王一桐，李虹，王建楠，解琦,2，賈冬雪，王鶴璇，羅志文,2*

(1.佳木斯大學生命科學學院，黑龍江 佳木斯 154007;2.佳木斯大學應用昆蟲研究所，黑龍江 佳木斯 154007)

林問荊(Eguisetumsylvalicum)為木賊科(Equisetaceae)問荊屬植物，是我國小興安嶺田間最常見的藥用植物[1]。問荊的莖葉提取物有清熱利尿，止血，平肝明目，止咳平喘的作用，在農業(yè)上還有殺蟲和抑菌的功效，利用林問荊的毒性可提取配制植物源殺蟲劑，推廣進行農業(yè)蔬菜害蟲的生物防治，還可對部分病害等有較強的抑菌作用。蔓烏頭(Aconitumvolubile)為毛茛科(Ranunculaceae)烏頭屬植物[2]，也是我國小興安嶺林區(qū)常見的野生有毒藥用植物。蔓烏頭的根提取物具祛風、散寒、止痛、止痙，主治風寒濕痹，關節(jié)疼痛和神經痛等功效，在農業(yè)上也有殺蟲作用，將林問荊的根提取制成植物源殺蟲劑，進行農業(yè)蔬菜害蟲的生物防治試驗，為北方蔬菜的無公害生產提供技術支持。

菜粉蝶(Pierisrapae)，幼蟲被稱為菜青蟲，屬鱗翅目(Lepidoptera)粉蝶科(Pieridae)菜粉蝶屬昆蟲[3]，廣泛分布于我國全省各地。菜粉蝶主要以十字花科植物為食，寄主還包括菊科、旋花科等植物上。十字花科的蔬菜以甘藍、芥藍、花椰菜等受害嚴重。菜粉蝶的成蟲為虹吸式器，不危害蔬菜，而其幼蟲主要危害蔬菜的葉片，危害時會使蔬菜的葉片破損，用農藥對菜粉蝶進行化學防治，會對人類的健康不利，還會產生嚴重的空氣污染[4-6]，而研發(fā)并推廣植物源殺蟲劑，可以無公害防治菜青蟲[7-10]，從而培養(yǎng)綠色有機蔬菜。

作者利用植物野外實習和當?shù)刂参镎{查的機會，選擇分布在小興安嶺的野生藥用植物林問荊、蔓烏頭作為供試材料，采用不同溶劑進行提取物篩選試驗，并運用提取物進行菜粉蝶的三齡幼蟲的殺蟲效果對比試驗，以期為當?shù)氐氖卟藷o公害生產提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試材料林問荊采自佳木斯市雙擁公園，蔓烏頭采自鶴崗市鶴北林業(yè)局曙光林場，經植物教研室程海濤副教授鑒定為林問荊(Eguisetumsylvalicum)和蔓烏頭(Aconitumvolubile)。菜粉蝶三齡幼蟲由佳木斯大學應用昆蟲研究所羅志文副教授鑒定為菜粉蝶(Pierisrapae)，供試菜粉蝶幼蟲采自佳木斯市向陽區(qū)和平大隊農田中。

1.2 方法

1.2.1 兩種植物提取液的制備。將采集到的林問荊、蔓烏頭分別經50℃鼓風干燥箱烘干，采用超細中藥粉碎機粉碎成粉末，過60目篩備用。分別稱取樣品50g，采用70%乙醇、50%丙酮和蒸餾水進行提取，提取溫度為室溫25℃，旋轉蒸發(fā)2次，每次4h，將濾液合并備用，用旋轉蒸發(fā)儀濃縮至50mL，得到植物提取液的母液，經孔徑為0.22μm的無菌濾器過濾除菌，置于4℃冰箱內冷藏備用。

1.2.2 兩種植物提取液的藥效試驗。將無菌培養(yǎng)皿在超凈工作臺內平均分為3組，每組18個，無菌試管分為9組，每組6支，并分別加入對應提取液。每組試管提取液的濃度分別為無菌水，10%，20%，30%，50%，100%不同方法提取的林問荊、蔓烏頭提取液。浸白菜葉片各50g，分別移入菜粉蝶三齡幼蟲各10頭，每個樣品處理重復2次，水為對照組，分別放入無菌培養(yǎng)皿中進行飼養(yǎng)試驗。經12h、24h、36h后觀察試驗結果，觀察幼蟲的生長情況，每日要觀察3～4次。

菜粉蝶對植物提取液的藥性測定。將材料培養(yǎng)12h、24h、36h后，以菜粉蝶不同時期幼蟲生長狀態(tài)，來測定提取液對菜粉蝶幼蟲殺蟲效果。對照組是以白菜地的菜粉蝶幼蟲作為對照組，觀察自然狀態(tài)下的菜粉蝶的發(fā)育形態(tài)和生活史情況，并與室內飼養(yǎng)進行對比。

2 結果與分析

2.1 不同溶劑提取物的殺蟲效果

由表1可以看，采用3種不同提取方法得到的林問荊提取液，對菜粉蝶三齡幼蟲有一定的殺蟲作用，由數(shù)據(jù)可以看出，提取液的殺蟲作用與提取液的濃度直接相關。由表2可以看，采用3種不同提取方法得到的蔓烏頭提取液，對菜粉蝶三齡幼蟲有較強的殺蟲作用，由數(shù)據(jù)可以看出，提取液的殺蟲作用與提取液的濃度也直接相關。采用不同提取方法獲得的提取物以70%乙醇提取物的抑菌作用最好，50%丙酮提取物效果次之，而沸水提取物抑菌效果最差。

2.2 同一提取方法的殺蟲效果對比

為了對比林問荊、蔓烏頭兩種植物的殺蟲效果，作者以70%的乙醇對林問荊莖葉、蔓烏頭荊根分別進行提取，并進行3次殺蟲試驗，取其平均值。結果說明，蔓烏頭根提取液的殺蟲作用最強，70%乙醇的蔓烏頭提取液的殺蟲效果最好，通過計算得出最低殺蟲濃度(MIC)為0.46g/mL。

2.3 菜粉蝶幼蟲不同齡期的殺蟲效果

表1 林問荊莖葉提取液的殺蟲效果對比

表2 蔓烏頭根提取液的殺蟲效果對比

表3 70%乙醇的林問荊、蔓烏頭提取液的殺蟲效果比較

通過試驗來對比70%乙醇的林問荊、蔓烏頭提取液30%濃度對菜粉蝶一齡、二齡、三齡幼蟲的殺蟲效果，結果如圖1所示。試驗結果得出，三齡以前的菜粉蝶幼蟲殺蟲效果明顯，我們建議在菜粉蝶幼蟲防治時，一定要在三齡幼蟲以前進行。

3 討論與結論

試驗結果可以看出，林問荊莖葉、蔓烏頭根的沸水提取液、乙醇提取液、丙酮提取液均對菜粉蝶幼蟲有不同程度的殺蟲效果，說明林問荊、蔓烏頭均是一種作用良好的殺蟲植物，可用于研制開發(fā)植物殺蟲劑。不同提取溶劑的殺蟲效果對比結果顯示，采用70%乙醇提取液提取效果最佳，對比林問荊、蔓烏頭對不同齡期菜粉蝶幼蟲的殺蟲效果，可以發(fā)現(xiàn)蔓烏頭提取物對上述菜粉蝶幼蟲的防治明顯效果好于林問荊提取物。

圖1 林問荊和蔓烏頭對不同齡期菜粉蝶的殺蟲效果對比

本試驗方法是將藥液浸到白菜葉片上，并將接蟲后的葉片置于培養(yǎng)皿中央培養(yǎng)，通過觀察菜粉蝶幼蟲的生長來研究林問荊、蔓烏頭對菜粉蝶的殺蟲效果，具有穩(wěn)定性可靠和定量性好等優(yōu)點。本試驗采用此法判斷防治菜粉蝶效果為最適殺蟲濃度，其結果可推廣用于蔬菜上的菜粉蝶幼蟲的生物防治中。