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1.廣西壯族自治區(qū)中醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 530022；2. 廣西中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530022

馬蹄蕨別名觀音座蓮、牛蹄勞，為觀音座蓮屬植物福建觀音座蓮AngiopterisFokiensisHieron.的根莖，主要分布在福建、廣東、廣西、貴州、湖北等地，具有涼血止血、收斂消腫等功效，主要用于腸炎、淋巴結(jié)腫大、風(fēng)熱咳嗽、月經(jīng)過(guò)多、功能性子宮出血、風(fēng)濕骨痛、毒蛇咬傷、癰瘡腫毒等[1]。馬蹄蕨主要成分為黃酮類、有機(jī)酸類、甾體類及變型二肽類化合物，具有較強(qiáng)的抗氧化活性[2-4]。目前未見(jiàn)馬蹄蕨質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的報(bào)道，筆者主要對(duì)馬蹄蕨藥材性狀、顯微鑒別、薄層鑒別、水分、灰分和浸出物等進(jìn)行系統(tǒng)研究，為系統(tǒng)評(píng)價(jià)馬蹄蕨質(zhì)量提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 LY-HPCCD 萬(wàn)能視頻成像裝置(成都勵(lì)揚(yáng)精密機(jī)電有限公司)；XS-205分析天平(梅特勒托利多儀器有限公司)；SX2-2.5-10馬弗爐(沈陽(yáng)市節(jié)能電爐廠)；DFY-500高速萬(wàn)能粉碎機(jī)(溫嶺市林大機(jī)械有限公司)。

1.2 試藥 馬蹄蕨采自廣西百色、南寧等地(見(jiàn)表1)，經(jīng)本院黃云峰副研究員鑒定為觀音座蓮屬植物福建觀音座蓮的根狀莖。對(duì)照藥材(自制，編號(hào)MTJ-1，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)韋松基教授和廣西中醫(yī)藥研究院賴茂祥研究員鑒定為觀音座蓮屬植物福建觀音座蓮AngiopterisFokiensisHieron.)。所用試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀鑒別 本品呈塊狀，馬蹄形，一面稍平整，有縱皺紋，另一面隆起，有皺縮的葉柄殘痕，寬4～8 cm，長(zhǎng)5～10 cm，表面黑褐色或灰褐色，粗糙，質(zhì)堅(jiān)韌，不易折斷。切面灰白色，可見(jiàn)棕褐色散列的維管束，中部分布較多。氣微，味微苦澀。

表1 馬蹄蕨樣品信息

2.2 顯微鑒別

2.2.1 根莖橫切面 表皮細(xì)胞1列，下皮細(xì)胞數(shù)列，棕色多角形，細(xì)胞壁較厚。皮層薄壁細(xì)胞，排列疏松，內(nèi)含棕色物質(zhì)和淀粉粒；有限周韌型維管束散在分布，外有略栓化的內(nèi)皮層，韌皮部較窄，木質(zhì)部由多角形的管胞組成。如圖1所示。

2.2.2 粉末 灰白色，淀粉粒較多，層紋可見(jiàn)，直徑21～86 μm。梯紋管胞，淡黃色，直徑23～61 μm。表皮細(xì)胞黃棕色，多角形。纖維少見(jiàn)，末端頓尖，直徑11～23 μm。如圖2所示。

2.3 薄層色譜鑒別 取本品粉末2 g，加丙酮20 mL，回流提取1 h，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状? mL使溶解，作為供試品溶液。另取馬蹄蕨對(duì)照藥材2 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2015年版通則0502)試驗(yàn)，吸取上述2種溶液各5～10 μL分別點(diǎn)于同一羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯(5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)(如圖3所示)。

2.4 檢查

2.4.1 水分 照水分測(cè)定法(中國(guó)藥典2015年版四部通則0832第二法)測(cè)定。共考察測(cè)定了8批樣品的水分含量，測(cè)定兩次取平均值。結(jié)果見(jiàn)表2。

2.4.2 灰分 測(cè)定照灰分測(cè)定法(中國(guó)藥典2015年版四部通則2302)測(cè)定，共考察測(cè)定了8批樣品的總灰分含量和酸不溶性灰分含量。結(jié)果見(jiàn)表2。

2.4.3 浸出物 照醇溶性浸出物測(cè)定法(中國(guó)藥典2015年版四部通則2201)項(xiàng)下的熱浸法，以乙醇為溶劑，共測(cè)定了8批馬蹄蕨藥材樣品的浸出物含量。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 馬蹄蕨樣品水分、灰分、浸出物測(cè)定結(jié)果

由表2測(cè)定結(jié)果得知，8批馬蹄蕨藥材水分含量最高為14.5%，最低含量為9.8%，因此，水分含量擬定不超過(guò)15.0%；總灰分含量試驗(yàn)結(jié)果為：最高總灰分為5.3%，最低總灰分含量為3.7%，因此，將本品總灰分暫擬定為不得超過(guò)6.5%；酸不溶性灰分含量試驗(yàn)結(jié)果為：最高酸不溶性灰分為1.7%，最低酸不溶性灰分含量為 0.36 %，因此，將本品酸不溶性灰分?jǐn)M定為不得超過(guò) 2.5%；醇溶性浸出物含量試驗(yàn)結(jié)果，最高含量為16.9%，最低含量為7.8%，故制定馬蹄蕨藥材醇溶性浸出物含量時(shí)，以乙醇為溶劑，不得少于7.0%。

3 討論

本研究從性狀鑒別、顯微鑒別、檢查和浸出物等方面對(duì)8批馬蹄蕨藥材進(jìn)行分析，考察相關(guān)指標(biāo)，建立了馬蹄蕨藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。馬蹄蕨性狀特征主要有：根狀莖馬蹄形，一面稍平整，另一面隆起，有皺縮的葉柄殘痕，表面粗糙，質(zhì)堅(jiān)韌，切面可見(jiàn)棕褐色散列的維管束；而其顯微鑒別特征有：根莖橫切面基本薄壁組織細(xì)胞內(nèi)含棕色物質(zhì)和淀粉粒，有限周韌型維管束散在分布，外有略栓化的內(nèi)皮層。粉末中淀粉粒較多，多為單粒，較大，直徑21～86 μm；管胞為梯紋管胞。

本研究還考察了薄層色譜法的耐用性，結(jié)果表明，在溫度為4℃、30℃，相對(duì)濕度為35%、60%時(shí)，斑點(diǎn)均清晰，分離度良好，說(shuō)明薄層色譜法耐用性好。