丁美月，舒思傳，楊愛梅，楊謹慈，舒曉亮

（懷化市動物疫病預(yù)防控制中心，湖南 懷化 418000）

1 試驗方法

1.1 扁桃體樣本采集

1.1.1 采集地點和時間 樣品來自懷化市內(nèi)2個生豬定點屠宰場，2017年3月至2018年2月，每月在其中一個屠宰場采集不同來源豬群30份扁桃體。

1.1.2采樣方法 利用扁桃體采樣器采樣。采樣器使用前均須用3%氫氧化鈉水溶液消毒后經(jīng)清水沖洗。采取扁桃體樣品后，用滅菌牙簽挑至滅菌離心管并做標(biāo)記。

1.2 檢測試劑

核酸提取試劑盒（磁珠法）購自杭州愛康生物技術(shù)有限公司；口蹄疫病毒通用型實時熒光RTPCR檢測試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（NSP2 1 594～1 680變異株）實時熒光RT-PCR檢測試劑盒購自北京世紀元亨；口蹄疫病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）、豬瘟病毒/豬藍耳病病毒/偽狂犬病病毒/豬圓環(huán)病毒2型四通道核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）、豬瘟/高致病性藍耳病/口蹄疫核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）購自中山大學(xué)達安基因股份有限公司。

1.3 檢測方法

核酸提取和熒光RT-PCR，嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

2 監(jiān)測結(jié)果

2.1 時間分布

對這360份豬扁桃體進行了常見病原學(xué)監(jiān)測，結(jié)果顯示在外觀健康豬群中豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）一年四季均有較高的帶毒率，共298份樣品呈PCV2陽性，陽性率達到了82.78%，除9月和2月平均帶毒率在26%左右外，其他時間段的帶毒率都達到了90%以上；其次分別是豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒（HP-PRRSV）、豬偽狂犬病病毒（PRV）、口蹄疫病毒（FMDV）；豬瘟病毒（CSFV）全部為陰性。PRV 在1、4、5、7、8 和 9 月未檢出；PRRSV 和 HP-PRRSV 僅在 11 月未同時檢出陽性，F(xiàn)MDV 在 5、8、9、10 月有檢出。具體監(jiān)測結(jié)果見表1。

表1 不同月份外觀健康豬群監(jiān)測結(jié)果

2.2 地域分布

360份豬扁桃體樣品中215份來自懷化本地，其余來自湖南省內(nèi)湘潭、婁底等地區(qū)和重慶、貴州等地。經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn)，不同地區(qū)的病原分布差異不明顯，PCV2的帶毒率都較高，其中懷化地區(qū)的最高為87.14%，除來自湘潭的樣品未監(jiān)測到FMDV，來自重慶的樣品未監(jiān)測到FMDV、PRV外，其他地區(qū)都有一定的病原感染率。不同地域樣品的檢測陽性率見表2。

表2 不同地域樣品的檢測陽性率

2.3 混合感染情況

監(jiān)測結(jié)果顯示，外觀健康豬群的混合感染情況主要是PRRSV和PCV2，其次是HP-PRRSV和PCV2、PRV和PCV2。PCV2與PRRSV、HP-PRRSV、FMDV、PRV等2～3種病原混合感染率達到16.39%?；旌细腥厩闆r統(tǒng)計結(jié)果見表3。

2.4 總體情況

2017年3月至2018年2月，混合感染樣品占陽性樣品的18.83%，除混合帶毒的樣品外，PCV2、PRRSV、HP-PRRSV、PRV、FMDV 的單一病種帶毒率分別為66.39%、5%、0.56%、0.56%、0.56%；檢測全部為陰性的樣品為10%。

表3 不同月份外觀健康豬群扁桃體樣品混合感染檢出情況

3 分析與討論

近年來，隨著我國養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，豬病也日趨復(fù)雜，免疫失敗、新老疫病的混合感染時有發(fā)生，在流行特點上以多重感染、繼發(fā)感染、免疫抑制、繁殖障礙癥候、呼吸道病癥候等為主要表征[1-4]。PCV2是一個基因保守的豬病原體[5]，作為單一病原致病性不高，常作為免疫抑制性條件病原與其他病原混合感染。據(jù)報道[4]，豬圓環(huán)病毒2型持續(xù)存在，一是污染面大，二是個體陽性率呈上升趨勢，三是流行毒株類型多。豬藍耳病近年出現(xiàn)感染反彈，感染毒株類型復(fù)雜，混合感染情況嚴重。從每個月的病原陽性檢出率來看，PCV2、PRRSV和HP-PRRSV在外觀健康豬群中一年四季均有一定的帶毒率，表明外觀健康豬群中存在主要疫病病原的帶毒感染，與目前國內(nèi)疫病的流行形勢一致[6-8]。豬偽狂犬病疫情呈上升趨勢，凈化存在一定難度[4，8]。FMDV在外觀健康豬群中仍有檢出，其中10月份有7份陽性，經(jīng)調(diào)查有可能與當(dāng)月屠宰場將不同豬群過夜混養(yǎng)造成相互感染有關(guān)。CSFV的陽性率為0，主要可能是多年來對豬瘟的強制免疫有效地控制了豬瘟疫情乃至可能一些場達到了免疫凈化[4]，但由于CSF已于2017年退出強制免疫，CSFV是否會再次在豬群中流行有待于長期監(jiān)測。從此次扁桃體檢出病原的季節(jié)分布來看，冬春季節(jié)健康豬群的病原帶毒率較高，具有一定的示病意義。