王一桐，李虹，王建楠，解琦,2，賈冬雪，王鶴璇，羅志文,2*

(1.佳木斯大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，黑龍江 佳木斯 154007;2.佳木斯大學(xué)應(yīng)用昆蟲研究所，黑龍江 佳木斯 154007)

林問荊(Eguisetumsylvalicum)為木賊科(Equisetaceae)問荊屬植物，是我國小興安嶺田間最常見的藥用植物[1]。問荊的莖葉提取物有清熱利尿，止血，平肝明目，止咳平喘的作用，在農(nóng)業(yè)上還有殺蟲和抑菌的功效，利用林問荊的毒性可提取配制植物源殺蟲劑，推廣進行農(nóng)業(yè)蔬菜害蟲的生物防治，還可對部分病害等有較強的抑菌作用。蔓烏頭(Aconitumvolubile)為毛茛科(Ranunculaceae)烏頭屬植物[2]，也是我國小興安嶺林區(qū)常見的野生有毒藥用植物。蔓烏頭的根提取物具祛風(fēng)、散寒、止痛、止痙，主治風(fēng)寒濕痹，關(guān)節(jié)疼痛和神經(jīng)痛等功效，在農(nóng)業(yè)上也有殺蟲作用，將林問荊的根提取制成植物源殺蟲劑，進行農(nóng)業(yè)蔬菜害蟲的生物防治試驗，為北方蔬菜的無公害生產(chǎn)提供技術(shù)支持。

菜粉蝶(Pierisrapae)，幼蟲被稱為菜青蟲，屬鱗翅目(Lepidoptera)粉蝶科(Pieridae)菜粉蝶屬昆蟲[3]，廣泛分布于我國全省各地。菜粉蝶主要以十字花科植物為食，寄主還包括菊科、旋花科等植物上。十字花科的蔬菜以甘藍、芥藍、花椰菜等受害嚴重。菜粉蝶的成蟲為虹吸式器，不危害蔬菜，而其幼蟲主要危害蔬菜的葉片，危害時會使蔬菜的葉片破損，用農(nóng)藥對菜粉蝶進行化學(xué)防治，會對人類的健康不利，還會產(chǎn)生嚴重的空氣污染[4-6]，而研發(fā)并推廣植物源殺蟲劑，可以無公害防治菜青蟲[7-10]，從而培養(yǎng)綠色有機蔬菜。

作者利用植物野外實習(xí)和當(dāng)?shù)刂参镎{(diào)查的機會，選擇分布在小興安嶺的野生藥用植物林問荊、蔓烏頭作為供試材料，采用不同溶劑進行提取物篩選試驗，并運用提取物進行菜粉蝶的三齡幼蟲的殺蟲效果對比試驗，以期為當(dāng)?shù)氐氖卟藷o公害生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

供試材料林問荊采自佳木斯市雙擁公園，蔓烏頭采自鶴崗市鶴北林業(yè)局曙光林場，經(jīng)植物教研室程海濤副教授鑒定為林問荊(Eguisetumsylvalicum)和蔓烏頭(Aconitumvolubile)。菜粉蝶三齡幼蟲由佳木斯大學(xué)應(yīng)用昆蟲研究所羅志文副教授鑒定為菜粉蝶(Pierisrapae)，供試菜粉蝶幼蟲采自佳木斯市向陽區(qū)和平大隊農(nóng)田中。

1.2 方法

1.2.1 兩種植物提取液的制備。將采集到的林問荊、蔓烏頭分別經(jīng)50℃鼓風(fēng)干燥箱烘干，采用超細中藥粉碎機粉碎成粉末，過60目篩備用。分別稱取樣品50g，采用70%乙醇、50%丙酮和蒸餾水進行提取，提取溫度為室溫25℃，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)2次，每次4h，將濾液合并備用，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至50mL，得到植物提取液的母液，經(jīng)孔徑為0.22μm的無菌濾器過濾除菌，置于4℃冰箱內(nèi)冷藏備用。

1.2.2 兩種植物提取液的藥效試驗。將無菌培養(yǎng)皿在超凈工作臺內(nèi)平均分為3組，每組18個，無菌試管分為9組，每組6支，并分別加入對應(yīng)提取液。每組試管提取液的濃度分別為無菌水，10%，20%，30%，50%，100%不同方法提取的林問荊、蔓烏頭提取液。浸白菜葉片各50g，分別移入菜粉蝶三齡幼蟲各10頭，每個樣品處理重復(fù)2次，水為對照組，分別放入無菌培養(yǎng)皿中進行飼養(yǎng)試驗。經(jīng)12h、24h、36h后觀察試驗結(jié)果，觀察幼蟲的生長情況，每日要觀察3～4次。

菜粉蝶對植物提取液的藥性測定。將材料培養(yǎng)12h、24h、36h后，以菜粉蝶不同時期幼蟲生長狀態(tài)，來測定提取液對菜粉蝶幼蟲殺蟲效果。對照組是以白菜地的菜粉蝶幼蟲作為對照組，觀察自然狀態(tài)下的菜粉蝶的發(fā)育形態(tài)和生活史情況，并與室內(nèi)飼養(yǎng)進行對比。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溶劑提取物的殺蟲效果

由表1可以看，采用3種不同提取方法得到的林問荊提取液，對菜粉蝶三齡幼蟲有一定的殺蟲作用，由數(shù)據(jù)可以看出，提取液的殺蟲作用與提取液的濃度直接相關(guān)。由表2可以看，采用3種不同提取方法得到的蔓烏頭提取液，對菜粉蝶三齡幼蟲有較強的殺蟲作用，由數(shù)據(jù)可以看出，提取液的殺蟲作用與提取液的濃度也直接相關(guān)。采用不同提取方法獲得的提取物以70%乙醇提取物的抑菌作用最好，50%丙酮提取物效果次之，而沸水提取物抑菌效果最差。

2.2 同一提取方法的殺蟲效果對比

為了對比林問荊、蔓烏頭兩種植物的殺蟲效果，作者以70%的乙醇對林問荊莖葉、蔓烏頭荊根分別進行提取，并進行3次殺蟲試驗，取其平均值。結(jié)果說明，蔓烏頭根提取液的殺蟲作用最強，70%乙醇的蔓烏頭提取液的殺蟲效果最好，通過計算得出最低殺蟲濃度(MIC)為0.46g/mL。

2.3 菜粉蝶幼蟲不同齡期的殺蟲效果

表1 林問荊莖葉提取液的殺蟲效果對比

表2 蔓烏頭根提取液的殺蟲效果對比

表3 70%乙醇的林問荊、蔓烏頭提取液的殺蟲效果比較

通過試驗來對比70%乙醇的林問荊、蔓烏頭提取液30%濃度對菜粉蝶一齡、二齡、三齡幼蟲的殺蟲效果，結(jié)果如圖1所示。試驗結(jié)果得出，三齡以前的菜粉蝶幼蟲殺蟲效果明顯，我們建議在菜粉蝶幼蟲防治時，一定要在三齡幼蟲以前進行。

3 討論與結(jié)論

試驗結(jié)果可以看出，林問荊莖葉、蔓烏頭根的沸水提取液、乙醇提取液、丙酮提取液均對菜粉蝶幼蟲有不同程度的殺蟲效果，說明林問荊、蔓烏頭均是一種作用良好的殺蟲植物，可用于研制開發(fā)植物殺蟲劑。不同提取溶劑的殺蟲效果對比結(jié)果顯示，采用70%乙醇提取液提取效果最佳，對比林問荊、蔓烏頭對不同齡期菜粉蝶幼蟲的殺蟲效果，可以發(fā)現(xiàn)蔓烏頭提取物對上述菜粉蝶幼蟲的防治明顯效果好于林問荊提取物。

圖1 林問荊和蔓烏頭對不同齡期菜粉蝶的殺蟲效果對比

本試驗方法是將藥液浸到白菜葉片上，并將接蟲后的葉片置于培養(yǎng)皿中央培養(yǎng)，通過觀察菜粉蝶幼蟲的生長來研究林問荊、蔓烏頭對菜粉蝶的殺蟲效果，具有穩(wěn)定性可靠和定量性好等優(yōu)點。本試驗采用此法判斷防治菜粉蝶效果為最適殺蟲濃度，其結(jié)果可推廣用于蔬菜上的菜粉蝶幼蟲的生物防治中。