.5、2 mg/kg，3個(gè)水平的添加回收，每個(gè)添加濃度重復(fù)5次，用1.3方法前處理，1.4方法檢測(cè)。在3個(gè)添加水平下，3種農(nóng)藥的回收率在85.7%～102.5%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.9%～7.7%之間，(表1)。

表1 回收率(n=5)和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差

2.3 定量限 根據(jù)添加回收試驗(yàn)，枸杞中3種農(nóng)藥的定量限均為0.02 mg/L。

3 結(jié)論

本文采用乙腈提取，QuEChERS凈化，氣相色譜檢測(cè)，建立了枸杞中3種農(nóng)藥的檢測(cè)方法，并對(duì)方法的回收率和精密度進(jìn)行了探究。在3個(gè)添加水平下，回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均滿足檢測(cè)要求。本方法簡(jiǎn)便快捷、靈敏可靠，為枸杞中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定提供了一種簡(jiǎn)單高效的檢測(cè)方法。