劉小岑，秦明明，劉 夏，浦 春

(皖南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院 弋磯山醫(yī)院 檢驗(yàn)科，安徽 蕪湖 241001)

乳腺癌是婦女常見的惡性腫瘤之一，我國(guó)近年乳腺癌發(fā)病率約以每年3%的速度增長(zhǎng)[1]。HER-2癌基因參與了細(xì)胞生長(zhǎng)因子的信號(hào)傳導(dǎo)過程，乳腺癌患者的腫瘤細(xì)胞中 HER-2 高表達(dá)，則會(huì)刺激癌細(xì)胞生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移[2-3]，因此它與乳腺癌的預(yù)后、復(fù)發(fā)及治療方案均有相關(guān)性。現(xiàn)有檢測(cè)方法均需獲取組織標(biāo)本，但是組織標(biāo)本的獲取對(duì)于患者來說屬于有創(chuàng)性操作，且價(jià)格昂貴，同時(shí)難以多次檢測(cè)，無法對(duì)患者術(shù)后進(jìn)行病情監(jiān)測(cè)，因此尋找簡(jiǎn)單、安全的血清標(biāo)志物具有重要臨床意義。本研究主要通過檢測(cè)乳腺癌患者組織和血清標(biāo)本HER-2的水平，并分析其與相關(guān)臨床病理參數(shù)的相關(guān)性，探討血清HER-2對(duì)于乳腺癌的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2017年2～7月在弋磯山醫(yī)院甲乳外科經(jīng)病理證實(shí)的乳腺癌患者40例，乳腺良性腫瘤患者47例，健康體檢者44例，3組年齡均在30～65歲，平均年齡分別為(52.96±7.00)歲、(48.80±8.15)歲和(47.93±8.13)歲。本研究所有患者入院前都未接受過臨床治療。

1.2 儀器與試劑 血清HER-2的檢測(cè)使用的是山東新華AE-180化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析儀，試劑盒由山東新華集團(tuán)提供，檢測(cè)原理是雙位點(diǎn)化學(xué)夾心法，參考范圍：<12.78 μg/L。組織 HER-2的檢測(cè)使用的是Bench Mark XT全自動(dòng)免疫組化染色儀，試劑盒由欣博盛生物科技有限公司提供，檢測(cè)原理是免疫組化(Immunohistochemistry,IHC)染色。

1.3 方法 所有血清標(biāo)本的采集都告知研究對(duì)象獲得知情同意后進(jìn)行操作。抽取研究對(duì)象晨起空腹靜脈血標(biāo)本4 mL，靜置2 h后以4000 r/min的速度離心5 min，分離血清用于檢測(cè)，結(jié)果大于對(duì)照參考值范圍上限即判斷為陽性。組織標(biāo)本則從弋磯山醫(yī)院病理科獲取并進(jìn)行檢測(cè)，組織HER-2檢測(cè)結(jié)果按專業(yè)評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)定。

1.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間、組內(nèi)比較采用t檢驗(yàn)或F檢驗(yàn)和卡方檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 健康對(duì)照組、乳腺良性腫瘤組、乳腺癌組血清HER-2結(jié)果比較 乳腺癌患者血清HER-2的水平高于乳腺良性腫瘤患者和健康對(duì)照者(P<0.05)，見表1。以血清HER-2>12.78 μg/L為陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，乳腺癌患者中血清HER-2的陽性率為42.5%，高于乳腺良性疾病患者(17.02%)和健康對(duì)照者(15.91%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。血清HER-2對(duì)乳腺癌的靈敏度和特異度分別為66.66%和81.82%。

表1 3組患者血清HER-2水平比較

注：與健康對(duì)照組相比，aP<0.05，bP>0.05；與乳腺良性腫瘤組相比，cP<0.05。

2.2 乳腺癌患者血清 HER-2含量與組織HER-2表達(dá)的相關(guān)性 根據(jù)組織HER-2表達(dá)結(jié)果將乳腺癌患者分為3組(部分HER-2表達(dá)為2+的組織標(biāo)本補(bǔ)充做了熒光原位雜交法)，通過分析發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者血清HER-2含量隨著組織HER-2表達(dá)的升高而升高，結(jié)果見表2。

注：與陰性組相比，aP<0.05。

2.3 乳腺癌患者血清HER-2蛋白水平與組織HER-2及不同臨床病理參數(shù)的相關(guān)性 本研究分析得出乳腺癌患者血清HER-2表達(dá)與組織HER-2表達(dá)有相關(guān)性，與病理參數(shù)Ki-67、腫瘤直徑以及組織分級(jí)也有相關(guān)性，而與ER、PR狀態(tài)以及淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移等其他參數(shù)未見明顯相關(guān)性，結(jié)果見表3。

表3 血清HER-2與組織HER-2及不同臨床病理參數(shù)相關(guān)性

注：由于本研究標(biāo)本中有6例標(biāo)本未明確組織HER-2表達(dá)結(jié)果，所以表中血清HER-2與組織HER-2相關(guān)性分析的標(biāo)本只有34例。

3 討論

比較乳腺癌患者的臨床癥狀與HER-2、 ER、PR和Ki-67 等免疫組化指標(biāo)的關(guān)系及指標(biāo)間的相互聯(lián)系，對(duì)判斷該類乳腺癌的預(yù)后及治療指導(dǎo)具有重要意義。HER-2作為乳腺癌患者重要預(yù)后指標(biāo)和化療治療反應(yīng)預(yù)測(cè)因子，其表達(dá)情況已被臨床用來判斷乳腺癌患者的預(yù)后，對(duì)臨床治療也有參考價(jià)值[4-5]，已得到臨床和病理醫(yī)師的廣泛認(rèn)同。組織HER-2表達(dá)的檢測(cè)準(zhǔn)確性較高，但有一定的局限性，如受標(biāo)本采集、制作、保存等因素影響，不能作為長(zhǎng)期隨訪的指標(biāo)。HER-2是由胞外域(HER-2 ECDH)、跨膜親脂片段和胞內(nèi)域三部分構(gòu)成,其中胞外域可從完整的HER2受體上被降解釋放到外周血中被檢測(cè)到，使血清HER-2的檢測(cè)成為可能[6]。而且血清HER-2的檢測(cè)可以重復(fù)檢測(cè)，因此可以動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)乳腺癌患者在接受治療過程中、疾病的進(jìn)展過程中血清HER-2含量的變化，并且血清標(biāo)本的采集方便，保存方式簡(jiǎn)單。

本研究結(jié)果顯示血清HER-2在健康者、乳腺良性腫瘤患者及乳腺癌患者中都有表達(dá)，但乳腺癌組血清HER-2水平和陽性率高于健康對(duì)照組和乳腺良性腫瘤組(P<0.05)，與Mazouni等[7]研究結(jié)果相一致，以上結(jié)果提示血清HER-2可作為乳腺癌患者新的血清標(biāo)志物。本研究分析了血清HER-2與組織臨床病理參數(shù)的相關(guān)性，結(jié)果顯示血清HER-2高表達(dá)與ER狀態(tài)、PR狀態(tài)等因素?zé)o明顯相關(guān)性，該結(jié)論與廖天[8]、吳凡等[9]結(jié)論一致；結(jié)果也顯示血清HER-2高表達(dá)與免疫組化指標(biāo)中的Ki-67、病理組織分級(jí)有相關(guān)性，與相關(guān)研究相符[10-11]，提示血清HER-2可能是預(yù)測(cè)乳腺癌化療效果的一項(xiàng)獨(dú)立指標(biāo)，與乳腺癌預(yù)后有相關(guān)性。

血清HER-2與組織HER-2表達(dá)的相關(guān)性研究國(guó)內(nèi)外專家仍有爭(zhēng)議。本研究得出，乳腺癌患者血清HER-2含量隨著組織HER-2表達(dá)的增加而增加，組織HER-2陽性組血清HER-2含量及陽性率高于組織HER-2陰性組及臨界組(P<0.05)，同時(shí)結(jié)合表3中34例乳腺癌患者血清HER-2與組織HER-2表達(dá)相關(guān)性的分析結(jié)果(P<0.05)，提示血清HER-2和組織HER-2表達(dá)是有相關(guān)性的，該結(jié)論與廖天等[12]的結(jié)論相一致。也有研究[13]檢測(cè)了乳腺癌患者血清HER-2水平和組織HER-2的表達(dá)情況，得出血清HER-2水平和組織HER-2無相關(guān)性。這種結(jié)果的差異，可能與所用實(shí)驗(yàn)方法不同以及本研究樣本數(shù)量小等因素有關(guān)。

綜上所述，血清HER-2對(duì)乳腺癌的臨床應(yīng)用有價(jià)值，有望成為乳腺癌新的血清標(biāo)志物，且與某些臨床病理參數(shù)有相關(guān)性，因此與乳腺癌患者的化療靈敏度、預(yù)后是相關(guān)的。同時(shí)血清HER-2與組織HER-2表達(dá)有相關(guān)性，可應(yīng)用于臨床作為組織HER-2檢測(cè)的補(bǔ)充手段。但由于本研究樣本數(shù)量小，乳腺癌患者血清與組織HER2表達(dá)結(jié)果的相關(guān)性有待加大樣本量進(jìn)一步證實(shí)。