滕爽爽 ,宋呈鍇 ,林興管 ,柴雪良 ,方軍 ,肖國強
(1.浙江省海洋水產(chǎn)養(yǎng)殖研究所,浙江 溫州 325005;2.浙江省近岸水域生物資源開發(fā)與保護重點實驗室,浙江 溫州 325005)
黃斑籃子魚(Siganus oramin),又名長鰭籃子魚,隸屬于鱸形目(Perciformes),籃子魚科(Siganidae),籃子魚屬,是一種以植食性為主的近岸小型魚類,廣泛分布于非洲東岸至太平洋中部海域[1-2]。此魚具有肉質(zhì)細(xì)嫩,味道鮮美無肌間刺,營養(yǎng)價值高,種苗來源較廣,飼養(yǎng)周期較短,病害較少等優(yōu)點[3-5]。另外,黃斑籃子魚刮食固著藻類的能力強,在網(wǎng)箱養(yǎng)殖時可以起到清潔網(wǎng)衣的作用,因此有望成為國內(nèi)良好的海水養(yǎng)殖對象的選擇[6]。在我國,籃子魚類作為目前較為新興的植食性海水養(yǎng)殖魚類,其養(yǎng)殖規(guī)模還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不及其他肉食性海水魚類。
鹽度作為魚類生理學(xué)和生物學(xué)的重要參考指標(biāo),是影響魚類新陳代謝等生理活動的一個重要環(huán)境因素。當(dāng)外界的鹽度發(fā)生變化時,魚類會改變自身的生理活動以維持穩(wěn)態(tài)來應(yīng)對這種變化[7-17],從而導(dǎo)致其存活率、耗氧率、排氨率等一系列的生理指標(biāo)發(fā)生改變,根據(jù)邊平江[18]等人研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)外界的鹽度發(fā)生變化時,魚類機體就會進入一種應(yīng)激狀態(tài),在這種狀態(tài)下,魚類的生理活動會加劇。因此在魚類養(yǎng)殖的過程中,控制適宜的養(yǎng)殖水體鹽度,采取合理的鹽度調(diào)節(jié)模式具有重要意義。
目前,鹽度對籃子魚生理、生化影響的報道尚不多見。該文研究了高鹽度向低鹽度驟變、高鹽度向低鹽度漸變、低鹽度向高鹽度驟變、低鹽度向高鹽度漸變等四種海水鹽度變化對黃斑籃子魚病死率和生理代謝的影響,為黃斑籃子魚養(yǎng)殖海水鹽度選擇或淡化馴養(yǎng)的提供重要參考和基礎(chǔ)資料。
試驗用魚來自浙江省海洋水產(chǎn)養(yǎng)殖研究所清江基地養(yǎng)殖的黃斑籃子魚。選擇無病無傷、行動迅速、生命力強、大小體型相近的2 000尾作為試驗用魚,規(guī)格為體長(6.53±0.75)cm,體質(zhì)量(1.92±0.46)g。試驗前于室內(nèi)水泥池(6 m×4 m×1.5 m)中暫養(yǎng),24 h充氣,試驗用水為砂濾海水,pH值為8.21±0.3,鹽度為 23.3±0.8,水溫為(26±1)℃。不同鹽度的海水配置利用砂濾海水添加曝氣自來水的方式獲得,利用鹽度計進行鹽度校準(zhǔn),每天早上換水1次,換水前調(diào)整鹽度。試驗期間早晚兩次投喂相同的配合飼料,每次投喂的質(zhì)量為桶中魚體質(zhì)量的1%~3%。
1.2.1 鹽度變化對黃斑籃子魚病死率的影響 該試驗共設(shè)置4個試驗組,分別為高鹽度海水向低鹽度海水驟變組、高鹽度海水向低鹽度海水漸變組、低鹽度海水向高鹽度海水驟變組、低鹽度海水向高鹽度海水漸變組。試驗組籃子魚暫養(yǎng)鹽度分別為30±0.7和5± 0.7。
高鹽度海水向低鹽度海水驟變的試驗組鹽度梯度設(shè)置為 0、5、10、15、20,低鹽度海水向高鹽度海水驟變鹽度梯度為10、15、20、30。每組均設(shè)3個平行,每個平行組放入30尾取自暫養(yǎng)池的黃斑籃子魚,在1、3、5、7 d分別統(tǒng)計各試驗組的累計病死率。
高鹽度海水向低鹽度海水漸變試驗組初始水體的鹽度為30,每2 d下降一次鹽度,分別下降至20、15、10、5、0;低鹽度海水向高鹽度海水漸變試驗組初始水體的鹽度為5,每2 d上升一次鹽度,分別上升至 10、15、20、30。試驗設(shè)置 3 個平行組,每個平行組放入30尾取自暫養(yǎng)池的黃斑籃子魚,試驗結(jié)束后計算病死率。
1.2.2 不同鹽度對黃斑籃子魚耗氧率、排氨率的影響 試驗用黃斑籃子魚暫養(yǎng)在500 L玻璃缸中,鹽度為 30 ± 0.8。試驗設(shè)置 5、10、15、20、30 五個鹽度梯度,試驗開始前饑餓處理24 h,7:00和19:00兩個時間段各做一次,結(jié)果取平均值。
采用靜水密閉式呼吸試驗方法[20],以5 L玻璃瓶為試驗容器,每個試驗組設(shè)3個平行,試驗組每個瓶中放3尾魚,并設(shè)置對照組,試驗開始1.5 h后,測定對照組和試驗組中溶解氧和氨氮的含量,溶解氧的測定采用數(shù)字化多參數(shù)分析儀(Muliti 3410,WTW,德國)。溶解氧計算公式為:
式中:RO為單位體質(zhì)量耗率mg/(g·h);CDO0和CDOt分別為起始溶氧質(zhì)量濃度和t時間后質(zhì)量濃度溶氧(mg/L);SDO為對照組溶解氧變化系數(shù)C0,C0和Ct分別為對照組試驗開始和t時間后的溶氧質(zhì)量濃度;V為代謝瓶容積(L);m為魚體質(zhì)量(g);t為試驗時間。
排氨率測定采用次溴酸氧化法和重氮—偶氮法測定氨氮的濃度。根據(jù)試驗始末氨氮濃度的變化,排氨率計算公式為:
式中:RN為單位排氨率和CNt分別為起始氨氮質(zhì)量濃度和t時間后氨氮質(zhì)量濃度(mg·L-1);SN 為對照組氨氮變化系數(shù)和 St分別為對照組試驗開始和t時間后的氨氮質(zhì)量濃度;V 為代謝瓶容積(L);m 為魚體質(zhì)量(g);t為試驗時間。
試驗所得數(shù)據(jù)用Microsoft Excel 2007統(tǒng)計處理,數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。采用SPSS 17.0軟件對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析(ANOVA)和Tukey多重比較法分析,P值統(tǒng)計學(xué)意義臨界水平為0.05。
2.1.1 鹽度下降對黃斑籃子魚病死率的影響 由圖1可見,高鹽度海水向低鹽度海水驟變0鹽度第1天驟變組的病死率為100%,其他試驗組的病死率隨著時間的延長而升高,驟變7 d后黃斑籃子魚成活率仍保持80%以上。
圖1 高鹽度海水向低鹽度海水驟變(7 d)黃斑籃子魚累積病死率
圖2 高鹽度海水向低鹽度海水驟變及漸變黃斑籃子魚累積病死率
由圖2可見,高鹽度海水向低鹽度海水驟變和漸變時,各試驗組黃斑籃子魚的成活率變化趨勢相同,鹽度為0的驟變組與漸變組黃斑籃子魚的病死率均為100%,其他各試驗組黃斑籃子魚的7 d累計病死率都隨著鹽度的下降而上升。
2.1.2 鹽度上升對黃斑籃子魚病死率的影響 低鹽度海水向高鹽度海水驟變時,7 d內(nèi)黃斑籃子魚的病死率由圖3可見。黃斑籃子魚的病死率隨著鹽度的升高和時間的延長而升高,相較于高鹽度海水向低鹽度海水驟變試驗,低鹽度海水向高鹽度海水驟變時,黃斑籃子魚的病死率有所上升,但是依舊維持在50%以內(nèi)。
圖3 低鹽度海水向高鹽度海水驟變(7 d)黃斑籃子魚病死率
低鹽度海水向高鹽度海水驟變和漸變時,黃斑籃子魚最終的病死率都隨著鹽度的上升不斷上升(圖4)。與驟變組相比,漸變組黃斑籃子魚的病死率均有所下降,下降幅度為16.67%~26.67%。
圖4 低鹽度海水向高鹽度海水驟變及漸變最終黃斑籃子魚病死率
圖5表示鹽度對黃斑籃子魚耗氧率和排氨率的影響。耗氧率隨鹽度的上升不斷下降(圖5),其中耗氧率在鹽度為5、10、15組別之間無統(tǒng)計學(xué)意義,但與其余兩組存在統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)
圖5 鹽度對黃斑籃子魚耗氧率的影響
圖6顯示在5到30的鹽度區(qū)間內(nèi),隨著鹽度的上升黃斑籃子魚的排氨率呈上升的趨勢,在鹽度15達到峰值,隨后逐漸下降。鹽度為30的試驗組與其他各試驗組差異具統(tǒng)計學(xué)意義。
圖6 鹽度對黃斑籃子魚排氨率的影響
魚類能否適應(yīng)鹽度的變化同魚自身有關(guān),籃子魚屬于廣鹽性魚類,據(jù)Lam[19]報道,籃子魚能在鹽度為5的海水中生存,在巴林沿海鹽度達41~47的水域也能正常生長繁殖,在該試驗中黃斑籃子魚在各個鹽度水平都有較高的存活,病死率均維持在50%以內(nèi)。該試驗結(jié)果顯示,鹽度驟變比鹽度漸變更易造成黃斑籃子魚病死。鹽度下降試驗,驟變時的最終病死率為16%,漸變的病死率為20%,鹽度上升試驗中,驟變和漸變的最終病死率分別為46%和20%,兩組試驗驟變的最終病死率均大于漸變時的病死率;而當(dāng)鹽度由5上升至30的過程中,病死率分別為:16.67%、33.33%、40%、46.67%,病死率均隨著鹽度變化的幅度增大而升高。這說明鹽度變化的速度是影響黃斑籃子魚存活率的一個關(guān)鍵因素,鹽度變化的速度越大,病死率越高,雖然黃斑籃子魚對鹽度變化適應(yīng)性較高,但其需要一定的時間去適應(yīng)外界環(huán)境的變化。由高鹽度向低鹽度變化的試驗中,驟變與漸變的試驗結(jié)果均顯示鹽度由30下降至5的過程中病死率較低(<20%),但當(dāng)鹽度下降至0時,病死率達到了100%,這與陳凱的研究結(jié)果籃子魚具有廣鹽性特點[20],但10~20的培育鹽度似乎更適合籃子魚的生長相一致。說明黃斑籃子魚對高鹽度向低鹽度環(huán)境變化適應(yīng)性佳,但具有一定限度,低于5鹽度的海水適應(yīng)性差,淡水環(huán)境易造成其大批量死亡。
鹽度是海水養(yǎng)殖中最重要的環(huán)境因子,對魚類的生理代謝有著顯著的影響[21]。該試驗研究發(fā)現(xiàn)黃斑籃子魚的耗氧率隨著鹽度的下降而升高,與丁彥文等[22]、王廣軍等[23]的研究結(jié)果相同。根據(jù)Jobling等[24]的闡述,魚類標(biāo)準(zhǔn)代謝可分為組織的修復(fù)與更新所耗費的能量以及維持內(nèi)穩(wěn)態(tài)所耗費的能量兩類。當(dāng)外界的鹽度環(huán)境發(fā)生變化時,魚體勢必會消耗一定的能量去維持自身的內(nèi)穩(wěn)態(tài),發(fā)生的變化越劇烈,維持穩(wěn)態(tài)所耗費的能量也就相應(yīng)的越多。該研究中,當(dāng)鹽度由30降至20時,鹽度的變化未能對黃斑籃子魚產(chǎn)生明顯的影響,所以耗氧量未表現(xiàn)出明顯差異。隨著鹽度不斷下降至15以下,黃斑籃子魚的呼吸代謝加強,耗氧率顯著升高。說明了外界鹽度的變化較大時對黃斑籃子魚正常生理代謝產(chǎn)生一定影響,因此需耗費較多能量維持內(nèi)穩(wěn)態(tài),從而導(dǎo)致耗氧率的顯著增高。
在耗氧率發(fā)生變化的同時,排氨率也會隨著鹽度的變化發(fā)生改變,由于水產(chǎn)動物主要靠蛋白質(zhì)的代謝提供能量,所以排氨率反映了蛋白質(zhì)的代謝情況[13]。在試驗中黃斑籃子魚的排氨率在5~30的鹽度范圍內(nèi),先隨著鹽度的上升而上升,隨后隨著鹽度的上升反而下降,這與呂富、唐賢明、閆茂倉、郭念崗等人研究結(jié)果相符合[14-17]。按照滲透調(diào)節(jié)的原理,魚類體液與外界環(huán)境等滲時,其用來維持穩(wěn)態(tài)的所需能量越低,當(dāng)鹽度遠(yuǎn)離等滲點時,魚類就需要更多地能量損耗來維持穩(wěn)態(tài),其代謝活動就會加劇,代謝率越高[12]。在養(yǎng)殖過程中,選擇合適的鹽度的水體,采用合理的鹽度調(diào)控方案,魚類用于調(diào)節(jié)滲透壓的能量消耗將會降低,用于生長的能量將會增多,對魚生長發(fā)育起到促進作用。從耗氧率與排氨率結(jié)果來看,該試驗黃斑籃子魚鹽度最適宜范圍為20~30之間,這可能與試驗所用黃斑籃子魚自然生活環(huán)境鹽度擇有一定關(guān)系。
該研究發(fā)現(xiàn),黃斑籃子魚對鹽度的適應(yīng)性較廣,5~30的鹽度范圍內(nèi)均能大量存活,且鹽度對其生理代謝沒有造成強烈影響,是優(yōu)良的淡化馴養(yǎng)對象,在廣東湛江的珠江入海口沿岸,籃子魚甚至已被引入淡水池塘養(yǎng)殖[25]。開展黃斑籃子魚的淡化培養(yǎng)技術(shù),可以拓寬養(yǎng)殖空間,減少養(yǎng)殖成本,具有巨大的經(jīng)濟和社會效益,廣闊的產(chǎn)業(yè)化前景。并且有研究發(fā)現(xiàn),低鹽度養(yǎng)殖的籃子魚必需氨基酸營養(yǎng)組成合理,鮮味氨基酸含量豐富,肌肉營養(yǎng)成分優(yōu)于野生籃子魚及多種野生魚類[7]。該試驗發(fā)現(xiàn),鹽度驟變比鹽度漸變更易造成黃斑籃子魚死亡,且鹽度跨度過大也不利于籃子魚存活,因此其淡化馴養(yǎng)速度不宜過快。該研究中每次鹽度梯度變化為5,鹽度變化時間為3 d的培育方法取得初步的良好效果,病死率控制在20%以內(nèi),但具體技術(shù)細(xì)節(jié)及實施方案還有待進一步研究發(fā)現(xiàn)。值得注意的是,從鹽度為5到0的變化導(dǎo)致黃斑籃子魚大批量死亡,可能是由于其低鹽度的耐受力較強,但對淡水的耐受力較差,因此在對其進行淡化過程中,從海水至鹽度5的馴養(yǎng)時間可適當(dāng)縮短,而從5至淡水的馴養(yǎng)時間適當(dāng)延長,降低損失,提高培育效率和收益[8]。