杜淑嫻 王利英

B族鏈球菌(group B Streptococcus, GBS)是一種革蘭陽性鏈球菌, 亦稱無乳鏈球菌, 可定植于孕產婦腸道和陰道。根據(jù)不同地區(qū)的研究表明, 母體圍生期 GBS 定植是新生兒早發(fā)型GBS感染的主要危險因素。據(jù)統(tǒng)計, 攜帶 GBS 的孕婦有40%～70% 在生產過程感染新生兒, 其中1%～3%出現(xiàn)早期侵入性感染, 可導致出生后發(fā)生肺炎、腦膜炎、敗血癥等早發(fā)型感染［1,2］。美國疾病控制和預防中心(CDC)頒布《圍生期GBS篩查與預防指南》建議對所有孕晚期婦女進行GBS篩查對檢測陽性者采取預防措施, 由GBS感染引起的新生兒感染情況得到了有效控制［3,4］。在我國, 由于孕產婦人群常規(guī)篩查GBS并未完全普及, 而不同地區(qū)不同方法學的比較資料研究較少, 本研究對PCR法和顯色平板法檢測GBS的差異進行了研究, 為臨床選擇合適的孕晚期GBS篩查方法提供依據(jù)?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年5月1日～12月1日來本院就診的孕晚期婦女594例, 年齡18～42歲, 孕周35～40周。

1.2 試劑 GBS核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)購自泰普生物科學(中國)有限公司, GBS顯色平板購自鄭州安圖生物工程股份有限公司, 質譜檢測送第三方實驗室檢測。

1.3 標本采集 將無菌拭子插入孕婦陰道口1/3處旋轉一周, 采取分泌物, 一例孕婦同時取兩份樣本, 分別進行PCR法檢測和顯色平板法檢測。將取樣后的拭子做好標記后送至檢驗科細菌室進行培養(yǎng)鑒定。

1.4 檢驗方法 按照全國臨床檢驗操作規(guī)程中的臨床微生物學檢驗常規(guī)方法進行。將同一患者的兩份樣本, 分別按照廠家說明書要求進行PCR法檢測和顯色平板法檢測, 記錄檢測結果。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS23.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行處理。計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

594 例孕晚期孕婦樣本, PCR法和顯色平板法檢測結果一致的陽性共38例, 不一致的共15例, 經(jīng)質譜檢測確認, 其中9例確認為GBS, 另外6例分別為3例化膿性鏈球菌, 2例解沒食子酸鏈球菌, 1例溶血性葡萄球菌。此次研究594例樣本中確認GBS陽性47例, 陽性率7.9%。

PCR法檢測陽性43例, 陽性率為7.2%, 經(jīng)質譜確認, 其中5例與顯色平板法不一致, 3例為化膿性鏈球菌, 2例解沒食子酸鏈球菌；顯色平板法檢測陽性48例, 陽性率8.1%,其中10例與PCR法不一致, 經(jīng)質譜確9例為GBS, 1例為溶血性葡萄球菌。兩種方法的GBS檢測陽性率比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。顯色平板法靈敏度100.0%高于PCR法的80.9%, 差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；顯色平板法特異性99.8%與PCR法的99.1%比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。見表 1, 表 2。

表1 PCR法檢測結果與確認結果對比(n)

表2 顯色平板法檢測結果與確認結果對比(n)

3 討論

GBS是圍生期新生兒及孕產婦最常見的感染致病菌, 由于妊娠期GBS感染會導致母親和新生兒的感染, 嚴重威脅產婦和新生兒的生命, 因此采取積極有效的預防和治療措施對降低圍生期感染具有重要的意義［5-8］。靈敏度和特異性好的鑒定方法是對臨床降低感染率是最有效的幫助。因此, 本次研究對比了PCR法和顯色平板法檢測GBS的差異, 比較兩種方法的敏感度及陽性率。

目前的PCR法采取的技術原理是擴增GBS特異性的環(huán)磷酸腺甙(CAMP)因子的基因。PCR法檢測法靈敏度80.9%顯著低于顯色平板法的100.0%(P＜0.05), 可能是因為臨床存在某些缺乏CAMP因子的GBS［9-12］, 造成了PCR漏檢, 也可能是因為PCR法檢測樣本的檢測限低于培養(yǎng)法, 漏檢了菌量較少的樣本。PCR法特異性99.1%略低于顯色平板法的99.8%(P＞0.05)。PCR法檢出5例假陽性, 分別是化膿性鏈球菌和解沒食子酸鏈球菌, 可能是因為臨床除了GBS具有CAMP基因之外, 個別化膿性鏈球菌、解沒食子酸鏈球菌、海豚鏈球菌等也具有CAMP因子的基因。顯色平板法檢測1例假陽性, 為溶血性葡萄球菌, 但其顯色與GBS顯色不同,其顯色呈現(xiàn)正面較淺, 背面較深的特征, 補充觸酶試驗可以排除。

綜上所述, 顯色平板法檢測GBS具有更高的準確度和檢出率, 對臨床大面積篩查GBS非常有幫助, 可有效的提高GBS的篩查。