鄭 嵐，楊 藺，王 星

（上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬上海兒童醫(yī)學(xué)中心檢驗(yàn)科，上海 200127）

近年來(lái)，由于外界環(huán)境的惡化和飲食結(jié)構(gòu)的復(fù)雜化，食物性過(guò)敏性疾?。╢ood allergy disease，F(xiàn)AD）在全球范圍內(nèi)都呈上升趨勢(shì)[1]，在兒童中尤為嚴(yán)重，已成為全球的公共衛(wèi)生問(wèn)題[2]。FAD易感者在攝入食物類(lèi)抗原后，機(jī)體會(huì)產(chǎn)生異常免疫反應(yīng)，其中由食物不耐受引起的過(guò)敏反應(yīng)尤為常見(jiàn)，在臨床癥狀上有多種表現(xiàn)形式，包括皮膚癥狀、胃腸道癥狀、呼吸道癥狀，甚至過(guò)敏性休克。在兒童中，多種類(lèi)型的過(guò)敏性疾病，如鼻炎、哮喘等很難找到明確的致病因素，且易反復(fù)發(fā)作，嚴(yán)重影響患兒的健康成長(zhǎng)。FAD發(fā)病機(jī)制包括IgE介導(dǎo)、非IgE介導(dǎo)和混合型[3]。1982年，學(xué)者們發(fā)現(xiàn)了IgG介導(dǎo)的食物過(guò)敏反應(yīng)，其與IgE分別作用于過(guò)敏反應(yīng)的速發(fā)相和遲發(fā)相。此后，隨著人們對(duì)IgG介導(dǎo)的食物過(guò)敏反應(yīng)的了解逐步加深，檢測(cè)方法被不斷改進(jìn)，目前臨床上已可以有效地診斷IgG介導(dǎo)的食物過(guò)敏反應(yīng)相關(guān)疾病并進(jìn)行有效的防治。為了探討和研究IgG介導(dǎo)的食物過(guò)敏反應(yīng)在兒童過(guò)敏性疾病中的發(fā)生規(guī)律，本研究對(duì)食物不耐受患兒的性別、年齡、發(fā)病季節(jié)及常見(jiàn)食入性過(guò)敏源的分布等進(jìn)行了調(diào)查。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

選取2015年1—12月在上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬上海兒童醫(yī)學(xué)中心過(guò)敏免疫科及兒科門(mén)診進(jìn)行過(guò)敏原檢測(cè)的患兒2 437例，其中男1 478 例、女959例，年齡1個(gè)月～18歲，臨床表現(xiàn)主要包括哮喘、過(guò)敏性鼻炎、蕁麻疹、久咳、肺炎等。納入標(biāo)準(zhǔn)：患兒過(guò)敏史不詳，但均有典型臨床表現(xiàn)（明顯的過(guò)敏反應(yīng)），且已明確診斷為過(guò)敏性疾病。

1.2 方法

食物特異性IgG抗體采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）微孔板技術(shù)檢測(cè)，試劑盒為蘇州浩歐博生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)的食物特異性IgG抗體檢測(cè)試劑盒FIgG-14項(xiàng)-H（牛肉、牛奶、蛋清/蛋黃、雞肉、豬肉、蝦、蟹、鱈魚(yú)、大米、玉米、小麥、番茄、大豆、蘑菇）。實(shí)驗(yàn)步驟：采集患兒血清20 μL，1∶100稀釋后加入包被有食物抗原的微孔中，使之發(fā)生反應(yīng)，然后去除未結(jié)合的抗體，加入結(jié)合辣根過(guò)氧化物酶的抗人IgG抗體，與已結(jié)合的抗體反應(yīng)。結(jié)合的辣根過(guò)氧化物酶催化發(fā)色底物四甲基聯(lián)苯胺（tetramethylbenzidine，TMB）產(chǎn)生發(fā)色反應(yīng)。反應(yīng)終止后，在450 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度（A）值，A值的大小與待檢抗體濃度呈正比。根據(jù)每種食物特異性IgG抗體濃度的不同將測(cè)定值分為：陰性（＜50 U/mL）、1級(jí)（輕度敏感，50～100 U/mL）、2級(jí)（中度敏感，100～200 U/mL）、3級(jí)（重度敏感，50～100 U/mL）。1～3級(jí)均為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用Stata/SE 11.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)和χ2趨勢(shì)檢驗(yàn)。以P＜0. 05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 過(guò)敏原譜分類(lèi)

食物特異性IgG抗體總陽(yáng)性率為79.1%（1 928/2 437）。最主要的食入性過(guò)敏原為蛋清/蛋黃，陽(yáng)性率為54.7%，之后依次為小麥（44.3%）、西紅柿（31.3%），牛奶（30.5%），豬肉、牛肉陽(yáng)性率最低（均＜1%），見(jiàn)圖1。單純1項(xiàng)過(guò)敏原陽(yáng)性以蛋清/蛋黃或牛奶為主（31.0%），2項(xiàng)過(guò)敏原陽(yáng)性以蛋清/蛋黃+牛奶為主（11.8%），3項(xiàng)過(guò)敏原陽(yáng)性以蛋清/蛋黃+牛奶+西紅柿為主（5.0%）。蛋清/蛋黃、牛奶引起的過(guò)敏反應(yīng)較強(qiáng)，IgG升高以“++”和“+++”為主；而小麥、西紅柿引起的過(guò)敏反應(yīng)較弱，IgG升高以“+”為主。

圖1 2 437 例患兒14種食物過(guò)敏原檢測(cè)結(jié)果

2.2 性別分布

2 437例患兒中男1 478例、女959例，性別比例為1.5∶1。男、女童之間牛奶、小麥、大豆、玉米、鱈魚(yú)、大米、西紅柿、蟹、蝦、豬肉、牛肉、雞肉陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。男童蛋清/蛋黃的陽(yáng)性率（31.5%）明顯高于女童（23.2%）（P＜0.05），女童蘑菇的陽(yáng)性率（1.0%）明顯高于男童（0.7%）（P=0.01）。見(jiàn)圖2。

2.3 年齡分布

將2 437例食物不耐受患兒按年齡分組，分為：＜3歲組（884例）、4～5歲組（480例）、6～7歲組（481例）、＞7歲組（592例）。不同年齡組牛奶、蛋清/蛋黃、小麥、玉米、鱈魚(yú)、大米、西紅柿、蟹、蝦和雞肉陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。其中牛奶、小麥、玉米、鱈魚(yú)、大米、西紅柿、蟹、蝦、雞肉陽(yáng)性率均隨年齡增長(zhǎng)呈下降趨勢(shì)，蛋清/蛋黃陽(yáng)性率均以＜3歲組最低，3歲后出現(xiàn)高發(fā)但呈緩慢下降趨勢(shì)。其他幾項(xiàng)與年齡因素并無(wú)明顯關(guān)系。見(jiàn)表3。

在＜3歲組中，男童蛋清/蛋黃和小麥的陽(yáng)性率明顯高于女童（P＜0.05）。在4～5歲組中，女童蟹和蘑菇的陽(yáng)性率明顯高于男童（P＜0.05）。在6～7歲組中，女童小麥陽(yáng)性率顯著高于男童（P＜0.05），男童蝦的陽(yáng)性率高于女童（P＜0.05）。在＞7歲組中，女童大米陽(yáng)性率顯著高于男童（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表3 不同年齡段患兒食物過(guò)敏原陽(yáng)性率比較 （%）

表4 各年齡組不同性別患兒食物過(guò)敏原陽(yáng)性率的比較 （%）

2.4 檢測(cè)時(shí)間分布

在不同月份進(jìn)行食物特異性IgG抗體檢測(cè)的患兒數(shù)量有一定的差異，其中1月份檢測(cè)例數(shù)和陽(yáng)性率分別為155例、71.0%，2月份分別為109例、81.7%，3月份分別為203例、75.4%，4月份分別為233例、73.0%，5月份分別為162例、86.4%，6月份分別為189例、88.4%，7月份分別為272例、78.7%，8月份分別為301例、80.1%，9月份分別為226例、81.9%，10月份分別為176 例、81.3%，11月份分別為222例、74.8%，12月份分別為189例、79.4%。不同月份之間陽(yáng)性率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），無(wú)明顯的高峰期，說(shuō)明食物性過(guò)敏原與季節(jié)因素?zé)o明顯相關(guān)性。

3 討論

FAD在全球范圍內(nèi)呈上升的趨勢(shì)[1]，在兒童中尤為嚴(yán)重。當(dāng)食物進(jìn)入機(jī)體后不能被完全消化而產(chǎn)生食物大分子，食物大分子一旦進(jìn)入血液中即可作為抗原提呈因子被免疫系統(tǒng)識(shí)別，從而刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性IgG抗體。該抗體可對(duì)持續(xù)進(jìn)入機(jī)體的同類(lèi)過(guò)敏原產(chǎn)生保護(hù)性免疫反應(yīng)，表現(xiàn)為非IgE介導(dǎo)的FAD。兒童由于處于身體的生長(zhǎng)期，自身消化系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)發(fā)育不完善，很難徹底消化食物且易受外界因素的侵?jǐn)_，更易患FAD。食物過(guò)敏原多為蛋白質(zhì)分子，雞蛋、牛奶、魚(yú)類(lèi)、甲殼類(lèi)動(dòng)物、花生、大豆、核果類(lèi)食物和小麥經(jīng)常會(huì)引起過(guò)敏反應(yīng)，占食物過(guò)敏的90%以上[4]。本研究結(jié)果也顯示，蛋清/蛋黃、小麥、西紅柿和牛奶引起的過(guò)敏反應(yīng)較強(qiáng)，其中蛋清/蛋黃、牛奶引起的過(guò)敏反應(yīng)較強(qiáng)，IgG升高以“++”和“+++”為主，而小麥、西紅柿引起的過(guò)敏反應(yīng)較弱，以“+”為主。

本研究結(jié)果顯示，與女童比較，男童患食物過(guò)敏性疾病的可能性似乎更大，男、女童性別比例約為1.5∶1，這與楊勇等[5]的報(bào)道不太一致，需要加大樣本量和擴(kuò)大調(diào)查區(qū)域來(lái)驗(yàn)證。在常見(jiàn)食入性過(guò)敏原中，絕大部分食物對(duì)男、女童的致敏性無(wú)差異，說(shuō)明性別可能不是影響兒童FAD的主要因素。但男童的蛋清/蛋黃陽(yáng)性率顯著高于女童，這與沈陽(yáng)、大連等地區(qū)的報(bào)道相同[5-6]；而女童的蘑菇陽(yáng)性率顯著高于男童，這說(shuō)明某些致敏原對(duì)男、女童的致敏作用不太相同，其機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

按年齡分層的研究結(jié)果顯示，絕大部分食物對(duì)不同年齡段患兒的致敏作用有差異，說(shuō)明年齡可能是影響兒童FAD的主要因素。牛奶、小麥、玉米、鱈魚(yú)、大米、西紅柿、蟹、蝦、雞肉均隨年齡增長(zhǎng)呈下降趨勢(shì)，蛋清/蛋黃陽(yáng)性率＜3歲組最低，3歲后出現(xiàn)高發(fā)但呈緩慢下降趨勢(shì)。這可能與兒童的消化系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)逐步發(fā)育成熟，產(chǎn)生免疫耐受有關(guān)[7-8]。

綜上所述，兒童食物特異性IgG抗體陽(yáng)性率較高，因此應(yīng)重點(diǎn)加強(qiáng)學(xué)齡前兒童食物不耐受防治工作，盡量避免和減少食用被列為過(guò)敏原的食物[9]?？傊ㄟ^(guò)檢測(cè)食物特異性IgG 抗體可以明確病因[10-11]，對(duì)于食物過(guò)敏患兒的個(gè)體化治療和健康教育都有重要作用。