胡雪艷,彭 濤,陳 輝,王雯雯

(1.中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院,北京 100176; 2.安捷倫科技有限公司,北京 100102)

近年來(lái),我國(guó)的茶葉產(chǎn)業(yè)得到了很大發(fā)展,茶葉出口國(guó)家和地區(qū)已經(jīng)達(dá)到120余個(gè),出口的茶葉品種不斷增加。目前,我國(guó)茶葉出口主要有歐盟、美國(guó)、日本等國(guó)際市場(chǎng),其中歐盟和日本作為我國(guó)茶葉出口兩大主要市場(chǎng),均對(duì)茶葉制定了非常苛刻的農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn),截止到2015年7月,歐盟和日本對(duì)茶葉中農(nóng)藥殘留最大限量(MRL)都做了嚴(yán)格的規(guī)定,其中歐盟459種,日本240種[1-2]。茶葉出口的農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)的不斷提高,直接影響了中國(guó)茶葉出口的數(shù)量。本文研究的10種農(nóng)藥是FAPAS茶葉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(19184)能力測(cè)試樣品中含有的農(nóng)藥,歐盟和日本肯定列表中均對(duì)MRL做了嚴(yán)格限量,如歐盟規(guī)定了啶蟲脒、溴氰菊酯、樂(lè)果、吡蟲啉、高效氯氟氰菊酯、滅多威、p,p′-滴滴伊、甲基嘧啶磷、腐霉利、噠螨靈的MRL分別為0.05、5、0.05、0.05、1、0.1、0.2、0.05、0.05、0.05 mg/kg。從2012年起至2015年初,歐盟食品飼料快速預(yù)警系統(tǒng)(RASFF)通報(bào)顯示,我國(guó)出口歐洲的6批茶葉產(chǎn)品因農(nóng)藥殘留超標(biāo)被歐盟成員國(guó)通報(bào)[3]。而我國(guó)在2013年3月1日實(shí)施《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》(GB 2763-2012)之前,對(duì)茶葉的農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)只有9種,GB 2763-2012實(shí)施后涉及茶葉中農(nóng)藥殘留25項(xiàng),其中部分指標(biāo)與日本的殘留限量對(duì)比,我國(guó)的限量要求更為嚴(yán)格(除殺螟硫磷指標(biāo)限量),說(shuō)明我國(guó)與世界的限量標(biāo)準(zhǔn)在一步步的接軌中。但在我國(guó),真正把茶葉農(nóng)藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)的政策措施落到實(shí)處還有很長(zhǎng)的一段路要走。因而,探索上述農(nóng)藥的快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)方法十分必要。

本文研究的10種農(nóng)藥均是在茶葉種植過(guò)程中經(jīng)常使用的農(nóng)藥,目前,國(guó)內(nèi)外涉及上述10種農(nóng)藥的檢測(cè)方法主要有氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(GC-MS/MS)[4-8]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)[9-14]、GC-MS[15-16]等。Tomas等[7]采用茶葉水化后,液液萃取的前處理方式,建立了茶葉中135種農(nóng)藥的GC-MS/MS檢測(cè)方法;Chen等[9]采用改進(jìn)的QuEChERS前處理方式,建立了茶葉中65種農(nóng)藥的LC-MS/MS檢測(cè)方法;賈瑋等[14]采用改進(jìn)的QuEChERS前處理方式,樣品經(jīng)乙腈直接提取,建立了茶葉中290種農(nóng)藥的LC-MS/MS檢測(cè)方法,以上這些方法檢測(cè)農(nóng)藥數(shù)量雖然較多,但均未能同時(shí)包含這10種農(nóng)藥的測(cè)定。提取方法方面,以上文獻(xiàn)均未考察過(guò)浸泡提取對(duì)農(nóng)藥提取效率的影響。本方法針對(duì)FAPAS茶葉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(19184)能力測(cè)試樣品中含有的10種農(nóng)藥在檢測(cè)中存在的問(wèn)題,并參考GB/T 23204-2008[17]和GB/23200.13-2016[18]方法,對(duì)茶葉實(shí)際樣品中存在的10種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)進(jìn)行了優(yōu)化。檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)提取過(guò)程如果采用直接均質(zhì)提取無(wú)法達(dá)到最佳的提取效率,于是對(duì)浸泡提取時(shí)間進(jìn)行了優(yōu)化。由于茶葉樣品基質(zhì)復(fù)雜,本文采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)降低基質(zhì)對(duì)準(zhǔn)確定量的干擾。本實(shí)驗(yàn)對(duì)茶葉中農(nóng)藥殘留實(shí)際的檢測(cè)工作具有一定的指導(dǎo)意義。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

啶蟲脒(acetamiprid)、溴氰菊酯(deltamethrin)、樂(lè)果(dimethoate)、吡蟲啉(imidacloprid)、高效氯氟氰菊酯(lambda-cyhalothrin)、滅多威(methomyl)、p,p′-滴滴伊(p,p′-滴滴伊)、甲基嘧啶磷(pirimiphos-methyl)、腐霉利(procymidone)、噠螨靈(pyridaben)標(biāo)準(zhǔn)品(純度均大于95%) 德國(guó)Dr.Ehrenstorfer公司;乙腈、甲苯(均為色譜純) 美國(guó)Honeywell公司;甲酸(純度大于96%) 美國(guó)MREDA公司;Cleanert TPT固相萃取小柱(2 g/12 mL) 天津博納艾杰爾科技有限公司;所測(cè)定的茶葉樣品為茶葉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(編號(hào):19184,白茶)及其空白茶葉 北京中檢維康技術(shù)有限公司。

Agilent 1290-6460液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀(配有電噴霧電離源) 美國(guó)Agilent公司;Agilent 7890A-7000B氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀(配有電子轟擊電離源) 美國(guó)Agilent公司;T25均質(zhì)器 德國(guó)IKA公司;N-EVAP-112型氮吹儀 美國(guó)Organomation公司;R-215旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 瑞士Buchi公司;KDC-40離心機(jī) 中國(guó)中佳公司;SYNER型超純水發(fā)生器 美國(guó)Millipore公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 對(duì)照品溶液制備 溴氰菊酯為溶于丙酮中濃度為0.1022 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液,其他9種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品為固體,分別準(zhǔn)確稱量9種固體農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品,均用甲醇配制成濃度約為1.0 mg/mL的單一標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液;將10種農(nóng)藥配制成濃度為5 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,于1～4 ℃下冷藏避光保存。磷酸三苯酯(triphenyl phosphate,TPP)為氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定樣品的內(nèi)標(biāo),用甲醇配制成濃度為5 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液,于1～4 ℃下冷藏避光保存。

1.2.2 茶葉中農(nóng)藥的提取 參考GB/T 23204-2008[17]和GB/T 23205-2008[18]方法,增加了浸泡提取步驟,稱取2 g茶葉樣品(精確到0.01 g),至80 mL離心管中,分別加入15 mL乙腈,浸泡1 h;15000 r/min均質(zhì)提取1 min;低速離心機(jī)離心5 min(4200 r/min);將上清液轉(zhuǎn)至150 mL雞心瓶中;重復(fù)上述提取步驟,合并兩次提取上清液;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(45 ℃,40 r/min)至約2 mL,待凈化。

1.2.3 茶葉樣品的凈化

1.2.3.1 LC-MS/MS測(cè)定凈化方法 活化Clearn-TPT柱(柱頂部填入約2 cm高的無(wú)水Na2SO4,5 mL乙腈-甲苯(3∶1,v/v)溶液淋洗兩次),棄去流出液,下接80 mL雞心瓶,放入固定架上待用;將1.2.1中待凈化濃縮提取液移至TPT柱中,2 mL乙腈-甲苯(3∶1,v/v)溶液洗滌雞心瓶3次,25 mL乙腈-甲苯(3∶1,v/v)洗脫;待所有液體收集完畢之后,取下雞心瓶;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(45 ℃,70 r/min)至約0.5 mL;于35 ℃水浴中用氮?dú)獯蹈?殘?jiān)? mL乙腈-0.1%甲酸水溶液(2∶8,v/v)超聲波溶解,經(jīng)0.22 μm微孔過(guò)濾膜,濾液供LC-MS/MS測(cè)定。

1.2.3.2 GC-MS/MS測(cè)定凈化方法 活化Clearn-TPT柱(柱頂部填入約2 cm高的無(wú)水Na2SO4,5 mL乙腈-甲苯(3∶1,v/v)溶液淋洗兩次),棄去流出液,下接80 mL雞心瓶,放入固定架上待用;將1.2.1中待凈化濃縮提取液移至TPT柱中,2 mL乙腈-甲苯(3∶1,v/v)溶液洗滌雞心瓶3次,25 mL乙腈-甲苯(3∶1,v/v)洗脫;待所有液體收集完畢之后,取下雞心瓶;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(45 ℃,70 r/min)至約0.5 mL,加入40 μL磷酸三苯酯,于35 ℃水浴中用氮?dú)獯蹈?殘?jiān)? mL正已烷超聲波溶解,經(jīng)0.22 μm微孔過(guò)濾膜,濾液供GC-MS/MS測(cè)定。

1.2.4 基質(zhì)效應(yīng)計(jì)算 對(duì)于基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià),本文采用了較為常用的相對(duì)響應(yīng)值法:基質(zhì)效應(yīng)(%)=B/A×100[19],A為純?nèi)軇┲修r(nóng)藥的響應(yīng)值;B為樣品基質(zhì)中添加相同濃度農(nóng)藥的響應(yīng)值。

1.3 檢測(cè)條件

1.3.1 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜條件 色譜柱:Agilent ZORBAX SB-C18柱(100 mm×2.1 mm,3.5 μm);柱溫:40 ℃;進(jìn)樣量:10 μL。流動(dòng)相A:0.1%甲酸水溶液;流動(dòng)相B:乙腈;流速為0.4 mL/min。梯度洗脫程序:0～3.0 min,1% B～30% B;3.0～6.0 min,30% B～40% B;6.0～9.0 min,40% B;9.0～15.0 min,40% B～60% B;15.0～19.0 min,60% B～99% B;19.0～23.0 min,99% B;23.0～23.01 min,99% B～1% B;23.01～27.0 min,1% B。電離模式:電噴霧離子化,正離子模式;霧化氣(氮?dú)?壓力:0.28 MPa;離子噴霧電壓:4000 V;干燥氣(氮?dú)?溫度:350 ℃;干燥氣流速:10 L/min;采集數(shù)據(jù)方式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)。目標(biāo)化合物的離子對(duì)、碰撞電壓等多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)參數(shù)見表1。

表1 LC-MS/MS測(cè)定6種農(nóng)藥的保留時(shí)間、離子對(duì)、碰撞能量、碎裂電壓Table 1 Retention times,ion pairs,collision energies and fragmentation of six pesticides for LC-MS/MS

1.3.2 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜條件 色譜柱:Agilent DB-1701毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);載氣為高純氦氣(純度99.999%);流速1.2 mL/min;柱溫起始溫度40 ℃,保持1 min,以30 ℃/min速率升溫到130 ℃,以5 ℃/min速率升溫到250 ℃,以10 ℃/min速率升溫到300 ℃,保持5 min;進(jìn)樣方式為不分流,0.75 min后打開分流閥,進(jìn)樣量1 μL,進(jìn)樣口溫度290 ℃,傳輸線溫度280 ℃。電離模式:電子轟擊電離源(EI);離子源極性：正極性;電離能量:70 eV;離子源溫度:230 ℃;溶劑延遲時(shí)間:6 min;采集數(shù)據(jù)方式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)。目標(biāo)化合物的離子對(duì)、碰撞電壓等多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)參數(shù)見表2。

表2 GC-MS/MS測(cè)定7種農(nóng)藥的保留時(shí)間、離子對(duì)、碰撞能量Table 2 Retention times,ion pairs and collision energies of seven pesticides for GC-MS/MS

2 結(jié)果與分析

2.1 浸泡時(shí)間對(duì)農(nóng)藥提取效率影響的考察

茶葉樣品中加入一定量乙腈溶劑,但在茶葉實(shí)際樣品檢測(cè)過(guò)程,由于樣品均為茶葉粉末,加入乙腈提取液后立即均質(zhì)提取,無(wú)法充分提取農(nóng)藥殘留,本文著重考察了本方法中GC-MS/MS測(cè)定的7種農(nóng)藥在乙腈浸泡提取時(shí)間下農(nóng)藥殘留的提取效率影響。

實(shí)驗(yàn)中采用含有溴氰菊酯、樂(lè)果、高效氯氟氰菊酯、p,p′-滴滴伊、甲基嘧啶磷、腐霉利和噠螨靈的茶葉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(編號(hào):19184,白茶)做浸泡提取效率實(shí)驗(yàn),GC-MS/MS進(jìn)行測(cè)定,對(duì)浸泡時(shí)間進(jìn)行了優(yōu)化。取7份陽(yáng)性樣品,加入乙腈提取溶劑,分別在0、30、60、120、180、240 min和浸泡過(guò)夜12 h后均質(zhì)提取,提取含量相對(duì)于0 min時(shí)的相對(duì)含量值和時(shí)間關(guān)系見圖1。結(jié)果可見,和未浸泡組比，乙腈浸泡30 min,溴氰菊酯、樂(lè)果、高效氯氟氰菊酯、甲基嘧啶磷和噠螨靈提取效率顯著提高;從30～60 min,除溴氰菊酯的提取效率與浸泡30 min提取效率相比有所下降,其他6種農(nóng)藥在60 min提取效率均有明顯提高,除了溴氰菊酯和p,p′-滴滴伊,另外5種農(nóng)藥在60 min時(shí)提取效率最高;茶葉樣品浸泡60 min均質(zhì)提取與直接均質(zhì)提取相比，茶葉陽(yáng)性樣品中的7種農(nóng)藥的含量均有較大提高,綜合考慮時(shí)間成本和提取效率,故本方法選擇乙腈浸泡60 min后均質(zhì)提取。本文針對(duì)文章中研究的7種農(nóng)藥提取效率進(jìn)行優(yōu)化,FAPAS能力驗(yàn)證樣品中含有的農(nóng)藥多為茶葉樣品常檢出農(nóng)藥,所以針對(duì)樣品農(nóng)藥的提取效率進(jìn)行優(yōu)化,對(duì)實(shí)際的檢測(cè)工作會(huì)有一定的指導(dǎo)意義。

2.2 LC-MS/MS測(cè)定樣品定容液的優(yōu)化

在用LC-MS/MS對(duì)FAPAS茶葉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(19184)進(jìn)行測(cè)試的過(guò)程中發(fā)現(xiàn),樣品定容液的選擇對(duì)LC-MS/MS測(cè)定農(nóng)藥的色譜峰形有一定的影響,特別是對(duì)極性較大農(nóng)藥的峰形有較大的影響。本文分別比較了乙腈-0.1%甲酸水溶液(2∶8,v/v)(a)、乙腈-0.1%甲酸水溶液(3∶2,v/v)(b)和乙腈-水(3∶2,v/v)(c)三種不同組成的定容液對(duì)啶蟲脒、樂(lè)果、吡蟲啉和滅多威這四種極性較大目標(biāo)農(nóng)藥分離效果,四種農(nóng)藥的保留時(shí)間在2.90～4.07 min(見表1)。從圖2可見,定容液對(duì)保留時(shí)間在2.90～4.07 min的大極性農(nóng)藥的峰形具有顯著的影響,使用乙腈-0.1%甲酸水溶液(3∶2,v/v)(b)和乙腈-水(3∶2,v/v)(c)的定容液溶解樣品時(shí),保留時(shí)間在2.90～4.07 min出峰的農(nóng)藥,峰形較差,出現(xiàn)分叉峰。分析原因,可能是溶劑效應(yīng)造成,由于樣品溶劑為乙腈-0.1%甲酸水溶液(3∶2,v/v)和乙腈-水(3∶2,v/v)時(shí)溶劑的洗脫性太強(qiáng),會(huì)導(dǎo)致樣品溶液與流動(dòng)相混合時(shí),一部分樣品隨樣品溶劑穿透分析柱(沒(méi)有疏水保留),另一部分樣品混入流動(dòng)相,在分析柱上有保留,而本方法采用梯度洗脫的方式(見1.3.1梯度洗脫程序),在2.90～4.07 min流動(dòng)相為乙腈-水(3∶7～2∶3,v/v)之間,定容液的極性與流動(dòng)相極性相差較大,產(chǎn)生溶劑效應(yīng),可能是導(dǎo)致峰形變差的原因。而乙腈-0.1%甲酸水(2∶8,v/v)定容液極性與2.90～4.07 min流動(dòng)相極性較接近,不會(huì)產(chǎn)生明顯的溶劑效應(yīng),樣品峰形良好,故本文方法LC-MS/MS選擇乙腈-0.1%甲酸水(2∶8,v/v)作為定容液。

圖2 4種農(nóng)藥在3種不同定容液下MRM譜圖Fig.2 MRM chromatograms of four pesticides in three different solution注:a:定容液為乙腈-0.1%甲酸水溶液(2∶8,v/v);b:定容液為乙腈-0.1%甲酸水溶液(3∶2,v/v);c:定容液為乙腈-水(3∶2,v/v)。

2.3 基質(zhì)效應(yīng)

在GC-MS/MS和LC-MS/MS分析中,由于茶葉樣品基質(zhì)成分的存在,基質(zhì)效應(yīng)的存在不可避免。本次研究配制了50 μg/kg的茶葉基質(zhì)的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液以及同濃度的溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別對(duì)兩種儀器的基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行考察?；|(zhì)效應(yīng)值在80%以下視為強(qiáng)基質(zhì)抑制效應(yīng),在80%～120%之間視為弱基質(zhì)效應(yīng),在120%以上視為強(qiáng)基質(zhì)增加效應(yīng)。通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),兩臺(tái)儀器測(cè)定的農(nóng)藥都表現(xiàn)出基質(zhì)效應(yīng)的影響,結(jié)果見圖3。由于基質(zhì)效應(yīng)明顯,實(shí)驗(yàn)采用基質(zhì)匹配校準(zhǔn)曲線對(duì)樣品中的農(nóng)藥進(jìn)行了定量分析,用以抵消基質(zhì)效應(yīng)的影響。

圖3 兩種方法測(cè)定茶葉中農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)評(píng)價(jià)Fig.3 Evaluation of matrix effects of pesticide in tea with the two methods

2.4 線性關(guān)系和定量限

按照1.2.1節(jié)方法處理陰性樣品,獲得空白基質(zhì)樣品。取不同體積的5 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,加入空白基質(zhì)樣品中,按照1.2.3的定容方法分別定容液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜和氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)樣品。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜結(jié)果顯示,滅多威在10～200 μg/L,腐霉利在50～200 μg/L,其余4種在5～100 μg/L范圍內(nèi)呈現(xiàn)較好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)大于0.995(見表3),以信噪比(S/N)大于10且回收率和精密度較好的濃度點(diǎn)確定定量限(LOQ),其中滅多威為10 μg/kg,腐霉利為50 μg/kg,其余4種農(nóng)藥的LOQ為5 μg/kg。圖4為空白基質(zhì)中添加6種目標(biāo)農(nóng)藥的MRM譜圖,質(zhì)量濃度均為各自的LOQ濃度。

表3 LC-MS/MS測(cè)定的6種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍、相關(guān)系數(shù)、添加回收率、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和LOQTable 3 Linear equations,linear ranges,correlation coefficients(R2),recoveries,precisions (relative standard deviations,RSDs)and LOQs of six pesticides for LC-MS/MS

圖4 LC-MS/MS測(cè)定的6種農(nóng)藥的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的MRM譜圖Fig.4 MRM chromatograms of a matrix-matched standard solution of six pesticides for LC-MS/MS

氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜結(jié)果顯示,溴氰菊酯在50～500 μg/kg,其余6種在10～300 μg/kg范圍內(nèi)呈現(xiàn)較好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)大于0.996(見表4),以信噪比(S/N)大于10且回收率和精密度較好的濃度點(diǎn)確定定量限(LOQ),其中溴氰菊酯為50 μg/kg,樂(lè)果和高效氯氟氰菊酯為10 μg/kg,噠螨靈為5 μg/kg,其他3種農(nóng)藥為0.5 μg/kg。圖5為空白基質(zhì)中添加內(nèi)標(biāo)TPP和7種目標(biāo)農(nóng)藥的MRM譜圖,質(zhì)量濃度均為各自的LOQ濃度。

表4 GC-MS/MS測(cè)定的7種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍、相關(guān)系數(shù)、添加回收率、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和LOQTable 4 Linear equations,linear ranges,correlation coefficients(R2),recoveries,precisions (relative standard deviations,RSDs)and LOQs of seven pesticides for GC-MS/MS

圖5 GC-MS/MS測(cè)定的7種農(nóng)藥及內(nèi)標(biāo)的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的MRM譜圖Fig.5 MRM chromatograms of a matrix-matched standard solution of seven pesticides and internal standards for GC-MS/MS

2.5 回收率和精密度

在空白茶葉樣品中分別添加10、50、100 μg/kg 3個(gè)濃度水平的目標(biāo)物進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn),液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法的回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)見表3;在陰性茶葉樣品中分別添加10、50、300 μg/kg 3個(gè)濃度水平的目標(biāo)物進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn),氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法的回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)見表4。

其中,樂(lè)果、甲基嘧啶磷和腐霉利三種農(nóng)藥GC-MS/MS和LC-MS/MS兩種測(cè)定方法均能檢測(cè),對(duì)兩種測(cè)定方法檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)和偏差評(píng)估,檢測(cè)結(jié)果比較見表5。

表5 GC-MS/MS和LC-MS/MS共檢農(nóng)藥結(jié)果比較Table 5 Comparison of the results of common detection of pesticides by GC-MS/MS and LC-MS/MS

從表5可以看出，兩種測(cè)定方法能夠共檢的3種農(nóng)藥測(cè)定值的RSD均小于7.1%,說(shuō)明兩種方法測(cè)定結(jié)果具有可比性和良好的一致性。

2.6 實(shí)際應(yīng)用

將所建立的方法應(yīng)用于FAPAS茶葉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(19184)的能力測(cè)試,準(zhǔn)確測(cè)定出本方法能夠測(cè)定的8種農(nóng)藥并進(jìn)行了準(zhǔn)確定量,結(jié)果見表6。

表6 FAPAS茶葉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(19184)能力測(cè)試結(jié)果Table 6 Test results for FAPAS tea standard substance(19184)

3 結(jié)論

本文方法對(duì)茶葉樣品在不同浸泡時(shí)間下農(nóng)藥提取效率進(jìn)行了比較,通過(guò)乙腈浸泡提取時(shí)間的優(yōu)化,更加有效、完全地提取殘留的農(nóng)藥,對(duì)本文中所研究的大部分農(nóng)藥浸泡提取取得了較好的效果;通過(guò)對(duì)LC-MS/MS測(cè)定樣品定容液的優(yōu)化,改善了極性較大農(nóng)藥的峰形。本文建立了茶葉中啶蟲脒、樂(lè)果、吡蟲啉、滅多威、甲基嘧啶磷、腐霉利共6種農(nóng)藥殘留的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)測(cè)定方法和溴氰菊酯、樂(lè)果、高效氯氟氰菊酯、p,p′-滴滴伊、甲基嘧啶磷、腐霉利、噠螨靈共7種農(nóng)藥殘留的氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(GC-MS/MS)測(cè)定方法。該方法完善了茶葉中10種農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法針對(duì)實(shí)際樣品的檢測(cè),將建立的方法應(yīng)用于FAPAS茶葉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(19184)的能力測(cè)試,對(duì)該測(cè)試含有的8種農(nóng)藥進(jìn)行了準(zhǔn)確的定性和定量。雖然本次FAPAS驗(yàn)證提供的茶葉樣品為白茶,但乙腈浸泡提取時(shí)間的優(yōu)化主要針對(duì)茶葉里含有的農(nóng)藥,不同茶葉在基質(zhì)效應(yīng)上會(huì)存在一定差異,但對(duì)農(nóng)藥的提取效率是會(huì)有改善的。所以本文優(yōu)化出的浸泡提取時(shí)間針對(duì)所研究的農(nóng)藥,在不同茶葉中均會(huì)有一定的參考價(jià)值。