朱海濤，呂進(jìn)泉，常明，王秋霞，盧紅艷

（江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院兒科，江蘇鎮(zhèn)江212001）

促紅細(xì)胞生成素（erythropoietin，EPO）是一種調(diào)節(jié)紅細(xì)胞生成的糖蛋白，對(duì)發(fā)育期腦損傷有神經(jīng)保護(hù)作用。多種因素導(dǎo)致的胎兒宮內(nèi)慢性缺氧均會(huì)引起EPO升高［1-2］。圍產(chǎn)兒腦損傷大部分發(fā)生在產(chǎn)前，由產(chǎn)時(shí)缺氧所致占7%～15%［3］。因此，推測(cè)臍血及羊水EPO含量可能是早期評(píng)估早產(chǎn)兒腦損傷風(fēng)險(xiǎn)的敏感指標(biāo)。本研究通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)早產(chǎn)兒羊水及臍血EPO含量，探討羊水及臍血EPO含量與腦損傷的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以2014年2月至2016年6月在江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院產(chǎn)科分娩的胎齡＜34周單胎早產(chǎn)兒為研究對(duì)象。排除以下病例：① 母親患甲狀腺疾??；② 患兒合并有神經(jīng)系統(tǒng)畸形或其他系統(tǒng)嚴(yán)重畸形、嚴(yán)重感染、紅細(xì)胞增多癥、先天性心臟病、遺傳代謝性疾病。本研究事先已通過(guò)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)并取得早產(chǎn)兒家長(zhǎng)書(shū)面知情同意。

1.2 標(biāo)本收集與EPO檢測(cè)

在胎兒娩出時(shí)抽取羊水3 mL，娩出后抽取臍靜脈血3 mL，室溫靜置10 min后離心10 min（3 000 r／min），取上清液于 -80℃保存。采用ELISA檢測(cè)臍血及羊水中的EPO濃度，試劑盒由美國(guó)RayBiotech公司提供，實(shí)驗(yàn)操作流程嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 顱腦超聲或MRI檢查評(píng)估早產(chǎn)兒腦損傷

首次顱腦超聲檢查于早產(chǎn)兒生后3 d內(nèi)進(jìn)行，以后每周復(fù)查1次。懷疑有顱內(nèi)病變但頭顱超聲未見(jiàn)明顯異常的早產(chǎn)兒，依據(jù)病情擇期行顱腦MRI檢查。有以下任何一種影像學(xué)表現(xiàn)的早產(chǎn)兒均納入早產(chǎn)兒腦損傷組［4］：① 顱內(nèi)出血：包括腦室周?chē)?腦室內(nèi)出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血、小腦出血等；② 腦室周?chē)踪|(zhì)軟化；③其他如腦梗死等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)量資料以例數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，應(yīng)用受試者工作特征（ROC）曲線(xiàn)選定最佳閾值，并計(jì)算閾值的敏感性及特異性。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況

共97例早產(chǎn)兒符合入選條件，根據(jù)顱腦影像學(xué)結(jié)果，腦損傷組37例，無(wú)腦損傷（對(duì)照組）60例。腦損傷組中顱內(nèi)出血占多數(shù)，有22例，腦室周?chē)踪|(zhì)軟化10例，同時(shí)合并顱內(nèi)出血及腦白質(zhì)損傷早產(chǎn)兒4例，腦梗死1例。兩組早產(chǎn)兒在胎齡、出生體質(zhì)量及性別間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 兩組早產(chǎn)兒羊水及臍血EPO含量比較

腦損傷組早產(chǎn)兒羊水及臍血EPO含量均顯著高于對(duì)照組（均P＜0.05），兩組臍血EPO濃度均明顯高于同組羊水EPO濃度（均P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表1 兩組早產(chǎn)兒一般資料比較

表2 兩組早產(chǎn)兒EPO含量比較mIU／mL±s

表2 兩組早產(chǎn)兒EPO含量比較mIU／mL±s

組別 n 臍血 羊水 t值 P值腦損傷組37 21.59±14.50 12.52±7.92 3.33 0.000對(duì)照組 60 8.17±4.63 6.13±1.56 3.23 0.000 t值0.000 0.000 6.658 6.087 P值

2.3 早產(chǎn)兒臍血及羊水EPO對(duì)腦損傷的預(yù)測(cè)價(jià)值

ROC曲線(xiàn)分析顯示，臍血EPO預(yù)測(cè)早產(chǎn)兒腦損傷的敏感性最高，聯(lián)合臍血和羊水EPO預(yù)測(cè)腦損傷的特異性高于單獨(dú)檢測(cè)兩類(lèi)標(biāo)本。見(jiàn)表3、圖1。

表3 檢測(cè)臍血和羊水促紅細(xì)胞生成素預(yù)測(cè)早產(chǎn)兒腦損傷的價(jià)值

3 討論

目前我國(guó)早產(chǎn)兒出生率約為8.1%［5］。腦損傷仍是導(dǎo)致早產(chǎn)兒致殘和死亡的重要原因。大約10%的早產(chǎn)兒會(huì)出現(xiàn)腦性癱瘓，25%～50%的早產(chǎn)兒可能會(huì)出現(xiàn)行為、感覺(jué)與認(rèn)知等方面發(fā)育障礙［6］。腦損傷持續(xù)的時(shí)間和嚴(yán)重程度等因素決定了腦損傷范圍及區(qū)域［7］，因此，早期診斷腦損傷并及時(shí)進(jìn)行干預(yù)，可改善腦損傷早產(chǎn)兒的預(yù)后。

EPO主要來(lái)源于腎臟及胚胎肝臟，是一種含唾液酸的酸性糖蛋白，為內(nèi)源性細(xì)胞因子激素［6］。缺氧時(shí)，胎兒肝臟、胎盤(pán)以及腎臟均可產(chǎn)生EPO［8］，而宮內(nèi)缺氧缺血是導(dǎo)致圍產(chǎn)兒腦損傷的重要原因。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已顯示，缺氧狀態(tài)達(dá)到4 h以上才導(dǎo)致EPO的升高［9］，因此有理由相信EPO含量升高是由于EPO體內(nèi)合成增多，而不是胎兒體內(nèi)快速釋放儲(chǔ)存的EPO所致。母體內(nèi)的EPO不能通過(guò)胎盤(pán)［10-11］，因此，胎兒臍血EPO含量的升高可提示胎兒宮內(nèi)缺氧。研究發(fā)現(xiàn)［12］，內(nèi)源性血清EPO含量升高與早產(chǎn)兒腦損傷、運(yùn)動(dòng)發(fā)育指數(shù)和智力發(fā)育指數(shù)降低密切相關(guān)。腦損傷新生兒尿EPO含量明顯增高［13］。本研究結(jié)果顯示，早產(chǎn)兒腦損傷組臍血及羊水EPO含量顯著高于對(duì)照組，提示臍血及羊水EPO含量與早產(chǎn)兒腦損傷密切相關(guān)；ROC曲線(xiàn)分析顯示，臍血及羊水EPO對(duì)早產(chǎn)兒腦損傷均具有較高的預(yù)測(cè)價(jià)值，聯(lián)合檢測(cè)臍血及羊水EPO可提高診斷的特異性。研究發(fā)現(xiàn)［2，14-15］，EPO及其受體在腦組織中均呈低水平的表達(dá)，并在腦缺氧或腦損傷后表達(dá)增加，EPO及其受體在早產(chǎn)兒腦發(fā)育和腦損傷中發(fā)揮了重要的作用。本研究發(fā)現(xiàn)，兩組早產(chǎn)兒臍血EPO濃度均明顯高于同組羊水中的EPO濃度，這種差異可能與臍血、羊水EPO來(lái)源不同有關(guān)。臍血和羊水是與分娩后新生兒有關(guān)的最早體液標(biāo)本，且提取方便、無(wú)創(chuàng)，因此，聯(lián)合檢測(cè)臍血及羊水中的EPO含量，對(duì)評(píng)估早產(chǎn)兒腦損傷風(fēng)險(xiǎn)，尤其是判斷缺氧缺血性腦損傷具有重要指導(dǎo)作用，但由于本研究樣本量小，仍需進(jìn)一步研究來(lái)不斷完善。

圖1 臍血、羊水EPO預(yù)測(cè)早產(chǎn)兒腦損傷的ROC曲線(xiàn)

綜上所述，臍血EPO預(yù)測(cè)早產(chǎn)兒腦損傷的敏感性好，聯(lián)合臍血及羊水EPO預(yù)測(cè)腦損傷的特異性較高，提示臍血及羊水EPO對(duì)早產(chǎn)兒腦損傷的早期預(yù)測(cè)均具有一定價(jià)值。