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        黑果腺肋花楸對小鼠肝腎抗氧化性的初步研究

        2018-11-01 09:19:40李美蘭黃金珠李紅梅姜成哲
        畜牧與飼料科學 2018年10期
        關(guān)鍵詞:小鼠

        李美蘭,黃金珠,李紅梅,姜成哲

        (延邊大學農(nóng)學院,吉林 延吉 133002)

        黑果腺肋花楸 (Aronia melanocarpa)屬薔薇科,腺肋花楸屬灌木,是無公害果樹作物[1],高可達 3 m,花白色,果實為漿果、黑紫色、無核、直徑10~12 mm,于每年7月底至8月中旬成熟。黑果腺肋花楸屬粗放型管理樹種,具有一些獨特的生物學特性,如耐寒、耐旱、耐澇,對病蟲害、土質(zhì)、氣候都有較強的適應性,適合在平原、荒山大量種植,且對其進行適當?shù)墓芾?,可以實現(xiàn)無農(nóng)藥種植。此外,黑果腺肋花楸樹高在2 m左右,因此,栽培管理及采摘作業(yè)可以節(jié)省很多的人力、物力。研究表明,黑果腺肋花楸中含有豐富的花青素、黃酮、多酚類等有效的抗氧化元素[2],能夠通過血腦屏障,直接保護大腦和神經(jīng)系統(tǒng),具有抗氧化、抗炎、降血糖、防治心血管疾病、抗腫瘤等多種藥理作用,是一種非常有價值的有待于開發(fā)的抗氧化產(chǎn)品的原料,受到國內(nèi)外醫(yī)藥和食品界的廣泛重視[3-5]。

        肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的腺體和最重要的代謝和生物轉(zhuǎn)化器官,具有很強的新陳代謝能力,并能產(chǎn)生大量的自由基。腎臟也是機體的重要器官,具有生成尿液、清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物的功能。肝腎細胞內(nèi)的抗氧化防御系統(tǒng)主要由抗氧化酶以及一些非酶抗氧化劑組成,其中,超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶是機體的主要抗氧化酶,可以維持機體的自由基平衡[6-8]。該試驗利用比色法測定肝腎組織中的超氧化物歧化酶 (SOD)活性、丙二醛(MDA)的含量及谷胱甘肽(GSH)的相對含量,研究黑果腺肋花楸的抗氧化性,旨在為開發(fā)黑果腺肋花楸功能提供參考。

        1 材料與方法

        1.1 試驗材料

        昆明小鼠16只,由延邊大學農(nóng)學院提供;黑果腺肋花楸果購自吉林延吉,將黑果腺肋花楸果實利用噴霧干燥法制作成黑果腺肋花楸果粉,并用蒸餾水溶解后配制成3%的黑果腺肋花楸溶液。

        表1 小鼠的平均周增重 g

        表2 黑果腺肋花楸溶液對小鼠各器官臟器系數(shù)的影響 %

        1.2 試驗試劑

        濃硫酸、TBA(硫代巴比妥酸)、冰醋酸、磷酸緩沖液、SDS(十二烷基磺酸鈉)、考馬斯亮藍、聯(lián)苯三酚等,均為國產(chǎn)分析純。

        1.3 試驗儀器

        分光光度計(型號:722S,上海精密科學儀器有限公司);電子天平(型號:FA1004A,上海精天電子儀器有限公司);電熱恒溫水槽 (型號:DK-8D,上海精宏實驗設(shè)備有限公司);臺式高速冷凍離心機(型號:CT15RT,中國天美科學儀器有限公司);超純水系統(tǒng)(美國MILLIPORE公司)。

        1.4 試驗方法

        1.4.1實驗動物與試驗設(shè)計:取16只平均日齡在(197±18)d的小鼠,按體重隨機分成 2組,包括 1個對照組和1個試驗組,每組有雌鼠4只、雄鼠4只,其中,對照組給予蒸餾水,試驗組給予濃度為3%的黑果腺肋花楸溶液,連續(xù)8周。試驗過程中,所有小鼠均自由采食、采光,每天觀察飲水、進食量、外觀、體征以及行為活動,每周對試驗小鼠進行稱重。試驗結(jié)束后,剖檢取臟器稱重(-20℃保存),肉眼觀察動物臟器變化,計算臟器系數(shù)。

        1.4.2SOD活性、MDA含量及GSH相對含量測定:分別取試驗小鼠肝臟和腎臟100 mg,加入1 mL生理鹽水勻漿,3 000 r/min離心10 min,取上清液,待測。其中,采用鄰苯三酚自氧化法測定SOD活性;硫代巴比妥酸法測定MDA活性;四氧嘧啶法測定GSH相對含量,其測定波長分別為342、592、532、305 nm。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 剖檢結(jié)果

        在試驗期間各組動物飲食及活動均正常,未發(fā)現(xiàn)小鼠死亡的現(xiàn)象。剖檢后,肉眼觀察對照組和試驗組的主要臟器變化,未見明顯的變化。

        2.2 平均周增重測定結(jié)果

        小鼠的平均周增重結(jié)果見表1。由表1可知,對照組及試驗組的小鼠之間差異不顯著。

        2.3 小鼠各臟器系數(shù)測定結(jié)果

        各臟器的臟器系數(shù)結(jié)果見表2。由表2可知,對照組與試驗組之間差異不顯著,雌鼠與雄鼠間差異也不顯著。

        2.4 SOD活性、MDA含量及GSH相對含量測定結(jié)果

        腎臟和肝臟組織中的SOD活性、MDA含量及GSH相對含量結(jié)果見圖1和圖2。由圖1可知,試驗組腎臟組織中MDA含量明顯低于對照組,腎臟組織中GSH相對含量高于對照組,肝臟組織中MDA含量及GSH相對含量無顯著差異。由圖2可知,試驗組肝臟的SOD活性高于對照組SOD活性,但差異不顯著。綜上表明,黑果腺肋花楸有一定增強機體抗氧化的能力。

        3 討論

        抗氧化酶是生物抗氧化系統(tǒng)的重要組成部分,通過酶反應直接去除多余的有害分子氧。其中,SOD活性的高低能間接地反映機體消除自由基能力的強弱。細胞膜富含不飽和脂肪酸,最易受到氧自由基的攻擊而發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應,其分解產(chǎn)物之一是MDA,因此,MDA的含量也能直接反映細胞膜被氧化的程度。

        圖1 肝臟和腎臟組織中MDA含量及GSH相對含量

        圖2 肝臟和腎臟組織中的SOD活性

        該試驗研究顯示,各組間小鼠體重變化、臟器系數(shù)無顯著差異,表明黑果腺肋花楸對小鼠體重、臟器功能均無影響。與對照組相比,腎臟組織中MDA含量降低,GSH相對含量增大,說明黑果腺肋花楸能夠加快消除自由基的含量,從而抑制腎臟內(nèi)過氧化脂質(zhì)的二級分解產(chǎn)物MDA的含量,使抗氧化酶能力增強,提高了抗氧化能力[9-10]。

        4 結(jié)論

        用3%的黑果腺肋花楸溶液飼喂小鼠8周,能夠提高小鼠肝腎的抗氧化能力。

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