付燕 張業(yè)廷 羅笑 胡小勇 謝璐霜 袁瓊嘉

1成都體育學院運動醫(yī)學與健康學院（成都 610041）

2西南民族大學體育學院（成都 610041）

3成都中醫(yī)藥大學（成都 610041）

阿爾茨海默?。ˋlzheimer's disease，AD）主要表現為學習、記憶以及其它認知功能進行性損毀，是引起老年人癡呆的最主要原因[1-3]。隨著全世界老年人口不斷增長，AD已經成為一個日益嚴峻的公共健康問題。AD的主要病理學特征是腦組織神經元胞外β-淀粉樣蛋白（β-amyloid peptide，Aβ）沉積形成的老年斑、神經元胞內神經原纖維纏結以及神經元死亡和突觸丟失，學習與記憶的關鍵腦區(qū)海馬等部位的病變尤為明顯[2，4]。盡管AD發(fā)病的確切原因與機制尚未完全闡明，但隨著相關研究的不斷深入，人們逐漸認識到腦組織內Aβ沉積誘發(fā)的免疫炎癥級聯反應在AD慢性進行性病變中發(fā)揮著重要作用[5-8]。因此，抑制腦組織炎癥反應被認為是降低AD風險的潛在治療目標。但目前沒有任何具有抗炎作用的藥物被批準用于治療持續(xù)性的炎癥性病變，更沒有任何方法可以治愈AD。

近些年來的許多研究表明，定期規(guī)律的有氧運動是可以預防或緩解與慢性低水平系統性炎癥有關疾病的一種有效手段[9-11]。而來自人體流行病學調查與干預性實驗以及動物實驗的數據提示長期規(guī)律的運動，尤其是有氧運動，對預防AD發(fā)生或延緩其病程具有積極作用[12-16]。我們推測，這種積極作用可能與有氧運動調控AD患者腦組織中Aβ沉積誘發(fā)的炎癥反應有關。本研究采用直接經雙側海馬注射凝聚態(tài)的Aβ1-42（一種體內神經毒性和致炎作用最強的Aβ肽鏈）的方式以誘導AD腦組織病理模型，并在Aβ1-42注射后給予大鼠規(guī)律的有氧運動干預，然后觀察大鼠學習記憶能力的變化，并檢測海馬組織超微結構以及促炎細胞因子、抗炎細胞因子的表達情況，探討有氧運動能否通過調控Aβ誘發(fā)的海馬組織炎癥反應狀態(tài)進而發(fā)揮神經保護作用，阻止AD的發(fā)生或延緩AD病變的進程，改善其學習記憶等認知功能受損。

1 材料與方法

1.1 動物與分組

3月齡SPF級健康雄性SD大鼠52只，購于成都達碩實驗動物有限公司（動物生產許可證：SCXK[川]2015-030；動物使用許可證：SYXK[川]2014-189）。大鼠飼養(yǎng)于成都體育學院動物實驗室，室溫25±2℃，相對濕度40%～60%，自然光照，分籠飼養(yǎng)（3～4只/籠），自由攝取國家標準嚙齒類動物飼料和飲用冷開水。大鼠適應性喂養(yǎng)7天后被隨機分成4組：空白對照組（K組），生理鹽水對照組（S組）、Aβ1-42誘導AD模型組（A組）、Aβ1-42+有氧運動組（AE組），每組13只。A組和AE組大鼠被給予雙側海馬注射凝聚態(tài)Aβ1-42（Sigma），S組大鼠則按同種方式注射同容積劑量生理鹽水（normal saline，NS），K組大鼠自然喂養(yǎng)。AE組大鼠Aβ1-42注射后第2天即開始進行有氧運動。

1.2 海馬A Aβ 1 1--4242/NS/NS注射方法

腹腔注射4%水合氯醛（10 ml/kg）將大鼠麻醉后固定于大鼠腦立體定位儀上；頭頂前后囟區(qū)域去毛后常規(guī)消毒，用眼科剪沿正中矢狀軸方向剪開頭皮0.5～1.0 cm，剝離骨膜，暴露出前囟及矢狀縫；參照諸葛啟釧翻譯的《大鼠腦立體定位儀圖譜》定位雙側海馬體注射點（定位坐標:前囟后3.0 mm，顱矢狀縫左右各旁開2 mm），用牙科鉆在左右定位處各鉆1小孔；將裝有Aβ1-42的10 μl微量注射器連接于固定在腦立體定位儀的微量推進器上，從坐標處垂直入顱，緩慢進針至顱骨表面下4 mm；以0.5 μl/min的速度緩慢注入凝聚態(tài)的Aβ1-42或NS，每側各5 μl；注藥完畢后留針10 min再緩慢退針拔出；常規(guī)消毒、縫合，每天創(chuàng)口涂擦紅霉素軟膏至完全愈合。

1.3 有氧運動方案

AE組大鼠于海馬注射Aβ1-42前在電動跑臺上進行適應性跑臺運動 3天，8～10 m/min，15～20 min/d。正式跑臺運動訓練于海馬注射Aβ1-42后第2天開始，每日晚上8～10點進行，共持續(xù)5周，每周訓練6天，休息1天。訓練第1周的前3天跑臺速度6～8 m/min，持續(xù)時間10～20 min/d；第1周的后3天跑臺速度10～12 m/min，持續(xù)時間30 min/d；第2～5周則在熱身運動（8～10 m/min，5 min）后將速度設置為15 m/min，持續(xù)時間 30 min/d。運動方案參考 Schefer等的文獻[17，18]制定。

1.4 Morrisorris水迷宮實驗檢測大鼠空間學習與記憶能力

在海馬注射Aβ1-42/NS后第5周，按文獻[19，20]中的方法進行Morris水迷宮（Morris water maze，MWM）實驗以檢測大鼠空間學習與記憶能力。MWM實驗裝置由一個內表面為黑色的圓形水池（直徑150 cm，高度60 cm）和信息采集分析系統組成。水池被平分為4個象限（分別標注為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ），其中象限Ⅳ（稱為“目標象限”）中裝有一位置固定的圓形平臺（直徑9 cm，高度30 cm）。池水用無毒墨汁調為不透明狀態(tài)，水深沒過平臺1.5±0.5 cm，水溫22±1℃。水池的四周壁上貼有位置固定的方形、心形、三角形、圓形圖片為大鼠尋找水下平臺提供視覺線索。水池上方正中的攝像機同步采集大鼠的游泳軌跡，由水迷宮信息分析系統自動分析記錄相關數據。MWM實驗的前6天，每天進行4次定位航行訓練，即將各大鼠頭朝下、面朝池壁分別從四個象限的邊緣中點放入水池，記錄大鼠的平均逃避潛伏期（大鼠從4個象限入水至爬上平臺的平均時間）以及游泳速度。如果訓練時大鼠超過120 s尚未尋到水下平臺，實驗者會將其引至平臺并讓其在平臺上停留10 s，此時逃避潛伏期記錄為120 s。MWM實驗的第7天，最后1次定位航行訓練結束24 h后進行空間探索實驗，即拆除目標象限中的水下平臺，按照定位航行訓練的方式將大鼠從水池第Ⅱ象限邊緣中點放入水池，記錄大鼠60 s內在目標象限中的時間以及穿越原平臺所在區(qū)域的次數。

1.5 腦組織樣本采集和指標檢測

腦組織樣本采集在Morris水迷宮空間探索實驗結束后24～48 h進行。每組隨機取3只用于電鏡技術檢測，5只用于免疫熒光實驗，5只用于免疫印跡（western blot）分析。

1.5.1 超薄切片制作和電鏡技術檢測海馬組織超微結構

使用10%水合氯醛（5 ml/kg體重）腹腔注射將大鼠麻醉后開胸，暴露心臟，將灌注針頭迅速插入大鼠左心室并剪開右心耳，經左心室快速灌注NS，直至剪開的右心耳處流出液體變清亮后慢速灌注3%戊二醛溶液（4℃）；待大鼠四肢和尾巴強直僵硬后，斷頭取腦，冰上快速分離出海馬；在3%戊二醛中將海馬CA1區(qū)修成1 mm×1 mm×1 mm組織塊，放入尖頭EP管中，加滿3%戊二醛，4℃固定過夜；0.01 M PBS充分沖洗后用1%四氧化鋨后固定2 h；用30～100%丙酮逐級脫水后將組織塊用Epon812包埋；半薄切片（0.5 μm）光學定位后進行超薄切片（100 nm），超薄切片安裝于銅網格上用醋酸鈾及枸櫞酸鉛進行雙重染色；透射電鏡（日立H-600IV）觀察并7000×倍數下采集圖片。

1.5.2 冰凍腦切片制作和免疫熒光實驗檢測促炎細胞因子（TNF-TNF-α 、IL-IL-1 1β ）、抗炎細胞因子（TGF-TGF-β 、IL-IL-1010）的表達

使用10%水合氯醛（5 ml/kg體重）腹腔注射將大鼠麻醉后開胸，暴露心臟，將灌注針頭迅速插入大鼠左心室并剪開右心耳，經左心室快速灌注NS，直至剪開的右心耳處流出液體變清亮后慢速灌注4%多聚甲醛（4℃）至大鼠四肢僵硬，斷頭取出大腦，放入裝有預冷4%多聚甲醛的EP管中（4℃，＞4 h）；用10%、20%、30%蔗糖溶液進行梯度脫水后將腦組織用OCT包埋劑進行包埋；冠狀位連續(xù)切片至完整海馬腦區(qū)，厚度5 μm；將切片粘附在用明膠處理過的成品載玻片上，充分干燥；0.01M PBS浸泡洗滌5 min×3次后用5%小牛血清封閉液室溫封閉1 h后滴加一抗工作液（TNF-α，1∶300，Abcam；IL-1β，1∶200，Abcam；TGF-β，1∶200，Abcam；IL-10，1∶400，Abcam），4℃孵育過夜；0.01 M PBS洗滌5 min×3次后加入FITC標記的二抗IgG（1∶1000，北京中杉），濕盒中室溫避光孵育2 h；0.01 M PBS避光洗滌10 min×3次后滴加DAPI工作液（1∶1000，北京中杉），37℃避光條件下孵育10 min；0.01M PBS避光漂洗5 min×3次后滴加抗熒光淬滅封片劑覆蓋封片，熒光共聚焦顯微鏡下進行觀察并采集圖像。每個指標每個樣本取5張切片（隔4取1），200×倍數下選取海馬互不重疊的3個視野進行照相，用Image pro plus 6.0軟件分析平均熒光強度（mean fluorescence intensity，MFI）。

1.5.3 海馬蛋白質提取和Western Blot Blot分析促炎細胞因子（TNF-TNF-α 、IL-IL-1 1β ）、抗炎細胞因子（TGF-TGF-β 、IL-IL-1010）的表達

將大鼠斷頭取腦，4℃生理鹽水清洗后在冰上快速分離出右側海馬組織放入尖頭EP管內，按照每1 mg組織加入4℃的10 μl RIPA 裂解緩沖液（每1 ml RIPA 裂解液中加入40 μl蛋白酶抑制劑和10 μl PMSF溶液）中勻漿，12000 rpm/min、4℃離心10 min后取上清；采用BCA法檢測各樣本上清中的蛋白濃度；每個樣本取含定量蛋白的上清經加熱變性處理后用SDS-PAGE凝膠（8～10%分離膠+5%濃縮膠）垂直電泳分離蛋白；電泳完成后將分離出的目標蛋白轉移至硝酸纖維素（PVDF）膜上；將PVDF膜用5%脫脂奶粉封閉處理后用一抗工作液（TNF-α，1∶200，Abcam；IL-1β，1∶200，Abcam；IL-10，1∶400，Abcam；TGF-β，1∶400，Abcam）孵育，4 ℃過夜；TBST液充分洗滌后用辣根酶標記的二抗工作液（山羊抗鼠IgG，1∶2000，北京中杉）室溫孵育2 h；再TBST液充分洗滌后進行化學發(fā)光、顯影、定影，獲得目標蛋白的印跡圖像。β-actin作為內參。使用凝膠分析軟件Quantity One（Bio-Rad）對免疫印跡條帶進行光密度分析，以目標蛋白印跡條帶光密度值與內參蛋白β-actin印跡條帶光密度值的比值作為目標蛋白相對表達量。

1.5.4 數據分析

采用SPSS 19.0軟件單因素方差分析對數據進行統計學分析，各組相關指標值用平均值 ±標準差（M±SD）表示。P＜0.05被認為組間差異具有顯著性意義。

2 結果

2.1 大鼠空間學習與記憶能力變化情況

在定位航行訓練中，隨著訓練次數增加，各組大鼠平均逃避潛伏期時間均逐漸縮短，其中K組、S組在第3天表現出最優(yōu)異成績，即逃避潛伏期降到最短，隨后幾天與前1天相比沒出現顯著性差異，AE組和A組則分別在第4天和第5天后趨于穩(wěn)定（圖1a）。對各組大鼠每天的平均逃避潛伏期進行比較分析發(fā)現，K組和S組在整個定位航行訓練期間均無統計學差異；A組從第2天起至訓練結束，逃避潛伏期均顯著性長于S組（第2、3、4天，P＜0.01；第5、6天，P＜0.05，圖1a）；AE組則在第2、4、5、6天顯著性短于A組（P＜0.05，圖1a）。在MWM空間探索實驗中，A組大鼠在60 s內穿越原有平臺區(qū)域的次數與在目標象限中停留的時間均比S組顯著性減少（P＜0.01），而S組和K組之間無統計學差異；與A組相比，AE組大鼠在目標象限中停留的時間和穿越平臺的次數有所增加（P＜0.05）（圖1c、圖1d、圖1e）。而不管是在定位航行訓練期間還是在空間探索實驗中，各組間大鼠游泳速度均無顯著性差異（P＞0.05，圖1b），這排除了在MWM實驗中的行為學差異是由于運動障礙造成的可能性。

2.2 大鼠海馬神經元超微結構變化情況

在電鏡下可觀察到：K組和S組大鼠海馬CA1區(qū)神經元分布規(guī)整，胞膜結構完整，胞質中線粒體、內質網以及高爾基復合體等細胞器含量豐富，結構正常，偶可見溶酶體，微絲微管排列規(guī)整；胞核形狀規(guī)則，核膜光滑完整，核仁清晰可見（圖2A、2B）；神經突觸較多，結構完整清晰，突觸囊泡密集而均勻（圖2a、2b）。A組神經元胞膜有溶解斷裂現象，胞質中線粒體、內質網、高爾基復合體等細胞器數量明顯減少，線粒體出現腫脹與空泡，部分線粒體嵴溶解消失；核膜皺縮、內陷呈鋸齒樣變，染色質固縮邊聚，并可見凋亡小體形成（圖2C）；神經突觸分布較為稀少，部分突觸界限模糊，突觸囊泡稀疏（圖2c）；AE組神經元結構較A組有明顯改善，結構完整的線粒體增多，仍有腫脹，但較A組有所減輕（圖2D）；突觸數量有所增加，突觸輪廓較為清晰，突觸間隙融合現象減輕，突觸囊泡增多（圖2d）。

2.3 大鼠海馬促炎細胞因子TNF-TNF-α 、IL-IL-1 1β 的表達情況

在免疫熒光顯微鏡下觀察，腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF-α）和白介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）熒光陽性物質在S組與K組大鼠的海馬組織非常稀疏，而在A組和AE組的分布則較為密集，熒光強度明顯增加（圖3a，200倍）。對TNF-α和IL-1β的MFI進行分析發(fā)現，S組與K組均無顯著性差異；與S組相比，A組與AE組兩者的MFI明顯增高（P＜0.01）；而AE組較A組有所降低（P＜0.05，圖3b）。通過Western Blot對TNF-α和IL-1β進行定量分析也支持這一變化趨勢（圖3c）。Western Blot分析結果顯示，A組TNF-α和IL-1β相對表達量分別較S組提高306.9%和 255.6%，AE組則分別提高179.3%、147.8% ；AE組TNF-α和IL-1β的相對表達量較A組分別降低了31.4%、25.0%。

圖1 Morris水迷宮實驗結果

圖2 海馬組織電鏡檢測結果（7000×）

圖3 大鼠海馬促炎因子TNF-α、IL-1β的表達

圖4 大鼠海馬抗炎因子IL-10和TGF-β表達

2.4 大鼠海馬抗炎細胞因子IL-IL-1010和TGF-TGF-β 的表達情況

在免疫熒光顯微鏡下觀察，白介素-10（interleukin-10，IL-10）和轉化 生 長 因 子 -β（transforming growth factor-β，TGF-β）免疫熒光陽性物質在S組與K組大鼠的海馬組織分布稀疏分布，熒光強度較弱；而在A組和AE組，免疫熒光陽性物質明顯增加，除分布更為密集外，亮度也有所增強（圖4a，200倍）。對MFI進行統計分析顯示：在S組與K組之間，IL-10和TGF-β的MFI均無統計學差異；與S組相比，A組兩種分子的MFI有所增加（IL-10，P＜0.01；TGF-β，P＜0.05），而AE組大鼠則較A組大鼠出現進一步增高（P＜0.01，圖4b）。Western Blot技術對IL-10和TGF-β進行定量分析顯示同樣變化趨勢（圖4c），其中A組IL-10和TGF-β相對表達量比S組分別提高80.0%、78.3%；AE組比S組分別提高203.3%、147.8%，比A組則提高68.5%、39.0%。

3 討論

學習與記憶能力受損是AD病變最早出現的癥狀之一[1，2]，而導致AD患者學習記憶受損的原因與機制目前尚不完全清楚。不過隨著近年來研究的不斷深入，人們已逐漸認識到Aβ沉積對腦組織神經元的毒性作用可能是學習記憶受損的重要原因[8，21-24]。Aβ由淀粉樣前體蛋白（amyloid precursor protein，APP）在β、γ分泌酶的作用下剪切而成[23，24]。正常情況下Aβ可以被及時降解和清除，而病理情況下（如腦老化、基因突變、APP代謝異常、腦損傷等）Aβ產生過多或者不能被及時清除時，就容易沉淀、聚集形成寡聚體和原纖維，引起不可逆性神經元及其突觸的退化、死亡、消失，使患者腦信息處理和傳遞能力降低，突觸結構和功能可塑性下降，最終導致學習與記憶功能障礙而引起癡呆[8，21-24]。腦組織中內源性Aβ主要有 Aβ1-40和 Aβ1-42兩種形式，其中Aβ1-40含量最多，但Aβ1～42因其更難溶解、更容易積聚形成原纖維和寡聚體而具有更強的神經毒性[24]。研究發(fā)現，向腦組織內直接注射Aβ可使動物產生學習和記憶功能障礙，出現行為學改變，并產生與AD相似的神經病理變[25]。因此，向腦組織內直接注射Aβ，被認為能夠誘導AD腦組織病理的動物模型并被廣泛用于AD防治策略及其神經機制探討的相關研究中[26-28]。本實驗在直接向大鼠雙側海馬注射Aβ1-42后第5周所進行的MWM水迷宮實驗結果顯示，與生理鹽水對照組（S組）大鼠相比，海馬注射Aβ1-42的大鼠（A組）不管是空間參考學習能力還是記憶提取能力均表現出明顯下降。而眾所周知，海馬是空間學習與記憶功能的關鍵腦區(qū)。隨后對大鼠海馬組織進行電鏡技術觀察則發(fā)現，A組大鼠海馬CA1區(qū)出現明顯的神經細胞受損，神經突觸數量減少，突觸囊泡稀疏。而同樣方式注射生理鹽水的大鼠（S組）則沒有觀察到明顯的海馬神經元和突觸受損現象。這提示本實驗采用的雙側海馬直接注射Aβ1-42成功地誘導出AD海馬組織病理模型。

越來越多的證據顯示，AD患者的腦組織中伴隨著慢性進行性炎癥反應，并且這些炎癥反應在AD病理變化中發(fā)揮重要作用[5，29]。AD患者和相關動物模型的腦組織檢測均發(fā)現，一些炎癥介質，如TNF-α、IL-1β、白介素-6（interleukin-6，IL-6）等促炎癥細胞因子在AD患者腦組織中明顯增加[5，29]。TNF-α和IL-1β被證實不僅直接對神經元產生毒性作用，還是免疫反應的發(fā)起者和關鍵介質，可以進一步激活免疫細胞，促進其它促炎因子和趨化因子的產生，啟動多種介質的級聯反應，形成惡性循環(huán)，產生慢性進行性炎癥反應，導致不可逆性神經元退化、突觸結構與功能受損[30，31]。來自體內外的實驗資料顯示，Aβ對神經元的毒性作用就與這些炎癥細胞因子的產生以及炎癥級聯反應的激活有關[30-32]。本研究采用免疫熒光檢測以及Western Blot分析發(fā)現，與S組相比，A組大鼠海馬的炎癥因子TNF-α和IL-1β的表達水平均呈倍數增加，提示 Aβ1-42可引起海馬組織TNF-α和IL-1β促炎因子表達，使其處于炎癥狀態(tài)。值得注意的是，在促炎細胞因子表達水平升高的同時，A組大鼠海馬組織的TGF-β和IL-10的表達水平也有所上調。TGF-β和IL-10等因能抑制促炎細胞因子的產生及其活性而被通稱為抗炎細胞因子，它們的上調可以部分地抵消促炎細胞因子的作用，發(fā)揮神經保護功能[30]。但由于抗炎細胞因子表達水平相對較低，并不足以抗衡促炎細胞因子所誘導的炎癥反應過程及其神經毒性作用，最終導致疾病慢性進行性發(fā)展。

不管是AD還是其他神經退行性疾病，由慢性炎癥過程介導的惡性破壞性循環(huán)被證明是難以遏制的，因而到目前為止尚未尋到治愈這類疾病的有效方法。不過有大樣本量的觀察性研究數據顯示，身體活動水平和機體炎癥生物標記物之間存在高度負相關關系[33，34]，并且一些干預性實驗研究也表明規(guī)律的有氧運動可以減少循環(huán)系統C反應蛋白（C reactive protein，CRP）、IL-6、TNF-α等炎癥標志分子濃度，使IL-4、IL-10、TGF-β等抗炎性細胞因子水平升高[35-38]，有效抑制身體各系統的慢性炎癥反應，尤其是患有慢性疾病者。那么，有氧運動能否調控AD患者腦組織中Aβ沉積誘發(fā)的炎癥反應進而對AD發(fā)揮神經保護作用，改善認知功能？

來自人體流行病學數據提示，長期規(guī)律的運動，尤其是有氧運動對預防AD的發(fā)生或延緩其病程具有積極作用[13，14]。動物研究也表明，運動對幾種AD動物模型學習和記憶缺陷具有預防作用，如TgCRND8小鼠[39]、APP/PS1老鼠[15]、3×Tg-AD小鼠[40]、側腦室注射Aβ25-35誘導的AD模型[41]。本研究中，我們采用雙側海馬Aβ1-42注射以誘導AD模型，在給予大鼠雙側海馬Aβ1-42注射后即讓其進行規(guī)律的從低到中等負荷的跑臺運動，運動持續(xù)第5周時進行的MWM水迷宮實驗結果顯示，與生理鹽水對照組（S組）相比，進行規(guī)律有氧跑臺運動組的大鼠（AE組）雖然空間學習與記憶能力依然有明顯受損，但顯著優(yōu)于沒有進行運動干預的Aβ1-42模型組大鼠（A組）；而且，在電鏡下觀察，AE組大鼠海馬神經元結構較A組有明顯改善，突觸數量也有所增加，突觸輪廓較為清晰，突觸囊泡較多。這表明規(guī)律的有氧運動對Aβ1-42的毒性作用具有一定抑制效應，可減輕因Aβ1-42毒性作用導致的神經元受損及其空間學習記憶能力障礙程度。

有文獻報道了規(guī)律的有氧運動可以減少AD患者血清中IL-6、TNF-α等促炎因子的濃度[42]，但有氧運動對AD病變腦組織部位過量的Aβ誘發(fā)的炎癥反應的影響尚不清楚。為觀察有氧運動對Aβ誘發(fā)的炎癥反應的影響，我們對海馬部位的促炎因子TNF-α和IL-1β以及抗炎因子IL-10、TGF-β等的表達情況進行了檢測和分析。不管是免疫熒光陽性物質分布及熒光強度值，還是Western Blot對這些蛋白相對表達量的分析，結果均顯示AE組大鼠海馬組織的促炎細胞因子TNF-α和IL-1β表達水平比A組出現了明顯下調，而具有抗炎作用和神經保護作用的抗炎細胞因子IL-10和TGF-β表達水平均則出現了顯著性增高。這表明5周規(guī)律的有氧運動不僅可一定程度抑制炎癥細胞因子的表達，還可促進抗炎細胞因子TGF-β、IL-10的表達，從而可在更高程度上抵消促炎細胞因子的炎癥損傷作用，調節(jié)機體免疫反應的平衡。這可能是本實驗中有氧運動使Aβ1-42誘導的毒性反應減弱，最終減輕因Aβ1-42毒性作用導致的海馬神經元受損以及空間學習記憶能力障礙程度的機制之一。

4 結論

本實驗采用的雙側海馬直接注射Aβ1-42成功地誘導出AD海馬組織病理模型；長期規(guī)律的有氧運動對Aβ1-42的毒性作用具有一定抑制效應，進而減輕因Aβ1-42毒性作用導致的海馬神經元受損及其空間學習記憶能力障礙程度；這種作用可能與有氧運動能抑制炎癥因子并同時促進抗炎因子的表達，從而可在更高程度上抑制或抵消炎癥反應，調節(jié)免疫平衡有關。有氧運動通過什么途徑抑制促炎細胞因子、促進抗炎細胞因子的表達進而發(fā)揮炎癥反應的調控作用機理有待進一步研究。