李業(yè)山

前列腺癌是臨床中老年男性最常見的疾病之一，血清PSA作為診斷依據(jù)時易與其它良性或惡性前列腺組織疾病的診斷發(fā)生重合，因此找到1種特異性強，靈敏度高的腫瘤標記物對于前列腺癌的診斷和預后治療有重要意義。本研究通過對血清B2M(β2-微球蛋白)在前列腺癌患者內分泌治療前后表達差異性及與血清PSA原相關性分析來探討B(tài)2M與前列腺癌臨床治療之間的關系，為前列腺癌發(fā)展進程的診斷提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2015年5月至2017年5月間在本院確診治療的前列腺癌患者35例，年齡65～85歲，平均(75±6.4)歲。根據(jù)Gleason評分標準將患者分為高分化組11例(評分為2～4分)、中分化組12例(評分為5～7分)、低分化組12例(評分為8～10分)。收集體檢健康的人和前列腺增生患者血清各35例，年齡65～85歲。三組研究對象基本資料對比差異無統(tǒng)計學意義。

1.2 納入及排除標準

納入標準：①年齡65～85歲；②知情并同意參與本研究。

排除標準：①年齡<65或>85歲；②患有其它前列腺疾病或影響本次研究的疾病的患者；③家長或本人不愿參與本次研究的患者。

1.3 治療方法

首先對患者的病情進行診斷，根據(jù)患者的病情采用不同的內分泌治療方法，內分泌治療方法主要有藥物去勢治療、最大限度雄激素阻斷治療、雙側睪丸切除術(LHRH-A聯(lián)合應用抗雄激素藥物氟他胺或比卡魯胺)，用藥策略：服用比卡魯胺50 mg 1次/d聯(lián)合注射達菲林3.75 mg 1次/月，或服用氟他胺250 mg 3次/天。

1.4 研究方法

1.4.1 樣品采集方法 對前列腺癌患者分別在內分泌治療前及治療后1月、3月、6月采集血清標本。對參與本次研究的受試者于次日清晨空腹抽取靜脈血5 ml加入試管,室溫放置30 min,3 000轉/分離心血清[1-2]。取1 ml上清液于消毒的EP管中,置于-20 ℃冰箱保存。

1.4.2 血清B2M檢測方法 應用B2M檢測試劑盒，血清B2M抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的血清B2M與連接于固相載體上的抗體結合，然后加入生物素化的血清B2M抗體，將未結合的生物素化抗體洗凈后，加入HRP標記的親和素，再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血清B2M呈正相關。用酶標儀在450 nm波長下測定吸光度(O.D.值)，計算樣品濃度[3]。

1.4.3 血清PSA檢測方法 應用試劑盒，包被有PSA單克隆抗體固相載體上的標記抗體分別與待測樣品的不同位點結合形成三層夾心,通過標準曲線可計算樣品中血清PSA的含量，包被載體的值與待測樣品中的含量成正比[4]。

1.5 統(tǒng)計學方法

應用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，運用pearson對血清B2M和血清PSA進行相關性分析，P<0.05 差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 前列腺癌患者治療前后血清B2M與血清PSA的檢測結果與相關性分析

患者治療前血清B2M與血清PSA水平均較高。在治療1個月、3個月、6個月后血清B2M與血清PSA水平逐漸降低。治療效果較好的患者在治療6個月后血清B2M與血清PSA基本降至正常水平。對患者治療前，治療1個月，治療3個月的血清B2M與血清PSA數(shù)據(jù)采用pearson相關性分析發(fā)現(xiàn)兩者呈正相關(P<0.05)。在治療3個月和治療6個月后患者血清B2M水平未發(fā)生較大變化，可能與患者病情好轉有關。部分癌細胞發(fā)生轉移的患者血清B2M水平出現(xiàn)升高現(xiàn)象，血清PSA水平無明顯變化，見表1。

表1 前列腺癌患者治療前后血清B2M與血清PSA的檢測結果

2.2 治療前三組受試者血清B2M與血清PSA檢測結果及分析

前列腺增生組血清B2M水平與正常人無明顯差異，前列腺癌組血清B2M水平明顯高于正常人組和前列腺增生組。三組受試者的血清PSA水平存在較大差異，其中前列腺癌組的血清PSA水平明顯高于正常人組和前列腺增生組，前列腺增生組的血清PSA水平為(5.28±1.22)ng/ml，高于正常人(1.24±0.68)ng/ml。其中前列腺癌組血清B2M與血清PSA水平呈正相關，前列腺增生組與正常人組無此現(xiàn)象，見表2。

3 討論

前列腺癌是男性?；嫉拿谀蛳到y(tǒng)疾病之一，尤其多發(fā)于老年男性。由于區(qū)域差別等原因，歐美國家的發(fā)病率尤其高，甚至超過了肺癌等高發(fā)病率疾病。我國的發(fā)病率雖然低于歐美國家，但就近幾年的觀察來看，我國的發(fā)病率正處于逐年增長的狀態(tài)[5]。前列腺癌的早期診斷和預后判斷一直是臨床醫(yī)生關心的重點。準確診斷前列腺癌的發(fā)展進程對于治療方案的選取和病情的治療都有重要意義。目前對前列腺癌臨床診斷主要以血清PSA的檢測結果作為診斷依據(jù)[6-8]。雖然血清PSA的檢測對早期沒有癥狀的前列腺癌的診斷具有重要意義，但由于血清PSA產(chǎn)生于前列腺上皮細胞而進入血液循環(huán)，血清PSA的檢測易受到各種因素的影響。同時前列腺增生和前列腺癌的PSA水平在4～10 ng/ml時有較大部分重疊，在這個所謂灰色區(qū)域難以根據(jù)PSA水平來區(qū)分前列腺增生和前列腺癌，對前列腺癌的準確診斷產(chǎn)生了較大影響。因此找到一種特異性強，靈敏度高的診斷指標對前列腺癌的治療有重大影響。本課題通過對血清β2-微球蛋白在前列腺癌患者內分泌治療前后表達差異性研究及與血清前列腺特異抗原相關性分析，為前列腺癌早期診斷及預后治療提供依據(jù)[9]。

表2 治療前三組受試者血清B2M與血清PSA檢測結果

在本研究中，通過對比分析前列腺癌患者治療前和治療1個月，治療3個月，治療6個月的血清B2M與血清PSA檢測結果可以發(fā)現(xiàn)。治療前血清B2M與血清PSA均處于高水平狀態(tài)。隨著治療進程的推進，患者病情好轉，血清B2M與血清PSA水平逐漸降低。運用pearson相關分析數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)血清B2M與血清PSA水平在各時期呈正相關。其中有5例患者癌細胞發(fā)生轉移，病情加重。檢測發(fā)現(xiàn)，5例患者的血清B2M水平升高，但血清PSA水平出現(xiàn)正?，F(xiàn)象。將治療前前列腺癌患者的血清B2M與血清PSA數(shù)據(jù)與正常人和前列腺增生患者的數(shù)據(jù)進行對比分析發(fā)現(xiàn)，前列腺癌患者和前列腺增生患者的血清PSA水平均高于正常人。前列腺癌患者的血清B2M水平高于前列腺增生患者和正常人，前列腺增生患者的血清B2M水平與正常人無明顯差別[10-11]。

綜上所述，血清B2M與血清PSA在患者進行內分泌治療后在血液中的濃度逐漸降低。兩者的檢測結果呈明顯的正相關，因此血清B2M與血清PSA均可作為前列腺癌的初期診斷標準和預判標準。治療后期，患者病情加重時，血清B2M水平升高，而血清PSA出現(xiàn)正?，F(xiàn)象。血清PSA作為前列腺癌診斷標準時易與前列腺增生發(fā)生重疊，因而血清B2M與血清PSA相比，在前列腺癌的診斷過程中具有更高的特異性。