柳文軍，李?lèi)?ài)堂，喻明曦，王津津，李欣苗，樊良帥

（1.東鄉(xiāng)族自治縣農(nóng)牧局河灘鎮(zhèn)農(nóng)技站，甘肅 東鄉(xiāng) 731400；2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，甘肅 蘭州730070）

柴胡（Bupleurum chinense DC.）為傘形科多年生草本植物，藥材名為柴胡，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品［1］。柴胡味辛、苦，性微寒，歸肝、膽、肺經(jīng)，具有疏散退熱、疏肝解郁、升舉陽(yáng)氣、抗病毒感染、抗?jié)?、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)和保肝等多種作用，素有“良藥中良藥”之稱(chēng)［2-7］。我國(guó)人工栽培的柴胡，長(zhǎng)期以來(lái)無(wú)新品種，家種柴胡主要靠自留種，各地農(nóng)家栽培類(lèi)型構(gòu)成了家種柴胡的品種來(lái)源［8］。近年來(lái)，由于天然野生柴胡被無(wú)限采挖，導(dǎo)致全國(guó)柴胡產(chǎn)量急劇下降。隨著對(duì)柴胡藥理作用研究的不斷深入，特別是柴胡產(chǎn)品的進(jìn)一步的開(kāi)發(fā)利用，使柴胡的市場(chǎng)需求量逐年增加。但柴胡以種子繁殖，發(fā)芽率極低，發(fā)芽過(guò)程所需時(shí)間長(zhǎng)，造成種子發(fā)霉從而失去發(fā)芽力，即使萌發(fā)，出苗率也不整齊。種子直接影響播種出苗和幼苗的健壯程度，進(jìn)而影響藥材產(chǎn)量和質(zhì)量，極大的限制了柴胡的人工栽培［9-11］。我們以柴胡種子為研究對(duì)象，研究不同處理方法對(duì)柴胡種子發(fā)芽率的影響，以期為柴胡種子發(fā)芽率的研究及柴胡人工栽培和育種提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試材料為甘肅省主栽的二年生柴胡種子，甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院中草藥栽培與鑒定系鑒定為柴胡（Bupleurum chinense DC.）種子。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)于2016年3—4月在甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)中草藥栽培與鑒定實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。選取籽粒飽滿、無(wú)病蟲(chóng)害的柴胡種子，用蒸餾水洗凈，去癟，用70%乙醇將種子浸泡消毒處理，再進(jìn)行自來(lái)水浸種、沙藏處理及6-BA、赤霉素、H2O2和KMnO4藥劑處理（表1）。將處理后的柴胡種子均勻地?cái)[放到鋪有濾紙的培養(yǎng)皿中，每皿50粒，加蓋，貼上標(biāo)簽，重復(fù)3次，放入人工氣候箱中培養(yǎng)，溫度控制在20℃，試驗(yàn)過(guò)程中保持濾紙濕潤(rùn)，觀察記錄柴胡種子發(fā)芽情況。以種子露白為發(fā)芽標(biāo)準(zhǔn)，每間隔24 h統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)1次。

發(fā)芽率=（正常發(fā)芽種子數(shù)/供試種子數(shù)）×100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 自來(lái)水浸泡時(shí)間對(duì)柴胡種子發(fā)芽率的影響

由表2可知，柴胡種子在發(fā)芽試驗(yàn)第14 d時(shí)，a3和a4發(fā)芽率最高，均為28.67%，較CK增加了0.67百分點(diǎn)；a2發(fā)芽率最低，為15.33%，較CK降低了12.67百分點(diǎn)。在第28 d，a4發(fā)芽率最高，為30.67%，較CK增加了0.67百分點(diǎn)；a2發(fā)芽率最低，為17.33%，較CK降低了12.67百分點(diǎn)。且隨著時(shí)間增加，除a1外其余各處理的柴胡種子發(fā)芽率均有一定程度的增加，但增加幅度較小。

表1 柴胡種子處理方法

2.2 不同濃度H2O2對(duì)柴胡種子發(fā)芽率的影響

由表3可知，在第14 d和第28 d，用不同濃度H2O2浸泡處理的柴胡種子發(fā)芽率均低于CK。其中，處理為b1最高，分別為14.00%和16.00%；其次為b2，最低的是b3。由此可知，在相同浸泡時(shí)間下，柴胡種子的發(fā)芽率隨著H2O2濃度的升高而降低。

表2 自來(lái)水浸泡時(shí)間對(duì)柴胡種子發(fā)芽率的影響①

2.3 不同濃度KMnO4對(duì)柴胡種子發(fā)芽率的影響

由表4可知，經(jīng)不同濃度KMnO4浸泡處理的柴胡種子發(fā)芽率不同。處理后第14 d，不同濃度KMnO4浸泡的柴胡種子發(fā)芽率均低于CK，分別較CK降低8.00、9.33、12.67、4.00百分點(diǎn)；在第28 d，除c4較CK增加1.33百分點(diǎn)外，其余各處理分別較CK降低4.67、2.67、10.00百分點(diǎn)。不同濃度KMnO4浸泡的柴胡種子，第14 d和第28 d發(fā)芽率最高的均為c4處理，分別為24.00%和31.33%，與CK相比分別增加了-4.00、1.33百分點(diǎn)。同一濃度KMnO4浸泡處理的柴胡種子隨時(shí)間的增加發(fā)芽率提高，其中，c1、c2、c3和c4處理在第28 d其發(fā)芽率較第14 d分別增加5.33、8.66、4.67、7.33百分點(diǎn)。

2.4 不同濃度6-BA對(duì)柴胡種子發(fā)芽率的影響

用不同濃度的6-BA對(duì)柴胡種子浸泡處理24 h后觀察發(fā)現(xiàn)，柴胡種子沒(méi)有發(fā)芽，這可能與6-BA的濃度有關(guān)。成丹［12］等人研究發(fā)現(xiàn)，6-BA濃度低時(shí)促進(jìn)種子發(fā)芽，濃度過(guò)高時(shí)抑制種子發(fā)芽。出現(xiàn)這一結(jié)果可能是浸泡柴胡種子的6-BA濃度過(guò)高，嚴(yán)重抑制了種子的發(fā)芽。

2.5 不同濃度赤霉素對(duì)柴胡種子發(fā)芽率的影響

由表5可知，在處理后第14 d，未進(jìn)行加熱的赤霉素濃度不同對(duì)柴胡種子發(fā)芽情況影響不同，但各處理均低于CK。其中，在e1和e3處理下種子未見(jiàn)發(fā)芽；其次是e2，為1.33%。用加熱到100℃的不同濃度的赤霉素浸種，隨濃度的增加發(fā)芽率提高。其中e6最大，為30.00%，高于CK，較CK高2.00百分點(diǎn)。e3未見(jiàn)發(fā)芽，e5低于CK，較CK低10.00百分點(diǎn)。

在處理后第28 d，未進(jìn)行加熱的赤霉素在e2處理下，發(fā)芽率最高，其次依次為e3、e1，但均低于CK；加熱到100℃的不同濃度的赤霉素，隨赤霉素濃度的增加發(fā)芽率提高，其中，e6處理下高于CK，較CK高2.00百分點(diǎn)。其余各處理下均低于CK，其中e4未見(jiàn)發(fā)芽，e5較CK低2.67百分點(diǎn)。

表3 H2O2浸泡對(duì)柴胡種子發(fā)芽率的影響

表4 KMnO4浸泡對(duì)柴胡種子發(fā)芽率的影響

表5 赤霉素浸泡對(duì)柴胡種子發(fā)芽率的影響

表6 沙藏對(duì)柴胡種子發(fā)芽率的影響

在相同濃度下，不同加熱處理的赤霉素對(duì)柴胡種子發(fā)芽率的影響，除e1和e4均未見(jiàn)發(fā)芽，其余各濃度下加熱處理的均高于未加熱的。其中在處理后第14 d，e5較e2高16.67百分點(diǎn)，e6較e3高30.00百分點(diǎn)；在處理后第28 d，e5較e2高26.00百分點(diǎn)，e6較e3高31.33百分點(diǎn)。隨發(fā)芽時(shí)間的增加，除e1和e4發(fā)芽率無(wú)變化外，其余各處理發(fā)芽率均增大。

由此可知，用未加熱的赤霉素浸泡處理，對(duì)柴胡種子的萌發(fā)有不同程度的抑制作用；用加熱到100℃的赤霉素浸泡處理，隨著赤霉素濃度的增加，柴胡種子發(fā)芽率提高。

2.6 沙藏處理對(duì)柴胡種子發(fā)芽率的影響

由表6可以看出，沙藏處理后的柴胡種子發(fā)芽率低于CK，處理后第14 d發(fā)芽率僅為8.00%。第28 d后發(fā)芽率僅為10.00%，較CK均降低了20.00百分點(diǎn)。由此可知，沙藏處理后的柴胡種子發(fā)芽率較CK有大幅度的降低。

3 小結(jié)與討論

對(duì)柴胡種子進(jìn)行自來(lái)水浸種、沙藏處理及6-BA、赤霉素、H2O2和KMnO4藥劑處理后進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)，從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，不同處理對(duì)柴胡種子的發(fā)芽率有較大影響。柴胡種子經(jīng)自來(lái)水浸泡隨浸泡時(shí)間的延長(zhǎng)，發(fā)芽率升高，H2O2、6-BA、沙藏對(duì)柴胡種子發(fā)芽有抑制作用。適宜濃度的KMnO4和赤霉素對(duì)柴胡種子發(fā)芽有促進(jìn)作用。其中，用加熱100℃的60 mg/L赤霉素浸泡24 h，柴胡種子發(fā)芽率優(yōu)于其他處理，發(fā)芽率為32.00%；用自來(lái)水浸泡48 h的次之，為30.67%；用6-BA處理過(guò)的粒柴胡種子均未發(fā)芽，究其原因，可能是6-BA濃度太大，抑制了柴胡種子的發(fā)芽。