任勤 程尚 王瑞生 曹蘭 姬聰慧

（重慶市畜牧科學(xué)院蜂業(yè)研究所，榮昌 402460）

蜜蜂營養(yǎng)雜交是指把甲蜂種的幼蟲提供給乙蜂種飼喂后，由甲蜂種幼蟲發(fā)育而來的蜜蜂具有乙蜂種的遺傳特性[1]。Ruttner[2]早在1957年就對西方蜜蜂不同品種間進行了營養(yǎng)雜交實驗，結(jié)果顯示雜交后代在形態(tài)上不同程度的出現(xiàn)某種品種的特征[2]。Smaragdova[3]，Rinderer[4]等先后也進行了意大利蜜蜂不同品種間的營養(yǎng)雜交實驗，得出相同的結(jié)論。我國學(xué)者進行用意蜂王漿飼喂中蜂蜂王的營養(yǎng)雜交實驗，結(jié)果顯示，在中蜂子代個體上出現(xiàn)了意蜂的體色特征[5,6]，但都集中在形態(tài)方面，對蜂王初生重、繁殖能力、蜂群生產(chǎn)性能等很少涉及。近年來，蜜蜂科研工作者進行了這方面的大量研究，涉及面不斷擴大，主要集中在營養(yǎng)雜交對蜂王初生重[7]、蜂王生殖能力[7,8]、工蜂初生重[9]、蜂群抗病性能[10]等方面。

本實驗通過人工飼喂新鮮意蜂王漿給中蜂蜂王幼蟲，培育出營養(yǎng)雜交中蜂蜂王，并測定了營養(yǎng)雜交蜂王初生重、產(chǎn)卵力、子一代工蜂初生重以及子一代蜂群抗囊狀幼蟲病能力，并對實驗過程中的操作方法進行了探索和實踐。本研究結(jié)果可作為蜂王培育及育種過程中如何提高蜂王品質(zhì)及提升蜂群整體抗病能力的理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗蜂群

中華蜜蜂Apis cerana cerana（簡稱“中蜂”）30群，意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica（簡稱“意蜂”）5群，由重慶市南川區(qū)珙桐林養(yǎng)蜂專業(yè)合作社試驗蜂場提供，自然條件下現(xiàn)代活框飼養(yǎng)，管理水平一致，蜂子比及蜂群內(nèi)蜜粉量基本一致，健康無病，品種統(tǒng)一。

1.1.2 設(shè)備與儀器

育王框，蜂王產(chǎn)卵控制器，臺基棒，分析天平，注射器，鑷子，眼科剪，恒溫恒濕培養(yǎng)箱等。

1.2 方法

1.2.1 新鮮王漿獲取

將育王框置于事先組織好的意大利蜂群中，待蜂群清理干凈后，移入意大利蜜蜂小幼蟲，讓蜂群吐漿培育，用注射器吸取所需王漿即可。

1.2.2 營養(yǎng)雜交

將事先準備好的育王框置于意大利蜂群中讓蜂群清理12h后，移入意大利蜜蜂小幼蟲，待24h后將王臺中的小幼蟲用鑷子取出，移入中華蜜蜂小幼蟲，然后將育王框置于中華蜜蜂蜂群中繼續(xù)培育并定期人工飼喂意大利蜜蜂王漿。王臺封蓋后，將王臺移到恒溫恒濕培養(yǎng)箱中進行培育。

1.2.3 雜交王及后代初生重測定

蜂王出臺后馬上用電子天平稱其體重，然后將蜂王介紹到交尾群中讓其自然交尾，蜂王產(chǎn)卵后代即為雜交中蜂一代。蜂王產(chǎn)卵后，將蜂王置于蜂王產(chǎn)卵控制器中，并放1張空巢脾，讓蜂王產(chǎn)卵，幼蟲封蓋后，將封蓋子脾置于恒溫恒濕培養(yǎng)箱中人工培育，工蜂開始出房后測定其初生重。

1.2.4 雜交蜂王產(chǎn)卵力測定

產(chǎn)育力是蜂王產(chǎn)卵力和工蜂哺育力的總和，一般用有效產(chǎn)卵量來衡量。測定方法為：制作4.4×4.4cm的方格，一個方格大約有100個巢房（封蓋子），每11天測定一次封蓋子數(shù)量，重復(fù)3次，然后統(tǒng)計總封蓋子數(shù)。

1.2.5 雜交后代蜂群抗病力測定

分別對實驗組和對照組進行人為感染囊狀幼蟲病病毒，10天后進行抗病力測試。具體方法：將囊狀病病毒均勻拌入稀糖水中，飼喂給實驗組和對照組，每次飼喂量保持500ml，連續(xù)飼喂3天，10天后，對實驗組和對照組中的每群蜂隨機選取5個封蓋子區(qū)域（利用4.4×4.4cm方格測定，每方格100個封蓋子）測定發(fā)病封蓋子數(shù)，統(tǒng)計每群蜂單位面積內(nèi)封蓋子的發(fā)病率。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

使用Excel 2013版和SPSS 21.0進行數(shù)據(jù)整理及統(tǒng)計學(xué)分析，各實驗數(shù)據(jù)均采用獨立樣本T檢驗進行統(tǒng)計學(xué)分析。當P<0.05時，差異達到顯著水平；P<0.01時，差異達到極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 營養(yǎng)雜交最適條件及方法

2.1.1 冷凍王漿和新鮮王漿對王臺接受率的影響

冷凍王漿和新鮮王漿對王臺接受率的影響如表1所示，實驗組王臺接受率顯著高于對照組王臺接受率（P<0.01）。

表1 冷凍王漿和新鮮王漿對王臺接受率的影響

2.1.2 提框換移蟲時間控制

為了保持王臺內(nèi)部王漿充足、新鮮且不過量，在對不同時間王臺內(nèi)部王漿量進行觀察發(fā)現(xiàn)，在移蟲24h時王臺內(nèi)部王漿量適宜，而且保持新鮮。因此，在移蟲利用意大利蜜蜂飼喂24h后進行換移蟲操作。

2.1.3 注射器飼喂王漿時王臺高度控制

在人工進行飼喂時發(fā)現(xiàn)，王臺封蓋高低嚴重影響注射器插入飼喂，故在每次進行飼喂時用眼科剪將王臺減掉一圈，高度2～3mm，連續(xù)3天后讓王臺自然封蓋即可。

2.2 營養(yǎng)雜交對蜂王初生重影響

營養(yǎng)雜交對蜂王初生重的影響如表2所示，實驗組蜂王平均初生重顯著高于對照組蜂王初生重（P<0.01）。

表2 營養(yǎng)雜交對蜂王初生重的影響

2.3 營養(yǎng)雜交對蜂王產(chǎn)卵力影響

營養(yǎng)雜交對蜂王產(chǎn)卵力的影響如表3所示，實驗組蜂王有效產(chǎn)卵力顯著高于對照組蜂王有效產(chǎn)卵力（P<0.01）。

表3 營養(yǎng)雜交對蜂王產(chǎn)卵力的影響

2.4 營養(yǎng)雜交對子一代工蜂初生重影響

營養(yǎng)雜交對子一代初生重的影響如表4所示，實驗組工蜂平均初生重顯著高于對照組工蜂初生重（P<0.01）。

表4 營養(yǎng)雜交對子一代工蜂初生重的影響

2.5 營養(yǎng)雜交對蜂群抗病力影響

營養(yǎng)雜交對子代蜂群抗病力的影響如表5所示，實驗組蜂群發(fā)病率明顯低于對照組，實驗組蜂群發(fā)病程度顯著低于對照組蜂群發(fā)病程度（P<0.01）。

表5 營養(yǎng)雜交對子代蜂群抗病力的影響

3 討論

利用新鮮王漿培育蜂王王臺接受率明顯高于利用冷凍王漿培育蜂王的王臺接受率，這可能與蜂王漿在冷凍保存過程中形狀和營養(yǎng)成分發(fā)生改變有關(guān)。在整個實驗操作過程中發(fā)現(xiàn)，為保證王臺內(nèi)部王漿新鮮且充足的情況，在移蟲24h時進行換移蟲操作。王臺封蓋高低嚴重影響注射器插入飼喂，故在每次進行飼喂時用眼科剪將王臺減掉一圈，高度2～3mm，這樣既不影響王臺封蓋，而且還能提高飼喂效率和飼喂難度。對蜂王性能影響研究發(fā)現(xiàn)，營養(yǎng)雜交能顯著提高蜂王初生重和產(chǎn)卵能力，平均分別提高20mg和100粒左右。對子一代工蜂初生重影響研究發(fā)現(xiàn)，營養(yǎng)雜交能提高子一代初生重，平均增重10mg左右。對子一代蜂群抗囊狀幼蟲病研究發(fā)現(xiàn)，營養(yǎng)雜交能提高蜂群整體抗囊狀幼蟲病能力，在整體發(fā)病率和發(fā)病程度上有明顯降低。

本研究結(jié)果顯示，不管是個體還是群體，營養(yǎng)雜交在一定程度上都可以提高蜂群的整體性能，故在培育蜂王或者育種中都可以參考。