李樹(shù)發(fā) ，蔡艷飛 ，宋 杰 ，解瑋佳 ，熊燦坤

（1.國(guó)家觀(guān)賞園藝工程技術(shù)研究中心，云南昆明650205；2.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所，云南昆明650205；3.云南格桑花卉有限責(zé)任公司，云南香格里拉650000）

滇牡丹（Paeonia delavayi）為芍藥科（Paeoniaceae）芍藥屬（Paeonia）牡丹組（Sect.Moutan）植物[1]，是我國(guó)西南地區(qū)特有種及漸危種[2]，也是芍藥屬分布最南的一個(gè)牡丹類(lèi)群，在芍藥屬植物的起源、演化、地理分布研究方面有重要的學(xué)術(shù)價(jià)值[3-4]。作為芍藥屬植物中擁有黃色花基因的重要種質(zhì)之一，滇牡丹在雜交育種中具有重要的應(yīng)用價(jià)值[5]。滇牡丹天然群體的表型變異廣泛、多樣性豐富，遺傳多樣性水平較高，有些花色變異類(lèi)型觀(guān)賞性較強(qiáng)，可以直接開(kāi)發(fā)利用。但是，由于野生滇牡丹開(kāi)花與結(jié)實(shí)生長(zhǎng)周期長(zhǎng)、種子出苗率低以及種苗生長(zhǎng)慢、根莖扦插繁殖系數(shù)低、蟲(chóng)害嚴(yán)重等原因，導(dǎo)致該種資源馴化及產(chǎn)業(yè)化極為困難。

本試驗(yàn)以分布于滇中梁王山、滇西香格里拉的滇牡丹和山東的牡丹栽培品種烏金耀輝、映紅、卷葉為嫁接材料，以分布廣適應(yīng)性強(qiáng)的鳳丹牡丹為砧木，開(kāi)展滇牡丹的嫁接繁殖技術(shù)研究。采用覆膜處理，對(duì)同期嫁接繁殖的滇牡丹及牡丹品種烏金耀輝、映紅、卷葉的嫁接成活率、嫁接苗的生長(zhǎng)及開(kāi)花結(jié)實(shí)狀況進(jìn)行比較，旨在探索了解砧木與接穗的嫁接親和性和嫁接繁殖的有效性，為滇牡丹的引種馴化栽培和種苗產(chǎn)業(yè)化繁殖提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地設(shè)在云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所晉寧區(qū)大春河基地。該地位于云南省晉寧區(qū)寶峰街道辦境內(nèi)，海拔2 050 m，屬低緯度高原亞熱帶季風(fēng)氣候區(qū)，年平均氣候14.8℃，平均最高氣溫21.6℃，平均最低氣溫9.7℃，極端最高氣溫31.6℃，極端最低氣溫-6.2℃，平均無(wú)霜期達(dá)240 d，平均有霜期達(dá)120d；年平均年降水量900mm，雨季為5—10月，干季為11—4月，年均日照時(shí)數(shù)為2 291.2 h。土壤為紅沙壤土，貧瘠，pH值為5.3～6.5。

1.2 材料來(lái)源

滇牡丹選擇分布于滇中梁王山（海拔2 774 m，東經(jīng) 102°53′29.9″，北緯 24°45′22.8″）的野生居群和滇西香格里拉滑雪場(chǎng)（海拔 3 540 m，東經(jīng) 99°35′17″，北緯 27°56′45″）的多花色野生居群；砧木為 2012 年從山東菏澤引進(jìn)的鳳丹牡丹（Paeonia ostiiT.）和栽培牡丹品種烏金耀輝、映紅、卷葉，所有參試材料引種后均栽培于云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所大春河基地的陰棚內(nèi)。滇牡丹和栽培品種的接穗選用當(dāng)年生無(wú)病無(wú)蟲(chóng)、發(fā)育充實(shí)飽滿(mǎn)的枝梢頂芽；砧木選用根莖粗1.2～1.5 cm的植株。

1.3 方法

1.3.1 不同嫁接材料處理 試驗(yàn)于2014—2015年在云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所大春河花卉基地陰棚內(nèi)進(jìn)行，陰棚頂部及四周用50%的黑色光網(wǎng)覆蓋；利用在陰棚內(nèi)栽培1 a的鳳丹牡丹作砧木，砧木留樁高15 cm后剪切去頂，采用單芽枝接的方法進(jìn)行嫁接，2個(gè)居群、3個(gè)品種每處理均30株，各處理重復(fù)3次。

1.3.2 嫁接苗覆膜處理 按覆蓋塑料薄膜（A）和無(wú)覆蓋塑料薄膜（B）2組處理進(jìn)行嫁接苗養(yǎng)護(hù)；具體方法為：A組，將嫁接苗放置于用覆蓋塑料薄膜的小拱棚內(nèi)，保證棚內(nèi)濕度為70%～85%，當(dāng)嫁接芽萌發(fā)后逐漸揭去塑料薄膜覆蓋；B組，不用小拱棚覆蓋薄膜，濕度為自然環(huán)境濕度（嫁接試驗(yàn)的相對(duì)濕度為32%～45%）。

1.4 數(shù)據(jù)分析

調(diào)查統(tǒng)計(jì)2014—2015年覆蓋薄膜對(duì)嫁接愈傷組織形成時(shí)間、嫁接成活時(shí)間及成活率、嫁接苗株高、葉片數(shù)量及開(kāi)花植株比例的影響，數(shù)據(jù)用Excel和統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 16.0分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 覆蓋薄膜對(duì)不同牡丹品種嫁接成活時(shí)間的影響

從表1，2可以看出，覆蓋薄膜與否對(duì)不同牡丹品種嫁接成活日期有顯著影響。其中，覆蓋薄膜條件下的滇牡丹與栽培品種分別在嫁接后19，13 d形成愈傷組織；在嫁接苗萌芽和發(fā)枝日期上，滇牡丹的萌芽和發(fā)枝日期分別為次年的2月16日和3月2日，而栽培品種則為分別為2月12日和2月24日；滇牡丹從嫁接到成活歷經(jīng)160 d，栽培品種則為154 d，滇牡丹比栽培品種晚6 d。無(wú)覆蓋薄膜的條件下，滇牡丹與牡丹栽培品種嫁接后經(jīng)過(guò)19～27 d有愈傷組織形成，滇牡丹萌芽和發(fā)枝日期分別為次年的3月2—6日和3月10—12日，栽培品種則為分別為2月20日和3月2日，滇牡丹從嫁接到成活歷經(jīng)170～178 d，栽培品種則為160 d，滇牡丹比栽培品種晚10～18 d。滇牡丹與栽培品種相比其愈傷組織、萌發(fā)和發(fā)枝日期較晚。

無(wú)覆蓋薄膜組因受早春昆明自然氣溫較低、回升較慢、相對(duì)濕度較為干燥的影響，造成滇牡丹、牡丹栽培品種萌芽和發(fā)枝的日期較晚；而覆蓋薄膜組因具有保溫保濕的作用，當(dāng)早春氣溫回升，小拱棚內(nèi)的溫度升溫較快，即可滿(mǎn)足牡丹的萌芽生長(zhǎng)。因此，覆蓋薄膜組的滇牡丹、牡丹栽培品種的萌芽和發(fā)枝日期較早。

表1 覆蓋薄膜對(duì)滇牡丹及不同牡丹嫁接成活日期的影響 月-日

2.2 覆蓋薄膜對(duì)滇牡丹與不同品種嫁接成活率的影響

從圖1可以看出，覆蓋薄膜組和無(wú)覆蓋薄膜組對(duì)滇牡丹與不同品種嫁接成活率的影響不同。其中，覆蓋薄膜組的滇牡丹與不同品種嫁接成活率較高，嫁接成活率在67%～82%，滇牡丹的滑雪場(chǎng)居群和梁王山居群成活率分別為67%和72%；牡丹栽培品種卷葉、烏金耀輝、映紅成活率分別為76%，78%和82%。無(wú)覆蓋薄膜組滇牡丹與不同品種嫁接成活率較低，嫁接成活率在26%～53%，其中，滇牡丹滑雪場(chǎng)居群和梁王山居群成活率最低，分別為26%和32%；牡丹栽培品種卷葉、烏金耀輝、映紅成活率也較低，分別為38%，42%和53%。在試驗(yàn)調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，覆蓋薄膜組嫁接口愈傷組織到萌芽時(shí)一直保持良好的愈傷和完全愈合生長(zhǎng)，嫁接成活率較高；無(wú)覆蓋薄膜組嫁接口愈傷組織前期生長(zhǎng)良好，進(jìn)入11月份后，因溫度低、空氣干燥嫁接口愈傷組織停止生長(zhǎng)，砧木和接芽經(jīng)過(guò)冬春低溫、干燥季后其組織不同程度失水干縮，愈傷組織干離，甚至枯死，從而影響牡丹的萌芽、生長(zhǎng)及其成活率。

表2 覆蓋薄膜對(duì)滇牡丹及不同牡丹品種嫁接成活時(shí)間的影響 d

2.3 滇牡丹與品種嫁接苗的生長(zhǎng)發(fā)育

表3 滇牡丹與品種嫁接苗生長(zhǎng)及開(kāi)花結(jié)實(shí)性狀

從表3可以看出，滇牡丹與栽培品種嫁接苗平均株高及開(kāi)花比例差異較大。覆蓋薄膜組滇牡丹株高17.8～43.3 cm，開(kāi)花植株占嫁接苗的82.38%～86.5%，栽培品種株高44.80～52.45 cm，開(kāi)花植株占嫁接苗的38.15%～52.5%；滇牡丹與栽培品種嫁接苗葉片數(shù)量相近，滇牡丹的花徑、花型花色與原生地的相似，栽培品種的花色、花型與當(dāng)年母株上的相同，花徑稍小于母株上的花；滇牡丹植株開(kāi)花及結(jié)實(shí)良好，栽培品種開(kāi)花后在幼果期脫落。覆蓋薄膜組與無(wú)覆蓋薄膜組同種類(lèi)相比較，植株稍高，其余性狀稍有變化，但差異不明顯。

3 結(jié)論與討論

3.1 嫁接時(shí)期、環(huán)境及品種對(duì)不同牡丹嫁接成活的影響

滇牡丹嫁接成活與嫁接時(shí)期、溫度和濕度環(huán)境密切相關(guān)。接穗、接口保濕可以提高嫁接成活率[6]，滇牡丹與栽培牡丹品種都是落葉小灌木，每年僅春季萌芽生長(zhǎng)一次，在9—10月（秋季）落葉前地上部營(yíng)養(yǎng)逐步回流到莖部及地下根部，此階段地上部莖及其葉芽、花芽發(fā)育充實(shí)飽滿(mǎn)；而我國(guó)牡丹種苗繁殖生產(chǎn)區(qū)9月份的自然溫度為20～25℃，嫁接后采用埋土或套塑料袋保濕，滿(mǎn)足嫁接愈傷組織及后期的萌發(fā)和發(fā)枝條件。前人研究表明，9—10月是我國(guó)牡丹種苗嫁接繁殖適宜期[7-9]。本嫁接試驗(yàn)地點(diǎn)9—10月自然氣溫22～26℃，與我國(guó)牡丹種苗繁殖生產(chǎn)區(qū)氣溫相近，薄膜覆蓋組成活率明顯高于無(wú)薄膜覆蓋組，而滇牡丹不同居群和不同牡丹品種的成活率也不相同，研究結(jié)果與溫建榮[10]研究牡丹的嫁接技術(shù)及嫁接成活的影響因素、郭亞珍等[11]研究影響牡丹嫁接成活的因素和劉改秀等[12]對(duì)牡丹不同嫁接方法成活率試驗(yàn)分析的結(jié)果相同。

3.2 砧木對(duì)滇牡丹嫁接成活及其生長(zhǎng)的影響

鳳丹牡丹分布廣、適應(yīng)性強(qiáng)、根系發(fā)達(dá)。本試驗(yàn)表明，牡丹品種及滇牡丹嫁接成活率較高。滇牡丹滑雪場(chǎng)居群、梁王山居群與牡丹栽培品種卷葉、烏金耀輝、映紅成活率，低于楊榮等[8]嫁接牡丹品種洛陽(yáng)紅、花王、朱砂等成活率（90%以上），低于劉改秀等[12]對(duì)牡丹采用不同方法根接成活率（87.7%）；并低于劉紅凡等[9]對(duì)國(guó)內(nèi)外牡丹早開(kāi)品種組、中開(kāi)品種組、晚開(kāi)品種組中的花王、海黃、貴妃插翠等11個(gè)品種嫁接成活率（83%～92%），栽培品種的成活率與早開(kāi)品種組、中開(kāi)品種組、晚開(kāi)品種組中的火煉金丹、香玉、白王獅子等13個(gè)品種嫁接成活率（75%～82%）相同，但高于姚黃、海黃、金閣的嫁接成活率（70%左右），而滇牡丹嫁接成活率與之相近[10，13]；滇牡丹嫁接苗嫁接口愈合良好，植株生長(zhǎng)旺盛，并能在當(dāng)年的新梢上開(kāi)花結(jié)實(shí)，表明滇牡丹與鳳丹牡丹嫁接具有良好的親和性。滇牡丹可以利用鳳丹牡丹作砧木嫁接，并通過(guò)嫁接方法異地收集保存滇牡丹種質(zhì)資源和直接開(kāi)發(fā)利用。