甘輝群，劉明生*，袁 橙，郝福星，康金龍，張 昊，熊小兵

(1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇泰州 225300;2.江蘇省泰州市海陵區(qū)成香家禽養(yǎng)殖場，江蘇泰州 225318)

當(dāng)前畜禽養(yǎng)殖存在抗生素濫用、疫病頻發(fā)、環(huán)境污染等問題。因此，加強生物安全管理，用中草藥添加劑等代替抗生素，實現(xiàn)無抗健康養(yǎng)殖，保障畜禽產(chǎn)品安全，是我國畜牧業(yè)實現(xiàn)現(xiàn)代化的必然趨勢。

黃芩解毒散是由黃芩、黃連、白頭翁、地錦草、馬齒莧、鐵莧菜、女貞子、金櫻子、玄參、地榆、老鸛草11 味中藥復(fù)方提取而成，含有黃芩苷、黃連素、白頭翁素等活性成分，可以抑制菌體蛋白質(zhì)和核酸的合成，對大腸桿菌和沙門氏菌都有較好的抑制作用，能促進有益菌的生長，從而全面調(diào)理腸道，整體提升腸道健康。目前，對黃芩解毒散的研究主要在仔豬的生產(chǎn)性能和腹瀉病防治[1-2]，而對鴨的生產(chǎn)性能和腸道健康的研究則鮮見報道。筆者在飼糧中添加一定濃度的黃芩解毒散，通過測定番鴨平均體重、平均日增重、料重比、成活率以及番鴨腸道菌群、小腸絨毛高度、隱窩深度、V/C值等，旨在為其在家禽生產(chǎn)中的應(yīng)用提供試驗數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1主要藥物和試劑黃芩解毒散，購自無錫正大畜禽有限公司，主要由黃芩、黃連、白頭翁、地錦草、地榆、鐵莧菜、老鸛草、玄參、女貞子和金櫻子11味中藥組成，其中黃芩苷≥3%、槲皮素≥0.01%。20%硫酸新霉素可溶性粉，購自無錫正大畜禽有限公司。

1.2試驗動物及飼養(yǎng)管理方法1日齡番鴨1 500只，由江蘇省泰州市海陵區(qū)成香家禽養(yǎng)殖場提供，隨機分成5組，每組設(shè)5個重復(fù)，每個重復(fù)60只，公母各半，各處理組之間體重差異不顯著(P>0.05)。Ⅰ組為對照組，僅飼喂基礎(chǔ)日糧；Ⅱ組，在基礎(chǔ)日糧中添加0.05%硫酸新霉素可溶性粉；Ⅲ組，在基礎(chǔ)日糧中添加0.02%黃芩解毒散；Ⅳ組，在基礎(chǔ)日糧中添加0.03%黃芩解毒散；Ⅴ組，在基礎(chǔ)日糧中添加0.04%黃芩解毒散。試驗番鴨網(wǎng)上平養(yǎng),全程自由采食、充足飲水,按照以下免疫程序進行免疫接種：1日齡，口服鴨病毒性肝炎活疫苗1羽份；7日齡，每只肌肉注射鴨傳染性漿膜滅活苗0.5 mL；14日齡，每只皮下或肌肉注射重組禽流感(H5、H7)滅活苗0.3 mL；21日齡，皮下或肌肉注射鴨瘟疫苗1羽份。預(yù)飼期7 d，正試期42 d。各階段番鴨基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平分別見表1～2。

1.3樣品采集與指標(biāo)測定

1.3.1生長性能的測定。試驗鴨空腹12 h，以重復(fù)為單位分別在試驗第14、28和42天，每個重復(fù)分別隨機選取番鴨10只，稱重并記錄給料量和剩料量，用于計算平均體重、平均日采食量、平均日增重和料重比；試驗結(jié)束后記錄鴨只死亡數(shù)，用于計算成活率。

1.3.2十二指腸、空腸和回腸形態(tài)的測定。以重復(fù)為單位分別在試驗結(jié)束時(第42天)，番鴨稱重后，頸部放血致死，打開腹腔，在相同位置分別取長度約1 cm的十二指腸、空腸和回腸，用生理鹽水沖洗腸道中的內(nèi)容物后，用10%福爾馬林固定液固定24 h，固定樣本經(jīng)洗滌、脫水、透明、浸臘、包埋、修塊等處理后，切成7 μm 厚的蠟片，再進行H-E染色、中性樹膠封片等，在光學(xué)顯微鏡上觀察組織形態(tài)學(xué)變化，測定其十二指腸、空腸和回腸的絨毛高度(VH)和隱窩深度(CD)值，并計算絨毛高度與隱窩深度的比值(V/C)。絨毛高度為腸腺開口至絨毛頂端的垂直高度；隱窩深度為絨毛根部上皮的凹陷處到固有層的距離。

表1 各階段番鴨基礎(chǔ)日糧的組成

注:預(yù)混料可為1 kg全價料提供維生素 A 11 000 IU、維生素 D34 000 IU、維生素 E 45 IU、維生素 K34.0 mg、維生素 B12.0 mg、核黃素 6.0 mg、泛酸 20.0 mg、煙酸50.0 mg、葉酸 1.0 mg、生物素 0.2 mg、維生素 B1220 μg、膽堿500.0 mg、銅 10.0 mg、鐵 80.0 mg、鋅 80.0 mg、錳 100.0 mg、碘 0.5 mg、硒 0.3 mg、鈷 0.4 mg

Note:The premix could provide for complete feed per kilogram: vitamin A 11 000 IU, vitamin D34 000 IU, Vitamin E 45 IU, vitamin K34.0 mg, Vitamin B12.0 mg, riboflavin 6.0 mg, pantothenic acid 20.0 mg, niacin 50.0 mg, folic acid 1.0 mg, biotin 0.2 mg , vitamin B1220 μg, choline 500.0 mg, copper 10.0 mg, iron 80.0 mg, zinc 80.0 mg, manganese 100.0 mg, iodine 0.5 mg, selenium 0.3 mg, cobalt 0.4 mg

表2 各階段番鴨基礎(chǔ)日糧的營養(yǎng)水平

1.3.3盲腸大腸桿菌、沙門氏菌和乳酸菌的培養(yǎng)計數(shù)。上述試驗解剖的番鴨，每只取新鮮盲腸內(nèi)容物1 g，用0.85%氯化鈉溶液99 mL稀釋并混合均勻，然后按照10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7等倍數(shù)進行梯度稀釋。然后吸取10-3、10-4、10-53個濃度各100 μL置于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基中進行細(xì)菌培養(yǎng)，每個稀釋度劃3個重復(fù)板，在37 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)恒溫培養(yǎng)18 h，在麥康凱培養(yǎng)基中大腸桿菌菌落呈鮮桃紅色，圓形、扁平，邊緣整齊，表面光滑、濕潤；沙門氏菌的菌落呈無色至淺橙色、透明或半透明；再吸取10-5、10-6、10-7共3個濃度各100 μL，置于MRS培養(yǎng)基中進行細(xì)菌培養(yǎng)，在37 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)恒溫培養(yǎng)48 h，在MRS培養(yǎng)基中平皿底為黃色，乳酸桿菌為淡藍(lán)色或白色、中等大小、凸起、濕潤、邊緣整齊，菌落呈圓形，直徑為(3.0±1.0) mm。統(tǒng)計平板菌落個數(shù)，結(jié)果以腸道內(nèi)容物中細(xì)菌數(shù)量(CFU/g)的對數(shù)值表示。

1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析試驗數(shù)據(jù)用Excel軟件進行初步處理，應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析，采用Duncan氏法進行多重比較，結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1黃芩解毒散對番鴨生長性能的影響由表3可知,試驗組番鴨預(yù)飼7 d后，8日齡平均體重沒有顯著差異(P>0.05)；21日齡,試驗組番鴨平均體重均高于對照組，且Ⅳ和Ⅴ組21日齡平均體重與 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組相比差異顯著(P<0.05)；35日齡，Ⅳ和Ⅴ組番鴨平均體重與 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組一比差異極顯著(P<0.01)；49日齡，Ⅳ和Ⅴ組番鴨平均體重極顯著高于Ⅰ、Ⅱ 和Ⅲ組(P<0.01),Ⅱ和Ⅲ組番鴨平均體重也極顯著高于 Ⅰ 組(P<0.01)；4個試驗組番鴨平均日增重均顯著高于對照組(P<0.05)，4個試驗組之間差異不顯著(P>0.05)；4個試驗組平均日采食量與對照組差異不顯著(P>0.05)；Ⅳ和Ⅴ組料重比均顯著低于 Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組(P<0.05)；Ⅳ和Ⅴ組番鴨成活率均顯著高于 Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組(P<0.05)，Ⅱ和Ⅲ組番鴨成活率也顯著高于 Ⅰ 組(P<0.05)。

2.2黃芩解毒散對番鴨十二指腸、空腸和回腸腸道形態(tài)的影響由表4可知,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組十二指腸絨毛高度極顯著高于Ⅰ和Ⅱ組(P<0.01)，而Ⅳ和Ⅴ組絨毛高度也顯著高于Ⅲ組(P<0.05)；Ⅳ和Ⅴ組十二指腸隱窩深度顯著小于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組(P<0.05)；Ⅳ和Ⅴ組V/C值極顯著高于Ⅲ組(P<0.01)，Ⅲ組V/C值也極顯著高于Ⅰ和Ⅱ 組(P<0.01)。

表3 黃芩解毒散對番鴨生長性能的影響

注：同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，同列不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)

Note:Different small letters in the same column indicated significant difference(P<0.05);different capital letters in the same column indicated extremely significant difference(P<0.01)

表4黃芩解毒散對番鴨十二指腸腸道形態(tài)的影響

Table4TheeffectsofScutellariadetoxificationpowderontheduodenummorphologyofmuscovyducks

組別Group絨毛高度Villus heightμm隱窩深度Crypt depthμmV/C值V/C valueⅠ985.45±19.62 cB121.85±2.15 a8.09±0.22 CⅡ983.11±22.56 cB122.73±3.06 a8.01±0.28 CⅢ1 017.26±25.23 bA116.59±1.88 a8.72±0.36 BⅣ1 029.41±20.78 aA109.45±2.77 b9.40±0.45 AⅤ1 035.01±24.48 aA108.16±3.36 b9.57±0.19 A

注：同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，同列不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)

Note:Different small letters in the same column indicated significant difference(P<0.05);different capital letters in the same column indicated extremely significant difference(P<0.01)

從表5可以看出,Ⅳ和Ⅴ組空腸絨毛高度極顯著高于 Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組 (P<0.01)，而Ⅲ組空腸絨毛高度也顯著高于 Ⅰ和Ⅱ 組 (P<0.01)，Ⅰ和Ⅱ 組間差異不顯著(P>0.05)；Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組空腸隱窩深度小于Ⅰ和Ⅱ 組，但差異不顯著(P>0.05)；Ⅳ和Ⅴ組V/C值極顯著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組 (P<0.01)，Ⅲ組V/C值也極顯著高于Ⅰ和Ⅱ 組 (P<0.01)。

表5黃芩解毒散對番鴨空腸腸道形態(tài)的影響

Table5TheeffectsofScutellariadetoxificationpowderonthejejunummorphologyofmuscovyducks

組別Group絨毛高度Villus heightμm隱窩深度Crypt depthμmV/C值V/C valueⅠ753.46±17.43 C103.45±2.637.28±0.38 CⅡ742.76±19.85 C103.68±3.127.16±0.57 CⅢ862.08±20.26 B101.67±1.358.48±0.23 BⅣ897.68±26.12 A98.28±2.559.13±0.32 AⅤ905.10±23.25 A97.89±3.239.25±0.26 A

注：同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，同列不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)

Note:Different small letters in the same column indicated significant difference(P<0.05);different capital letters in the same column indicated extremely significant difference(P<0.01)

由表6可知,Ⅳ和Ⅴ組回腸絨毛高度極顯著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組(P<0.01)，而Ⅲ組回腸絨毛高度也顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組(P<0.05)；Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組回腸隱窩深度小于Ⅰ組和Ⅱ組，但差異不顯著(P>0.05)；Ⅳ和Ⅴ組V/C值顯著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組(P<0.05)，而Ⅲ組V/C值也顯著高于Ⅰ和Ⅱ 組 (P<0.05)。

表6黃芩解毒散對番鴨回腸腸道形態(tài)的影響

Table6TheeffectsofScutellariadetoxificationpowderontheileummorphologyofmuscovyducks

組別Group絨毛高度Villus heightμm隱窩深度Crypt depthμmV/C值V/C valueⅠ504.30±15.62 cB94.24±2.155.35±0.21 bⅡ508.23±20.72 cB94.73±4.235.37±0.34 bⅢ525.24±16.54 bB92.56±3.655.67±0.56 bⅣ543.99±17.58 aA91.31±4.125.96±0.75 aⅤ548.82±26.67 aA89.75±3.286.11±0.62 a

注：同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，同列不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)

Note:Different small letters in the same column indicated significant difference(P<0.05);different capital letters in the same column indicated extremely significant difference(P<0.01)

2.3黃芩解毒散對番鴨盲腸有害菌數(shù)量的影響由表7可知，49日齡, 4個試驗組大腸桿菌數(shù)量均極顯著低于對照組(P<0.01)，且Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ組大腸桿菌數(shù)量均顯著低于Ⅲ組(P<0.05)；Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ組沙門氏菌數(shù)量均極顯著低于Ⅰ、Ⅲ組(P<0.01)，Ⅲ組沙門氏菌數(shù)量顯著低于Ⅰ組(P<0.05)；Ⅳ和Ⅴ組乳酸菌數(shù)量極顯著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組 (P<0.01)，且Ⅲ組乳酸菌數(shù)量也顯著高于Ⅰ和 Ⅱ 組 (P<0.05)，而 Ⅰ 和 Ⅱ 組差異不顯著(P>0.05)。

表7黃芩解毒散對番鴨盲腸微生物菌群的影響

Table7TheeffectsofScutellariadetoxificationpowderonthececumfloraofmuscovyducks

組別Group大腸桿菌E. coli 沙門氏菌Salmonella sp.乳酸菌Lactobacilli sp.Ⅰ7.32±0.27 aA7.65±0.48 aA7.65±0.19 cBⅡ6.15±0.26 cB6.26±0.34 bB7.89±0.32 cBⅢ6.65±0.18 bB7.13±0.25 bA8.37±0.41 bBⅣ6.28±0.19 cB6.44±0.29 bB9.15±0.37 aAⅤ6.17±0.32 cB6.32±0.16 bB9.36±0.45 aA

注：同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，同列不同大寫字母表示差異顯著(P<0.01)

Note:Different small letters in the same column indicated significant difference(P<0.05);different capital letters in the same column indicated extremely significant difference(P<0.01)

3 討論與結(jié)論

3.1中草藥制劑對家禽生產(chǎn)性能的影響中草藥含有的生理活性物質(zhì)能夠有效抑菌，有的甚至能促進營養(yǎng)物質(zhì)在動物體內(nèi)的消化與吸收，提高飼料的利用率，加速畜禽的生長發(fā)育，提高生產(chǎn)性能等。張橋等[3]將黃芪、肉桂、山楂等中草藥添加到基礎(chǔ)日糧中，試驗組艾維茵肉仔雞的日增重和育成率較對照組分別提高 15.75%和12.04%(P<0.05)，料重比下降 9.57%(P<0.05)；于輝等[4]在 0～49 日齡仙湖肉鴨的基礎(chǔ)日糧中添加白術(shù)、當(dāng)歸等組成的中草藥添加劑，研究發(fā)現(xiàn)仙湖肉鴨的飼料轉(zhuǎn)化率提高了3.8%；賀永康[5]在肉雞基礎(chǔ)日糧中添加一定比例的中草藥添加劑，結(jié)果發(fā)現(xiàn)1.0%和 1.5%的添加組在 22～42 d取得了較好的 ADG 和 F/G，與對照組相比 ADG分別提高了7.67%(P<0.05)和 13.55%(P<0.05)，F(xiàn)/G 降低了 8.48%(P<0.05)和15.25%(P<0.05)。姜賀等[6]將一定比例的黃芪粉、刺五加粉、松針粉添加到基礎(chǔ)日糧中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)各試驗組平均日增重均高于對照組，其中試驗Ⅱ組比對照組提高了16.03%，差異顯著(P<0.05)；試驗Ⅳ組平均采食量比對照組提高了10.44%，各試驗組料重比均低于對照組，且隨著中草藥添加量的增多呈下降趨勢。高艷敏等[7]在桂香雞的基礎(chǔ)日糧中添加黃芪、神曲、山楂等中草藥制劑，結(jié)果發(fā)現(xiàn)1.0%中草藥組對桂香雞的增重和飼料增重比的作用比較明顯，與空白組相比差異極顯著(P<0.01)，1.5%中草藥組與空白組的料重比差異顯著(P<0.05)，各組間平均日采食量差異不顯著(P>0.05)。該研究在雛番鴨基礎(chǔ)日糧中添加一定比例的黃芩解毒散，結(jié)果發(fā)現(xiàn)0.3%中藥添加組(Ⅳ組)和0.4%中藥添加組(Ⅴ組)番鴨平均體重、平均日增重和成活率均顯著或極顯著高于對照組(Ⅰ 組)，料重比顯著低于對照組(P<0.05)，成活率均顯著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組(P<0.05)。

3.2中草藥制劑對家禽腸道健康的影響小腸的正常結(jié)構(gòu)尤其是絨毛高度、隱窩深度以及V/C值等是評價小腸消化吸收功能的重要指標(biāo)。腸絨毛高度越大，小腸吸收面積就越大；隱窩越淺，消化吸收能力就越強；腸絨毛高度/隱窩越深比值越大，消化吸收功能就越高。王強等[8]在高郵鴨的基礎(chǔ)日糧中添加丹參、玄參、杜仲、石斛等中草藥飼料添加劑，結(jié)果表明0.12%添加組對絨毛高度的影響比對照組高，0.12%和0.14%添加組V/C值高于對照組。賀永康[5]在肉雞基礎(chǔ)日糧中添加一定比例的中草藥添加劑，結(jié)果發(fā)現(xiàn)1.0%和 1.5%的添加組21和 42 d 十二指腸和空腸的絨毛高度以及 V/C值顯著提高；1.5%添加組 42 d 十二指腸和空腸的隱窩深度顯著降低；42 d 1.5%添加組十二指腸腸絨毛上皮結(jié)構(gòu)完整，層次清晰，腸黏膜上皮的微絨毛紋狀緣排列緊密，大小均勻、結(jié)構(gòu)清晰。該試驗在雛番鴨的基礎(chǔ)日糧中添加一定比例的黃芩解毒散，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其能很好地增長十二指腸、空腸、回腸的絨毛高度，縮短隱窩深度，提高V/C值，增強了番鴨的消化和吸收能力。

家禽腸道內(nèi)有多種菌群，主要有大腸桿菌、沙門氏菌、乳酸桿菌和雙歧桿菌等，菌群平衡與家禽腹瀉有著密切的關(guān)系。于輝等[9]在仙湖肉鴨日糧中添加一定比例的中草藥飼料添加劑,結(jié)果發(fā)現(xiàn)中草藥添加組均能顯著降低腸道內(nèi)大腸桿菌菌群的數(shù)量,提高乳酸菌菌群的數(shù)量, 尤其是以白術(shù)、柴胡、當(dāng)歸、大蒜、紅辣椒、丹參、生姜等組成的中草藥飼料添加劑Ⅰ效果最為明顯。張利娟等[10]在蛋雞日糧中添加黃芪多糖和小檗堿復(fù)合制劑，結(jié)果發(fā)現(xiàn)各處理組盲腸大腸桿菌數(shù)量顯著或極顯著低于對照組，而乳酸桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量顯著高于對照組，表明中草藥能有效改善腸道微生態(tài)區(qū)系的平衡提高機體的消化力。該研究結(jié)果表明，黃芩解毒散0.03%和0.04%添加組能顯著降低盲腸中大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量，極顯著增加乳酸菌數(shù)量，有利于調(diào)節(jié)腸道菌群健康。

綜上所述，建議在基礎(chǔ)日糧中添加0.03%或0.04%的黃芩解毒散，能很好地促進家禽的生長和生產(chǎn)性能，維護腸道健康。