陸林其,計(jì)雪萍,任麗萍,浦海峰

(上海復(fù)旦大學(xué)中山醫(yī)院青浦分院 體檢中心,上海,201700)

胃癌的病因復(fù)雜，受多種遺傳因素、環(huán)境因素和誘發(fā)因素的影響[1-2]。在這些誘發(fā)因素中，慢性萎縮性胃炎、腸上皮化生和腸發(fā)育不良已經(jīng)被確認(rèn)為胃癌的癌前病變，是所有胃癌類(lèi)型中最常見(jiàn)的一種。血清胃蛋白酶原Ⅰ (PG-Ⅰ)和胃蛋白酶原Ⅰ/Ⅱ比值(PGR)是篩選萎縮性胃炎的生物標(biāo)志物。研究[3-4]表明，先采用胃蛋白酶原測(cè)試篩查健康人，再采用胃鏡檢查和活檢對(duì)早期胃癌的發(fā)現(xiàn)是非常有效的。早期胃癌患者通常無(wú)癥狀，并且手術(shù)切除后的5年生存率可達(dá)80%以上[5-9]。本研究探討PG-Ⅰ和PGR的2年連續(xù)測(cè)試的適用性，以及其在減少不必要的胃鏡檢查中的作用，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取上海青浦地區(qū)的7 274名普通參與者，年齡50～92歲，平均(63.5±18.1)歲;男3 470名，女3 804名。本研究方案經(jīng)上海市青浦區(qū)衛(wèi)計(jì)委審查委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 血清胃蛋白酶原測(cè)定

血清PG-Ⅰ和血清胃蛋白酶原Ⅱ(PG-Ⅱ)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定。PG-Ⅰ和PG-Ⅱ的ELISA測(cè)試使用2個(gè)特定的與PG-Ⅰ或PG-Ⅱ成對(duì)單克隆抗體。PG-Ⅰ ELISA與PG-Ⅱ和胃蛋白酶沒(méi)有交叉反應(yīng)，且PG-Ⅱ ELISA與PG-Ⅰ沒(méi)有交叉反應(yīng)。測(cè)定校準(zhǔn)器，控制和稀釋血清樣本，直接用于鏈霉親和素涂微量滴定板。生物素化的抗體和辣根過(guò)氧化物酶共軛添加示蹤抗體免疫測(cè)定反應(yīng)。在整個(gè)測(cè)定過(guò)程中只有1個(gè)板清洗步驟,PG-Ⅰ總培養(yǎng)時(shí)間是1 h 20 min,PG-Ⅱ?yàn)? h 20 min。為分析性能，分析敏感性定為0.1、0.5 ng/mL,測(cè)量動(dòng)態(tài)范圍為65～295 ng/mL。

血清PG-Ⅰ水平低于25 ng/mL提示可能出現(xiàn)萎縮性慢性胃炎，并認(rèn)為是陽(yáng)性結(jié)果。PG-Ⅰ水平>120 ng/mL及(或)PG-Ⅱ≥23 ng/mL提示可能的淺表胃炎對(duì)胃黏膜的損害。PGR低于3.1,PG-Ⅰ水平<41 ng/mL或PG-Ⅱ<25 ng/mL,被認(rèn)為是胃蛋白酶原檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性，并作為胃鏡檢查的另一個(gè)指標(biāo)。

1.3 其他測(cè)試

1.3.1 血清幽門(mén)螺桿菌抗體測(cè)試: 采用ELISA法測(cè)定。采用化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定法測(cè)定腫瘤糖類(lèi)抗原242(CA242)、糖類(lèi)抗原72-4(CA72-4)、糖類(lèi)抗原CA19-9(CA19-9)、癌胚抗原(CEA)等與癌癥相關(guān)的生物標(biāo)志物。進(jìn)行13C呼吸試驗(yàn)。

1.3.2 活檢標(biāo)本的胃鏡檢查和組織病理學(xué)檢查: 對(duì)于PG-Ⅰ和PGR測(cè)定結(jié)果為陽(yáng)性的患者，建議采用胃鏡檢查和活檢。采用Olympus GIF-HQ 290進(jìn)行胃鏡檢查和活檢，每份活檢標(biāo)本要在內(nèi)鏡下從不同顏色、不同性質(zhì)的區(qū)域選取5塊以上的樣本，或是在未觀察到病變的情況下隨機(jī)從胃竇、胃切跡、胃底選取樣本。標(biāo)本應(yīng)由2名有執(zhí)照的病理學(xué)醫(yī)師獨(dú)立評(píng)估。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 9.0 Package Facility進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。非參數(shù)檢驗(yàn)用于評(píng)估基于胃蛋白酶原水平的不同組間的差異。

2 結(jié) 果

2.1 2016年的血清PG-Ⅰ、PG-Ⅱ和PGR水平

2016年，共有464名受試者符合胃鏡檢查的標(biāo)準(zhǔn)，其中男217名，女247名。需要胃鏡隨訪的受試者占受試者總數(shù)的6.8%。有338名受試者(69.0%)PG-Ⅰ<25 ng/mL,154名受試者(31.0%)PG-Ⅰ水平在25～41 ng/mL,而PGR<3.1。有207名受試者(42%)PG-Ⅰ<25 ng/mL,PGR<3.1。其余131名受試者(27.0%)的PG-Ⅰ<25 ng/mL,但PGR≥3.1。見(jiàn)圖1。

圖1 2016年陽(yáng)性個(gè)體PG-Ⅰ與PGR的關(guān)系(n=464)

2.2 2017年血清PG-Ⅰ、PG-Ⅱ和PGR水平

2017年，共有636名受試者符合胃鏡檢查的標(biāo)準(zhǔn)，其中男317名，女319名。需要胃鏡檢查的受試者占總參與者的8.7%。586名(92.1%)受試者PG-Ⅰ<25 ng/mL。50名(7.9%)受試者PG-Ⅰ在25～41 ng/mL,PGR<3.1。此外,221名(34.8%)受試者的PG-Ⅰ<25 ng/mL,PGR<3.1。見(jiàn)圖2。進(jìn)一步分析表明，257名個(gè)體在2年內(nèi)胃蛋白酶原測(cè)試結(jié)果都為陽(yáng)性，總共有464個(gè)陽(yáng)性的受試者，占總體的58.0%。

圖2 2017年陽(yáng)性個(gè)體PG-Ⅰ與PGR的關(guān)系(n=636)

2.3 2016、2017年胃蛋白酶原試驗(yàn)結(jié)果分析

共有780名陽(yáng)性個(gè)體需要胃鏡檢查，在7 274名參與者中，綜合陽(yáng)性率為10.7%。為了比較2016、2017年的胃蛋白酶原測(cè)試陽(yáng)性結(jié)果，所有陽(yáng)性的受試者在基于2016年的PG-Ⅰ測(cè)試結(jié)果上被分為4組。A組的PG-Ⅰ水平<12 ng/mL,被認(rèn)為是強(qiáng)陽(yáng)性;B組為陽(yáng)性結(jié)果，PG-Ⅰ水平12～18 ng/mL;C組以PG-Ⅰ水平>18～25 ng/mL為輕度陽(yáng)性;D組為受試者PG-Ⅰ測(cè)試結(jié)果模糊，該測(cè)試結(jié)果>25～<41 ng/mL,PGR<3.1。4組資料見(jiàn)表1。在2016年中,A組95.6%受試者PGR<3.1,而B(niǎo)、C組的PGR陽(yáng)性率分別為72.1%、28.9%，均顯著低于A組(P<0.01)。

表1 4組2016、2017年胃蛋白酶原檢測(cè)結(jié)果比較

與2016年比較,**P<0.01。

2.4 4組血清PG-Ⅰ、PG-Ⅱ與PGR水平的關(guān)系

2017年，A組PG-Ⅰ陽(yáng)性受試者的PG-Ⅰ水平依舊保持陽(yáng)性，其中93.3%(84/90)的受試者PG-Ⅰ水平低于12 ng/mL。對(duì)于PG-Ⅰ水平超過(guò)12 ng/mL的6個(gè)受試者，其水平仍低于20 ng/mL。A組2017年P(guān)GR陽(yáng)性率為76.7%,顯著低于2016年95.6%(P<0.05)。B組69.1%的受試者PG-Ⅰ水平低于25 ng/mL,48.5%(33/68)的水平低于18 ng/mL。15名(22.1%)受試者的PG-Ⅰ水平下降到12 ng/mL以下。與2016年相比，PGR陽(yáng)性率顯著降低至25.0% (P<0.01)。C組34.3%(57/166)患者的PG-Ⅰ水平始終低于25 ng/mL。此外,7.2%(12/166)的受試者PG-Ⅰ水平低于18 ng/mL,5名受試者下降到12 ng/mL以下。PGR陽(yáng)性率顯著下降至4.8%(8/166)(P<0.01)。D組70.0%的受試者(98/140)保持PG-Ⅰ水平低于41 ng/mL,而25名(17.9%)受試者PG-Ⅰ水平下降到25 ng/mL以下。27名受試者(19.3%)的PGR低于3.1。見(jiàn)圖3。

A: PG-Ⅰ<12 ng/mL,n=90;B: PG-Ⅰ12～18 ng/mL,n=68;C: PG-Ⅰ>18～25 ng/mL,n=166;D: PG-Ⅰ>25～<41 ng/mL,n=140

圖34組PG-Ⅰ與PGR水平的關(guān)系

與胃蛋白酶原相比，其他生物標(biāo)志物測(cè)試的陽(yáng)性率有限。CA125陽(yáng)性1例,CA242陽(yáng)性7例,CA72-4陽(yáng)性9例,CA19-9陽(yáng)性2例,CEA陽(yáng)性10例。13C呼氣測(cè)試顯示180名受試者(28%)為陽(yáng)性。本研究中,16個(gè)胃蛋白酶原試驗(yàn)陽(yáng)性的受試者接受胃鏡檢查。除6例慢性萎縮性胃炎和3例腸化生外，還發(fā)現(xiàn)1例良性胃腺瘤和6例胃腺癌。在6例胃腺癌患者中,5例為早期階段(Ia期),1例為Ⅱ期。這6例癌癥患者中,4例PG-Ⅰ水平低于18 ng/mL,另2例為19.2 ng/mL,只有1例患者表現(xiàn)為PGR<3.1,同時(shí)CA 242和CEA呈弱陽(yáng)性，但CA 19-9、CA 72-4陰性。

3 討 論

胃蛋白酶原是一組由胃蛋白酶原Ⅰ(PG-Ⅰ)和胃蛋白酶原Ⅱ (PG-Ⅱ)組成的蛋白質(zhì)，它們都是由位于胃體和胃底的基底細(xì)胞以及頸黏液細(xì)胞產(chǎn)生的[10-14]。此外，在近端十二指腸的小腸腺和肛門(mén)的幽門(mén)腺中也產(chǎn)生PG-Ⅱ。胃蛋白酶原是一種酶，是胃蛋白酶的前體，是胃液中與食物消化有關(guān)的一種蛋白酶[15-16]。循環(huán)中胃蛋白酶原水平反映胃腺的分泌功能，特別是頸黏液細(xì)胞和主細(xì)胞;同時(shí)循環(huán)中胃蛋白酶原水平還依賴(lài)于胃底黏膜上皮細(xì)胞的完整性[17]。

本研究表明，具有強(qiáng)陽(yáng)性PG-Ⅰ水平(A組,PG-Ⅰ<25 ng/mL)的個(gè)體，在2016、2017年測(cè)試中均有一致的胃蛋白酶原測(cè)試結(jié)果。這類(lèi)人群可能患有嚴(yán)重的萎縮性慢性胃炎或腸上皮化生，并有很高的罹患胃癌的風(fēng)險(xiǎn)。Samloff等[18]研究發(fā)現(xiàn)胃蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ與胃黏膜相關(guān)，并將胃蛋白酶酶原的測(cè)試命名為血清胃黏膜活檢。Urita等[19]報(bào)道，低PG-Ⅰ水平和低PGR水平在腸上皮化生的患者中很常見(jiàn)。Kawai等[20]報(bào)道成功根除幽門(mén)螺桿菌后，血清胃蛋白酶原Ⅰ水平與組織學(xué)胃黏膜萎縮程度具有相關(guān)性。