李燕君，譚梅，張鳳萍，呂曉華，*

（1.四川大學華西公共衛(wèi)生學院，四川成都610041；2.格爾木云朵枸杞有限責任公司，青海格爾木816099）

視疲勞指以眼部癥狀為基礎，由眼或全身、精神（心理）等因素而引起的一系列疲勞綜合征，臨床表現(xiàn)為視物模糊、眼干澀、酸脹、流淚等癥狀[1]。隨著各種電子視頻產(chǎn)品的推廣普及，目前視疲勞在各年齡人群中愈來愈常見。枸杞和沙棘藥食兼用的歷史悠久，既是食品又是藥品。枸杞富含枸杞多糖、黃酮、葉黃素、玉米黃素，沙棘富含維生素A、維生素C、維生素E及黃酮類物質，可望成為開發(fā)緩解視疲勞保健食品的優(yōu)選原料[2-3]。目前，雖已有研究表明枸杞、沙棘對改善視力、緩解視疲勞有較大作用，但該方面的系統(tǒng)研究較少，本文通過人體試飲試驗評價枸杞沙棘濃漿的緩解視疲勞作用，為青海地區(qū)枸杞和沙棘資源的開發(fā)利用提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品

枸杞沙棘濃漿由格爾木云朵枸杞有限責任公司提供，人體推薦劑量為75 g/d。參照GB 5009.12-2016《食品安全國家標準食品中鉛的測定》、GB 5009.11-2014《食品安全國家標準食品中總砷及無機砷的測定》、GB 4789.2-2016《食品安全國家標準食品微生物學檢驗菌落總數(shù)測定》、GB 4789.4-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗》、GB 4789.10-2016《食品安全國家標準食品微生物學檢驗金黃色葡萄球菌檢驗》等相關標準檢測樣品中鉛、砷、菌落總數(shù)、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌。

1.2 研究對象

1.2.1 納入標準

1）年齡在20歲～80歲；2）每天用眼時間超過6 h；3）具有一定的閱讀能力，自愿且知情同意參加本研究者；4）能遵從研究方案，試驗期間能堅持飲用枸杞沙棘濃漿。

1.2.2 排除標準

1）患有外傷性、感染性眼部疾患，進行眼部手術不足3個月者；2）患有角膜、晶體、玻璃體、眼底病變等內外眼疾患者；3）患有肝、腎、造血、心腦血管等系統(tǒng)疾病者；4）妊娠或哺乳期婦女、對枸杞、沙棘類產(chǎn)品過敏者；5）近期正在服用或服用過與緩解視疲勞功能有關的物品，影響到對結果的判定者；6）長期服用或使用有助于視力改善的藥物、保健食品或其他治療方法，且目前尚未結束者；7）試驗期間，不能堅持飲用受試樣品，或資料不全影響觀察結果者。

1.3 主要儀器和試劑

1.3.1 主要儀器

BC-5380型全自動血液細胞分析儀：邁瑞南京生物技術有限公司；奧林巴斯AU400全自動生化儀：日本奧林巴斯集團；百勝DU 6型彩色超聲診斷儀：意大利百勝（深圳）醫(yī)療設備有限公司；PhilipsSonos 5500型彩色多普勒超聲診斷儀：荷蘭皇家飛利浦電子公司；ECG-9620P2三導自動分析心電圖儀：上海光電醫(yī)用電子儀器有限公司；Waters2695型高效液相色譜儀：美國Waters公司。

1.3.2 主要試劑

血細胞分析用稀釋液、血細胞分析用溶血劑：邁瑞南京生物技術有限公司；葡萄糖測定試劑盒（生產(chǎn)批號160991）、高密度脂蛋白膽固醇試劑盒：中生北控生物科技（北京）有限公司；總膽固醇試劑盒、甘油三酯試劑盒：北京柏定生物工程有限公司；β-胡蘿卜素標準品：Sigma公司。

1.4 研究內容

1.4.1 功效成分檢測

參照GB 5009.86-2016《食品安全國家標準食品中抗壞血酸的測定》、GB 5009.83-2016《食品安全國家標準食品中胡蘿卜素的測定》、GB 5009.82-2016《食品安全國家標準 食品中維生素A、D、E的測定》、NY/T 1676-2008《食用菌中粗多糖含量的測定》、GB/T 20574-2006《蜂膠中總黃酮含量的測定方法分光光度比色法》等相關標準，檢測枸杞沙棘濃漿中的維生素C、β-胡蘿卜素、α-生育酚、粗多糖、總黃酮、玉米黃素、葉黃素含量。

1.4.2 人體試飲試驗

根據(jù)納入標準和排除標準選取試飲志愿者43人，其中男性21人，女性22人，（50.1±29.9）歲。試飲志愿者本人簽署知情同意書，按75 g/d飲用枸杞沙棘濃漿，連續(xù)60 d。

1.4.2.1 安全性指標

1）血、尿常規(guī)檢查，體格檢查。

2）肝、腎功能檢查。

3）胸透或X光片、心電圖、腹部B超檢查（于試食前檢查一次）。

1.4.2.2 功效性指標（于試食開始及結束時檢查）

1）視疲勞問卷調查：癥狀詢問、用眼情況。

2）視力檢查（近視、遠視、散光等）。

3）明視持久度。觀察“品”字圖，測定時間設為3 min，觀察到“品”字的時長即為明視時間。

1.5 功效判定標準

1.5.1 癥狀改善有效率

眼酸痛、眼脹、畏光、視物模糊、眼干澀、異物感、流淚，全身不適等8種癥狀中有3種改善，且其他癥狀無惡化即判定癥狀改善。

1.5.2 癥狀平均積分

根據(jù)調查問卷計算每位志愿者試飲前后的癥狀積分。

1.5.3 明視持久度

試飲者自身比較，明視持久度差異有顯著性（P＜0.01），且平均明視持久度提高大于等于10%為有效。

1.5.4 視力改善率

以試飲后較試飲前提高兩行為改善，并以此為參考指標。參考指標不作為對緩解視疲勞功能是否有效的判定標準。

1.5.5 結果判定

試飲者自身比較，癥狀改善且癥狀總積分差異有顯著性（P＜0.01），及明視持久度差異有顯著性（P＜0.01），且平均明視持久度提高≥10%，可判定該受試物具有緩解視疲勞功能。

1.6 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用PEMS for Windows 3.1統(tǒng)計軟件進行分析，以表示。試驗采用自身前后對照的配對設計，各指標進行配對t檢驗，檢驗水準α=0.01。

2 結果與分析

2.1 枸杞沙棘濃漿的理化和微生物指標

枸杞沙棘濃漿的食品安全性指標見表1。

表1 枸杞沙棘濃漿的食品安全性指標Table 1 Food safety index of goji berry and sea buckthorn concentration

如表1所示，枸杞沙棘濃漿樣品鉛、砷、菌落總數(shù)、沙門氏菌和金黃色葡萄球菌等理化和微生物指標均在限量標準范圍內。

2.2 枸杞沙棘濃漿的功效成分含量

枸杞沙棘濃漿的功效成分含量見表2。

表2 枸杞沙棘濃漿的功效成分含量Table 2 Functional component content of goji berry and sea buckthorn concentration

如表2所示，枸杞沙棘濃漿樣品中維生素C、β-胡蘿卜素、α-生育酚、粗多糖、總黃酮、玉米黃素和葉黃素等成分含量較高。

2.3 枸杞沙棘濃漿對志愿者視疲勞癥狀的影響

枸杞沙棘濃漿對志愿者視疲勞癥狀和視疲勞癥狀積分的影響見表3和表4。

表3 枸杞沙棘濃漿對志愿者視疲勞癥狀的影響Table 3 Effects of goji berry and sea buckthorn concentration on visual fatigue symptoms of volunteers

表4 枸杞沙棘濃漿對志愿者視疲勞癥狀積分的影響（n=43）（±s）Table 4 Effects of goji berry and sea buckthorn concentration on visual fatigue symptom score of volunteers（n=43）（±s）

表4 枸杞沙棘濃漿對志愿者視疲勞癥狀積分的影響（n=43）（±s）Table 4 Effects of goji berry and sea buckthorn concentration on visual fatigue symptom score of volunteers（n=43）（±s）

注：*表示與試飲前比較，P＜0.01，差異顯著。

癥狀 試飲前積分 試飲后積分眼脹 1.47±0.91 0.79±0.77*眼酸痛 1.28±0.88 0.46±0.70*畏光 1.21±0.94 0.63±0.69*視物模糊 1.72±0.80 0.93±0.63*眼干澀 1.63±0.93 1.00±0.87*異物感 0.95±0.75 0.47±0.59*流淚 1.23±0.92 0.53±0.59*全身癥狀 0.30±0.60 0.09±0.29*總分 9.79±3.98 4.91±3.08*

如表3和表4所示，試飲受枸杞沙棘濃漿60天后，試飲志愿者眼酸痛、眼脹、畏光、視物模糊、眼干澀、異物感、流淚，全身不適等8種癥狀均有所改善，癥狀改善有效率為76.7%。癥狀積分顯著下降（P＜0.01）。

2.4 枸杞沙棘濃漿對志愿者明視持久度和視力的影響

枸杞沙棘濃漿對明視持久度和視力的影響見表5。

表5 枸杞沙棘濃漿對明視持久度和視力的影響（n=43）（±s）Table 5 Effects of goji berry and sea buckthorn concentration on visuognosis persistence and vision（n=43）（±s）

表5 枸杞沙棘濃漿對明視持久度和視力的影響（n=43）（±s）Table 5 Effects of goji berry and sea buckthorn concentration on visuognosis persistence and vision（n=43）（±s）

注：*表示與試飲前比較，P＜0.01，差異顯著。

項目 明視時間/s 明視持久度/% 左眼視力 右眼視力試飲前 118.79±19.96 65.99±11.09 4.00±0.27 3.97±0.23試飲后 137.05±16.89* 76.14±9.38* 3.98±0.29 3.95±0.28提高值 16.26 10.15

如表5所示，試飲枸杞沙棘濃漿60天后，試飲志愿者明視時間延長（P＜0.01），明視持久度顯著提高（P＜0.01），平均明視持久度提高10.15%。雙眼視力無明顯變化。

2.5 枸杞沙棘濃漿對志愿者血液安全性指標的影響

枸杞沙棘濃漿對志愿者血液安全性指標的影響見表6。

表6 枸杞沙棘濃漿對志愿者血液安全性指標的影響（n=43）（±s）Table 6 Effects of goji berry and sea buckthorn concentration on the blood safety indexes of volunteers（n=43）（±s）

表6 枸杞沙棘濃漿對志愿者血液安全性指標的影響（n=43）（±s）Table 6 Effects of goji berry and sea buckthorn concentration on the blood safety indexes of volunteers（n=43）（±s）

項目 試飲前 試飲后紅細胞/（×1012/L）4.56±0.394.66±0.42白細胞/（×109/L）6.17±1.526.00±1.06血紅蛋白/（g/L）135.48±12.91136.12±10.33血清總蛋白/（g/L）74.58±4.0672.96±3.99血清白蛋白/（g/L）46.17±2.2646.26±3.35谷丙轉氨酶/（U/L）20.38±2.6420.00±1.99谷草轉氨酶/（U/L）21.77±7.7520.99±6.28尿素氮/（mmol/L）4.59±1.184.50±1.00肌酐/（μmol/L）74.80±17.8270.95±16.90血尿酸/（μmol/L）316.69±95.51299.54±100.64血清膽固醇/（mmol/L）4.51±0.834.47±0.56血清甘油三酯/（mmol/L）1.23±0.701.32±0.89血糖/（mmol/L）5.03±0.485.09±0.33

如表6所示，試飲前、后志愿者的血液安全性指標均在正常范圍內，且前后無顯著性差異。

3 討論

本研究采用自身對照設計，試飲志愿者按75 g/d飲用枸杞沙棘濃漿，連續(xù)60 d。結果表明：試驗結束時，試飲者視疲勞癥狀改善且癥狀總積分顯著下降，明視持久度相比試飲前顯著提高，且平均明視持久度提高10.15%。依據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局國食藥監(jiān)?；痆2012]107號“關于印發(fā)抗氧化功能評價方法等9個保健功能評價方法的通知”，結果提示枸杞沙棘濃漿具有緩解視疲勞作用。

研究證明，多種營養(yǎng)素對緩解和改善視疲勞有較大作用[4]。本研究采用的枸杞沙棘濃漿含β-胡蘿卜素、維生素C、維生素E、葉黃素、玉米黃素等營養(yǎng)成分，對維持眼睛健康、緩解視疲勞具有重要作用。β-胡蘿卜素是維生素A原活性最高的一種類胡蘿卜素，可在小腸上皮細胞內吸收分解，轉化為滿足機體需要的維生素A[5]。維生素A對維持正常的視覺功能具有重要作用，其機制是：參與感光物質視紫紅質的合成，增強對弱光的感知；維持角膜上皮細胞的形態(tài)、正常增殖和分化；增加角膜相關黏蛋白的表達，保持上皮表面濕潤，防止干澀[6-7]。在外界環(huán)境刺激下，眼部前段組織易受到氧化應激的影響，維生素C作為眼內重要抗氧化劑，不僅能吸收紫外光線，保護組織免受光氧化損傷，還可促進角膜膠原蛋白的生成，防止眼部組織損傷[8]。維生素E存在于感官細胞和視網(wǎng)膜上皮細胞中，通過其抗氧化作用，能避免晶狀體發(fā)生過氧化反應[9]。葉黃素和玉米黃質是重要的類胡蘿卜素，除了玻璃體、角膜和鞏膜外，幾乎存在于眼部所有組織中，尤其視網(wǎng)膜黃斑中的濃度最高。從飲食中攝取的葉黃素能選擇性地集中在視覺系統(tǒng)，是神經(jīng)視網(wǎng)膜和晶狀體中獨有的類胡蘿卜素。研究表明，黃斑類胡蘿卜素能吸收40%到90%的藍光（取決于濃度），保護視網(wǎng)膜免受光化學損傷，降低氧化損傷，還可防止氧化誘導的細胞因子增加和上調炎癥相關基因的表達，預防多種眼部疾病的致病性炎癥，對眼睛起到重要的保護作用[11-12]。

枸杞沙棘濃漿是以新鮮枸杞、沙棘為原料加工、濃縮而成的一種口服液體保健食品，小袋獨立包裝，人體吸收快，攜帶、服用方便，既可沖水、也可直接飲用。枸杞沙棘濃漿營養(yǎng)豐富，且化學性質穩(wěn)定，其主要原因是各種功效成分相互之間存在保護作用。維生素C和維生素E作為抗氧化劑，不僅能相互維持穩(wěn)定性，還能有效保護β-胡蘿卜素和葉黃素免受氧化分解，對其起到保護作用[13-14]。此外，沙棘自身有機酸含量較高，加工得到的枸杞沙棘濃漿呈酸性，有利于維生素C、維生素E和黃酮類化合物在溶劑中維持較高的穩(wěn)定性[15-17]。枸杞沙棘濃漿不含添加糖，保持枸杞、沙棘的天然營養(yǎng)成分，不影響維生素、礦物質等營養(yǎng)素的攝入，有助于維持各種功效成分的穩(wěn)定性[18]。枸杞沙棘濃漿營養(yǎng)豐富、口感酸甜且飲用方便，易被消費者接受。

因其獨特的自然資源和地理優(yōu)勢，青海地區(qū)枸杞和沙棘資源豐富，果實個體大、肉質飽滿，果品品質、營養(yǎng)成分及生物活性物質的含量遠高于其他地區(qū)[19-22]。青海地區(qū)高品質的資源優(yōu)勢為開發(fā)緩解視疲勞保健食品提供了有利條件。