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        CXCR-2和MMP-9在非小細(xì)胞肺癌癌組織中的表達(dá)水平及其與肺癌侵襲轉(zhuǎn)移的相關(guān)性

        2018-09-10 11:37:22曾媛媛
        西南國(guó)防醫(yī)藥 2018年7期
        關(guān)鍵詞:陽(yáng)性細(xì)胞淋巴結(jié)肺癌

        曾媛媛,劉 哲,雷 舒,李 敏

        相關(guān)數(shù)據(jù)顯示,全球新發(fā)肺癌病例明顯增加,多數(shù)新發(fā)病例在城市人口[1],其中非小細(xì)胞型肺癌(NSCLC)約占所有肺癌的80%。目前,對(duì)于誘導(dǎo)NSCLC產(chǎn)生機(jī)制及NSCLC與炎癥之間關(guān)系的研究較少見(jiàn)[2]。最近有學(xué)者提出,免疫相關(guān)的細(xì)胞因子及與其相關(guān)的調(diào)節(jié)因子涉及NSCLC發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及預(yù)后等各個(gè)方面[3]。本研究擬通過(guò)對(duì)NSCLC組織與癌旁正常肺組織的臨床病理特征進(jìn)行回顧性分析,比較二者間CXCR-2和MMP-9的表達(dá)水平差異,探討CXCR-2和MMP-9與肺癌侵襲轉(zhuǎn)移的相關(guān)性,為NSCLC的發(fā)病機(jī)理研究和臨床診治提供參考。

        1 對(duì)象與方法

        1.1 研究對(duì)象 選取2012年3月~2014年9月醫(yī)院手術(shù)切除的73例NSCLC組織、48例癌旁正常肺組織標(biāo)本,均經(jīng)病理、組織學(xué)檢查確診,所有病例的病理、臨床、隨訪資料均完整;入選病例隨訪時(shí)間截止于2017年9月或者患者死亡。NSCLC組中,患者男 46 例,女 27 例;年齡 26~76(59.3±10.1)歲;腫瘤長(zhǎng)徑≥3.0 cm 44例,腫瘤長(zhǎng)徑<3.0 cm 29例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移27例,無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者46例;高-中分化47例,低-未分化26例。癌旁正常肺組織均距離腫瘤邊緣>5 cm,經(jīng)病理檢查證實(shí)無(wú)腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn);患者年齡 25~76(59.27±10.08)歲。

        1.2 試劑 CXCR-2檢測(cè)用兔抗人CXCR4單克隆抗體、MMP-9檢測(cè)用免疫人多克隆抗體MMP-9均購(gòu)自于北京博奧生物公司;即用型 SP試劑盒、DAB顯色試劑盒均購(gòu)自于北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。

        1.3 標(biāo)本制備[4]組織標(biāo)本經(jīng)石蠟包埋,4 μm厚連續(xù)切片,56℃烘烤 48 h后取出,37℃烤箱過(guò)夜,行免疫組化學(xué)染色。免疫人多克隆抗體MMP-9工作濃度為 1∶25,兔抗人CXCR-2多克隆抗體工作濃度為 1∶25,封閉時(shí)用正常羊血清,工作濃度為 1∶20。染色標(biāo)本在光學(xué)顯微鏡高倍鏡(400倍)下觀察,胞質(zhì)或胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞。染色成功后,任意選擇5個(gè)高倍鏡視野,每個(gè)高倍視野下計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞所占比例分別記分:無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞記為0分;陽(yáng)性細(xì)胞所占比例<30.0%記為1分;陽(yáng)性細(xì)胞所占比例≥30.0%記為2分。另根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)強(qiáng)弱分別記分:未出現(xiàn)著色記為0分;淺黃色或者黃色記為1分;棕黃色記為2分;棕褐色記為3分。將兩項(xiàng)的記分進(jìn)行相乘,0~1分為陰性;2~6分為陽(yáng)性記。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0軟件分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以例和構(gòu)成比表示,采用χ2檢驗(yàn);相關(guān)性分析采用Pearson法,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組CXCR-2和MMP-9陽(yáng)性表達(dá)比較CXCR-2和MMP-9主要定位于NSCLC細(xì)胞的胞質(zhì)中,呈淺黃色至棕黃色顆粒(圖1、2);NSCLC組織CXCR-2和MMP-9陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于癌旁正常肺組織(P<0.05,表 1)。

        表1 兩組CXCR-2和MMP-9陽(yáng)性表達(dá)比較[n(%)]

        圖1 癌旁正常肺組織

        2.2 NSCLC組織CXCR-2和MMP-9表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系 在隨訪過(guò)程中,73例NSCLC患者中,有46例(63.01%)未出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,27例出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,在出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中,24例(88.89%)CXCR2表達(dá)陽(yáng)性,25例 (92.59%)MMP-9表達(dá)陽(yáng)性。腫瘤分期高和出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的NSCLC組織中,CXCR-2和MMP-9的陽(yáng)性表達(dá)率顯著上升(P<0.05),見(jiàn)表 2。

        2.3 CXCR-2和MMP-9表達(dá)與NSCLC侵襲轉(zhuǎn)移的相關(guān)性分析 根據(jù)相關(guān)性結(jié)果顯示,CXCR-2和MMP-9的陽(yáng)性表達(dá)率與NSCLC患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生率均呈正相關(guān)(r=0.437、0.348,P<0.01)。

        3 討論

        近年來(lái),肺癌發(fā)病率呈上升趨勢(shì),且發(fā)病逐漸趨于年輕化[5]。雖然臨床上予以外科手術(shù)及聯(lián)合藥物治療取得了一定的療效,但是,患者的預(yù)后生存率仍然很低,尤其對(duì)于已經(jīng)發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移以及不能切除的肺癌患者的治療仍然十分困難[6]。據(jù)報(bào)道,NSCLC約占所有肺癌的80%,絕大部分患者確診時(shí)已經(jīng)到了癌癥中晚期,5年生存率很低[7]。文獻(xiàn)報(bào)道[8],CXCR-2是腫瘤細(xì)胞常見(jiàn)的趨化因子受體,在腫瘤的相關(guān)轉(zhuǎn)移過(guò)程中起著尤為關(guān)鍵的生物學(xué)作用,在腫瘤中的陽(yáng)性表達(dá)率均較高;基質(zhì)金屬蛋白(MMPs)可以降解機(jī)體組織細(xì)胞外基底膜以及基質(zhì),從而對(duì)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移起促進(jìn)作用,MMP9屬于MMPs家族,腫瘤中MMP 9表達(dá)較高,則腫瘤的浸潤(rùn)性和轉(zhuǎn)移性強(qiáng)[8-9]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),NSCLC組織CXCR-2陽(yáng)性和MMP-9陽(yáng)性表達(dá)率均明顯高于癌旁正常組織,與上述結(jié)論相似,這可能與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),由此推測(cè),CXCR-2和MMP-9表達(dá)與NSCLC患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理特征存在著一定的關(guān)系。

        表2 NSCLC組織中CXCR -2和MMP-9與臨床病理因素的關(guān)系(n=73)

        既往有研究表明[10],炎癥因子的異常表達(dá)會(huì)提高同源細(xì)胞的致癌潛能,也會(huì)提高癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。梁乃超等[11]研究發(fā)現(xiàn),CXCR-2和MMP-9水平被抑制后,可以抑制癌細(xì)胞的生成和轉(zhuǎn)移,同時(shí)降低癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。本研究結(jié)果也發(fā)現(xiàn),CXCR-2和MMP-9高陽(yáng)性表達(dá)患者的臨床分期更晚,浸潤(rùn)深度更深,更容易出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,且本組數(shù)據(jù)還顯示:CXCR-2和MMP-9的陽(yáng)性表達(dá)率與NSCLC患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生率均呈正相關(guān)(P<0.05),與楊大運(yùn)等[12]研究報(bào)道一致。分析原因可能是[12]:CXCR-2和MMP-9的高水平表達(dá)常合并有異?;虻拇嬖?,而相關(guān)異常基因的存在可一定程度上加快癌細(xì)胞的生長(zhǎng),促使其對(duì)脈管等進(jìn)一步產(chǎn)生侵犯,從而隨著血液出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,增加了腫瘤的侵襲行為。

        綜上所述,NSCLC組織中CXCR-2和MMP-9均呈高水平表達(dá),且與腫瘤分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切,二者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)評(píng)估NSCLC侵襲轉(zhuǎn)移和預(yù)后具有指導(dǎo)意義。但本組研究所選樣本量較小,且未研究CXCR-2和MMP-9是否受其他因素的影響,因此,有待進(jìn)一步深入研究證實(shí)。

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