矯麗曼 楊志巖 馮連榮 紀(jì)純陽 韓丹 秦秀義

摘要： En，tomophaga maimaiga是一種天然存在的舞毒蛾幼蟲的專性真菌病原體，本文主要介紹了Entomopha-ga maLmatga國(guó)外相關(guān)的研究進(jìn)展，包括其分布、孢子種類、生物生態(tài)學(xué)特征、孢子特征、檢測(cè)技術(shù)及生防菌Ento-mophaga maimaiga在北美、歐洲及亞洲舞毒蛾防治中的應(yīng)用。介紹了中國(guó)舞毒蛾生物防治方法，并對(duì)En，tomophagamaimaiga在國(guó)內(nèi)的發(fā)展前景進(jìn)行了展望。

關(guān)鍵詞： 舞毒蛾;生防菌Entomophaga maimaiga;分生孢子;休眠孢子

中圖分類號(hào)：S476

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)： 1000-4440（2018） 05-1183-08

舞毒蛾（Lymantria dispar L.）屬鱗翅目（Lepi-doptera）毒蛾科（Lymantridate）毒蛾屬（Lymantria），別名蘋果毒蛾、柿毛蟲、秋千毛蟲，是一種食性廣譜的食葉類害蟲。在中國(guó)，舞毒蛾分布于西北、東北、華東、華北、華南、華中、西南等地區(qū)，它具有分布廣、危害重、食性雜、幼蟲順風(fēng)遷移等特點(diǎn)。1981年，美國(guó)約有6.Oxl06 hm2森林遭受損害，在歐洲舞毒蛾危害發(fā)生也很普遍，在中國(guó)舞毒蛾也經(jīng)常周期性的發(fā)生，是森林、園林、果樹、蠶業(yè)上的一大害蟲，給中國(guó)林業(yè)生產(chǎn)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此有效控制舞毒蛾種群密度，使林木免受危害，是一項(xiàng)長(zhǎng)期而艱巨的任務(wù)。

1986年歐洲舞毒蛾引入北美，而在近年亞洲舞毒蛾也被傳人北美，構(gòu)成北美種群。歐洲舞毒蛾和亞洲舞毒蛾的主要區(qū)別在于，前者雌成蟲不具有飛翔能力，而后者雌蟲具有較強(qiáng)的飛翔能力。據(jù)美國(guó)農(nóng)業(yè)部相關(guān)部門分析數(shù)據(jù)顯示，亞洲舞毒蛾雌成蟲的遷移飛行能力強(qiáng)，而且其寄主范圍比歐洲舞毒蛾廣很多，所以其蔓延和傳播的速度比歐洲舞毒蛾快，如果亞洲舞毒蛾在北美定居，對(duì)北美的危害將比歐洲舞毒蛾更厲害，侵染和傳播能力更強(qiáng)。

舞毒蛾最常用的生物防治方法有昆蟲天敵、核型多角體病毒（LDNPV）、Bt殺蟲劑和昆蟲性信息素等，而在一些國(guó)家和地區(qū)發(fā)現(xiàn)了一種新的生防真菌Enlomophaga maimaiga，它是一種天然存在的舞毒蛾幼蟲的專性真菌病原體。E.maimaiga首先在日本發(fā)現(xiàn)，在當(dāng)?shù)匚瓒径臧l(fā)生后期其群體常會(huì)出現(xiàn)E.maimaiga菌的流行病，經(jīng)常能見到舞毒蛾的群體被E.maimaiga消滅的現(xiàn)象。據(jù)美國(guó)MassachusettsAmherst大學(xué)的Thomas.S教授介紹，E.maimaiga是北美地區(qū)控制舞毒蛾非常有效的生物制劑。而E.maimaiga的研究和應(yīng)用在中國(guó)未見報(bào)道，本文較詳細(xì)介紹E.maimaiga國(guó)外相關(guān)研究進(jìn)展，為其在國(guó)內(nèi)進(jìn)一步研究與應(yīng)用提供參考。

1 E.maimazga的分布、孢子種類及生物生態(tài)學(xué)特征

E.maimaiga是舞毒蛾生物防治菌，屬接合菌門（Zygomycota）、蟲霉目（Entomophthorales）、蟲霉科（Entomophthoraceae）、噬蟲霉屬（Entomophaga），是一種專一性強(qiáng)的蟲生真菌，屬于北半球溫帶鱗翅目幼蟲病原菌En，tomophaga aulicae種群復(fù)合體。

E.maimaiga被認(rèn)為起源于亞洲，目前廣泛分布于北美、歐洲及亞洲的一些國(guó)家和地區(qū)。E.maimaiga通常產(chǎn)生2種類型的孢子，一種是分生孢子，另一種是休眠孢子。分生孢子是在受侵染的蟲體外產(chǎn)生，壽命相對(duì)較短，并在同一時(shí)期被積極地排出以引起感染，一年可形成多次侵染;休眠孢子是尸體內(nèi)產(chǎn)生的厚壁孢子，在形成后通常進(jìn)入休眠，在不利條件下存活，可適應(yīng)不良環(huán)境條件存活數(shù)年，在條件適宜時(shí)會(huì)萌發(fā)對(duì)舞毒蛾進(jìn)行侵染。

E.maimaiga的生命周期與舞毒蛾的發(fā)育正好是同步，春季真菌病原體活動(dòng)與害蟲幼蟲的發(fā)育相一致。它具有對(duì)舞毒蛾毒性強(qiáng)，特異性高，對(duì)其他昆蟲沒有作用等特點(diǎn)。因此，在日本和美國(guó)等國(guó)家，E.maimaiga被公認(rèn)為天然防治舞毒蛾最重要、最有效的生防真菌。

2 E.maimaiga分生孢子和休眠孢子的特性

2.1分生孢子的侵染特性及動(dòng)態(tài)

Ann等采用生物分析法和掃描電鏡法，比較舞毒蛾和4種冬夜蛾亞科（Cuculliine）幼蟲角質(zhì)層上E.maimaiga分生孢子附著和萌發(fā)情況。Cuculliine角質(zhì)層的分生孢子主要分布在大而松散節(jié)間區(qū)域，且很少萌發(fā)，掃描電鏡顯示有一層厚厚粘膜包裹著分生孢子，推測(cè)分生孢子會(huì)被這種厚粘膜包裹，只是松散地附著在幼蟲角質(zhì)層上。而舞毒蛾幼蟲角質(zhì)層上分生孢子也是松散吸附，卻未發(fā)現(xiàn)類似的粘膜包裹。用測(cè)角儀測(cè)定了幼蟲角質(zhì)層的相對(duì)疏水性，舞毒蛾比Cu-culliine更具疏水性，表明高的疏水性可能是影響E.maimaiga分生孢子在角質(zhì)層上附著和萌發(fā)能力的一個(gè)必要因素。用正己烷、甲醇和氯仿依次提取舞毒蛾和4種Cuculliine的角質(zhì)層，將分生孢子淋在不同提取物上，研究發(fā)現(xiàn)，分生孢子在3種舞毒蛾提取物中，大部分產(chǎn)生胚芽管，這是表皮穿透的先決條件。分生孢子在Cuculliine氯仿和正己烷提取物中產(chǎn)生次生分生孢子，減少發(fā)芽，而在Cuculliine甲醇提取物中發(fā)芽產(chǎn)生胚芽管。以上研究結(jié)果表明，舞毒蛾易感染E.maimaiga。

Ann等[8]進(jìn)行了E.maimaiga空氣分生孢子動(dòng)態(tài)研究。1992年，在發(fā)生地森林冠層采集E.maimaiga的空氣分生孢子，密度很高，達(dá)到每1hm2 20000卵塊，但在1993年初期，當(dāng)?shù)匚瓒径攴N群已降到每lhm2 100卵塊，幾乎檢測(cè)不到，舞毒蛾從三齡到化蛹，空氣中E.maimaiga分生孢子偶然發(fā)生，并且當(dāng)?shù)匚瓒径攴N群感染僅在空氣分生孢子生長(zhǎng)第一個(gè)峰值后增加，在達(dá)到峰值后的5—14h分生孢子量與葉片濕度呈正相關(guān)?；\養(yǎng)在地面0.5m處的幼蟲感染也與葉片濕度有關(guān)?；\養(yǎng)在含有E.maimaiga休眠孢子和分生孢子地面的幼蟲在整個(gè)季節(jié)都被感染，而籠養(yǎng)在含有空氣分生孢子的幼蟲偶爾被感染，表明地面幼蟲的感染是由休眠孢子和分生孢子引發(fā)的，而且水分對(duì)分生孢子存活和感染至關(guān)重要。

2.2 休眠孢子的特性、分布及影響因素

Ann等研究9種E.maimaiga菌株在體外和體內(nèi)是否產(chǎn)生休眠孢子。在體外產(chǎn)生分生孢子的3種E.maimaiga菌株，在體內(nèi)也能產(chǎn)生休眠孢子，另外2種僅在體內(nèi)產(chǎn)生休眠孢子。體外產(chǎn)生分生孢子比不產(chǎn)生分生孢子的菌株更頻繁地在體內(nèi)產(chǎn)生休眠孢子。休眠孢子產(chǎn)生隨時(shí)間而變化。經(jīng)過2a以上冷藏后，3種菌株繼續(xù)在體內(nèi)產(chǎn)生休眠孢子，另3種菌株在體內(nèi)不再產(chǎn)生休眠孢子。

Ann等研究了E.maimaiga休眠孢子在土壤和樹皮上不均等的分布。由E.maimaiga致死的舞毒蛾尸體常常附著在樹干上數(shù)周后才脫落并落在地上，這些尸體主要含休眠孢子。采用密度梯度離心法測(cè)定土壤和樹皮中休眠孢子數(shù)量，在離樹基部0—10cm處土壤中休眠孢子滴度最高，并且隨著距離增加而減少，在土壤表層中滴度也非常高，隨著土壤深度的增加，其數(shù)量急劇減少。而從樹皮中獲得的休眠孢子，密度遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于樹基部有機(jī)土壤層。用籠養(yǎng)的舞毒蛾幼蟲進(jìn)行田間生物測(cè)定，比較感染水平與樹基部距離的關(guān)系，感染率最高的是距離樹基部50.0cm處，而最低感染率則在距離樹基部0.5m處。試驗(yàn)結(jié)果表明，舞毒蛾幼蟲在含休眠孢子的土壤表面易受到感染，而被埋藏距土壤表面1cm以下深處的幼蟲，未被休眠孢子感染。

Ann等研究了E.maimaiga休眠孢子的非寄生性：隔離和冷暴露的影響。近期死亡含未成熟休眠孢子的幼蟲尸體在1%水瓊脂20℃下放置14 d后，休眠孢子成熟，這是成熟休眠孢子的接合時(shí)間。將尸體中休眠孢子懸浮液轉(zhuǎn)移至15℃潮濕土壤中，4d后將舞毒蛾幼蟲連續(xù)暴露，持續(xù)196d，生物測(cè)定開始后的24—28d幼蟲中首次發(fā)現(xiàn)感染，且感染潛力持續(xù)196d。發(fā)芽試驗(yàn)證實(shí)了休眠孢子的萌發(fā)。

2.3 E.maimaiga孢子的形成和對(duì)舞毒蛾種群爆發(fā)的影響

Ann等研究E.maimaiga產(chǎn)生孢子類型及影響因子，調(diào)查E.maLmaiga感染舞毒蛾的環(huán)境因子（溫度、光周期、寄主蛻皮狀態(tài)）和真菌因子（分離物、劑量、菌株衰減）與產(chǎn)生分生孢子和休眠孢子的關(guān)系。舞毒蛾尸體產(chǎn)生的孢子包括尸體表面的分生孢子、尸體內(nèi)的休眠孢子或2種孢子同時(shí)存在。對(duì)產(chǎn)生孢子類型影響最大的因素是寄主齡期：二齡幼蟲尸體在任何溫度下幾乎不產(chǎn)生休眠孢子，而五齡幼蟲尸體在較高溫度下產(chǎn)生休眠孢子。光周期是唯一一個(gè)不會(huì)顯著影響孢子產(chǎn)生的因素。休眠孢子產(chǎn)量與蛻皮周期呈負(fù)相關(guān)，在感染和死亡期間蛻皮或表現(xiàn)出蛻皮前期特征的尸體包含較少休眠孢子。增加真菌劑量產(chǎn)生更多的休眠孢子，如同廣泛連續(xù)傳代一樣，同時(shí)導(dǎo)致分生孢子的減少。以上結(jié)果顯示E.maimaiga的寄主狀況以及它周圍的環(huán)境都會(huì)影響產(chǎn)生孢子的類型。

Nielsen等研究舞毒蛾感染E.maimaiga后死亡和孢子形成的日變化，來評(píng)估ld中舞毒蛾死亡時(shí)間是否受E.maimaiga操縱。在15℃和20℃下進(jìn)行室內(nèi)生物測(cè)定，以記錄在光14h/暗10h光周期和100%相對(duì)濕度下24h內(nèi)舞毒蛾幼蟲死亡和孢子形成模式。結(jié)果表明，E.maimaiga感染的舞毒蛾幼蟲主要在下午死亡，并且夜間產(chǎn)生真菌孢子，這種節(jié)律與真菌分離物和幼蟲死亡后產(chǎn)生的孢子類型無關(guān)。將溫度從15℃提高到20℃，致死時(shí)間縮短并且在晚上較早開始孢子形成。

James等研究天氣作用引起E.maimaiga對(duì)舞毒蛾種群爆發(fā)的影響。通過測(cè)量賓夕法尼亞州中部12個(gè)地點(diǎn)3年以上的真菌感染率、土壤濕度、降雨量、溫度和濕度。利用野外采集的幼蟲和實(shí)驗(yàn)室籠養(yǎng)在森林地面上的幼蟲來評(píng)估真菌感染引起的死亡率。水分相關(guān)可變因素（降雨量、相對(duì)濕度和土壤濕度）對(duì)野外采集的幼蟲和實(shí)驗(yàn)室籠養(yǎng)在森林地面上的幼蟲真菌感染引起的死亡率都具有顯著正效應(yīng)。溫度對(duì)野外采集的幼蟲死亡率具有顯著的負(fù)效應(yīng)，對(duì)籠養(yǎng)幼蟲的死亡率沒有明顯影響，可能與休眠孢子和分生孢子引起感染的微氣候效應(yīng)有關(guān)。

3 E.maimaiga的檢測(cè)技術(shù)

Louela等開發(fā)了DNA提取和實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)2種方法，用于檢測(cè)和量化森林土壤有機(jī)層中E.maimaiga休眠孢子。用去污劑和珠磨機(jī)均質(zhì)化處理土壤，然后使用Sephadex-聚乙烯聚吡咯烷酮微柱純化粗DNA提取物，提取土壤中休眠孢子DNA。純化步驟消除了土壤樣品中基因組DNA共提取的大部分環(huán)境污染物，但檢測(cè)試驗(yàn)仍然需要添加牛血清白蛋白以減輕PCR抑制。決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素是土壤背景DNA和共提取污染物。根據(jù)對(duì)不同森林土壤中休眠孢子滴度進(jìn)行比較得出該方法是對(duì)休眠孢子密度相對(duì)較高的有機(jī)土壤評(píng)估最好的方法。

Tonya等設(shè)計(jì)了一種捕獲空氣中分生孢子的孢粉式捕集器，通過定量PCR技術(shù)來檢測(cè)E.maimaiga空氣分生孢子，用于量化空氣分生孢子的沉積。E.maimaiga空氣分生孢子相對(duì)較大（大小與花粉相似），具有特殊特征，并且需要特殊方法進(jìn)行收集和量化。干采樣法因分生孢子的DNA快速降解未被采用。后又設(shè)計(jì)了一種用于孢粉學(xué)的腔室式捕集器，來捕獲緩沖液中沉降孢子。2016年夏季對(duì)賓夕法尼亞州舞毒蛾爆發(fā)區(qū)進(jìn)行了大規(guī)模孢子捕獲調(diào)查，測(cè)試了這種濕捕集方法。在老齡期和蛹發(fā)育期，收集的4d里，檢測(cè)到來自空氣中不同量的分生孢子沉降，數(shù)量隨著季節(jié)和距離新落葉區(qū)域的距離而變化。

Ann等為了提高土壤中E.maimaiga休眠孢子對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性，改進(jìn)和測(cè)試了2種用于E.maimaiga休眠孢子的定量方法。這2種方法用于恢復(fù)時(shí)大于每lg干土100個(gè)的休眠孢子是非常有效的。Weseloh和Andreadis最初描述的改進(jìn)方法比Percoll密度梯度改進(jìn)方法獲得了更多的休眠孢子，但2種方法估算真實(shí)密度的能力是相似的。用2種方法預(yù)測(cè)真實(shí)休眠孢子的密度，回歸方程式的R2值都大于等于0.90。

Louela等研究森林土壤中和E.maimaiga休眠孢子相關(guān)的變異寄生菌檢測(cè)。通過研究發(fā)現(xiàn)舞毒蛾種群在感染水平上表現(xiàn)出高度變異性，一種可能的生物因素是受變異寄生菌攻擊的E.maimaiga休眠孢子在土壤里的持久性。使用誘餌和分子技術(shù)，調(diào)查推定E.maimaiga休眠孢子上的變異寄生菌為子囊菌（Pochonia sp.）和卯菌（Pythiumspp.）。

4 生防困E.maimaiga在舞毒蛾防治中的應(yīng)用

4.1 生防菌E.maimaiga在北美舞毒蛾防治中的應(yīng)用

Theodore等在整個(gè)北美東北部的許多森林和居民區(qū)中發(fā)現(xiàn)E.maimaiga。該菌在舞毒蛾爆發(fā)種群中廣泛流行傳播，它的出現(xiàn)與異常濕潤(rùn)季節(jié)有關(guān)。大多數(shù)真菌感染的舞毒蛾幼蟲在其第四或第五齡期大量死亡，并且其頭部緊貼著樹干指向下方。當(dāng)新死的幼蟲放置在潮濕的環(huán)境中，在舞毒蛾尸體內(nèi)產(chǎn)生厚壁的休眠孢子和感染性的分生孢子。

Charlotte等研究北美初級(jí)種群和亞洲源種群E.maimaiga的遺傳多樣性。E.maimaiga起源于亞洲，它可以抑制舞毒蛾爆發(fā)流行病。亞洲源種群比美國(guó)種群更加多樣化。AFLP數(shù)據(jù)分析結(jié)果表明，北美菌株形成了一個(gè)與日本菌株（除東京外）關(guān)系最密切的分支，沒有檢測(cè)到來自不同地理位置E.maimaiga的形態(tài)變化。

Nathan等評(píng)估美國(guó)中北部E.maimaiga流行病的氣候潛力。調(diào)查了16個(gè)E.maimaiga流行病相關(guān)天氣條件與l 351個(gè)北美地區(qū)氣候條件，根據(jù)CLIMEX氣候相似性的總體指數(shù)，在美國(guó)東部的大部分地區(qū)年度氣候條件與流行病的發(fā)生條件相似。對(duì)1971年至2000年9個(gè)中北部州的月天氣記錄進(jìn)行調(diào)查，比較降水和溫度與E.maimaiga流行期間觀測(cè)到的條件，根據(jù)記錄流行病學(xué)確定的氣候平均值，6個(gè)地區(qū)的溫度和降水條件比另3個(gè)地區(qū)更有利于流行病發(fā)生，這在近30年內(nèi)可能至少有6年的時(shí)間利于E.maimaiga流行病的發(fā)生。

Patrick等研究舞毒蛾種群發(fā)生島嶼上E.maimaiga的釋放和最初傳播，還比較了3個(gè)島嶼上舞毒蛾核型多角體病毒感染率與寄生蟲寄生率。E.maimaiga初始傳播速率為0.8km/a，1年后在距離釋放點(diǎn)6.1 km檢測(cè)到E.maLmaLga存在。在E.maimaiga被釋放的島嶼上，病毒和寄生蟲感染率遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于E.maimaiga感染率，然而，在沒有任何真菌病原體被釋放的情況下，幼蟲的寄生蟲寄生率最高，這表明真菌病原體比幼蟲寄生蟲具有更高的感染率。

Ann等研究了E.maimaiga持久性及其對(duì)土著舞毒蛾的影響，估計(jì)土著舞毒蛾何時(shí)何地可能接觸到E.maimaiga病原菌。野外生物測(cè)定結(jié)果表明，E.maimaiga休眠孢子4月份在樹基部土壤中開始活躍，特別是土壤潮濕時(shí)。

Ann等研究舞毒蛾幼蟲行為對(duì)真菌感染的影響。舞毒蛾老齡幼蟲從樹冠上下來游走，白天在黑暗地方休息。距樹干200～300cm區(qū)域采樣，在地面上發(fā)現(xiàn)舞毒蛾老齡幼蟲占71%。在干凈的土壤表面提供黑暗的休息地點(diǎn)，老齡幼蟲會(huì)在這里迅速定居。在有落葉的地方距離樹干0—50cm與50—200cm相比，舞毒蛾幼蟲更普遍存在。在有E.maimaiga地區(qū)，將幼蟲籠養(yǎng)在光區(qū)或黑暗區(qū)的樹干上、葉子中或土壤表層，ld的2個(gè)時(shí)間里，感染水平最高的總是發(fā)生在土壤上，感染最低的則是葉子中，感染水平光區(qū)高于黑暗區(qū)。在土壤上幼蟲白天暴露30 min和60 min后感染率分別為4.7%和6.1%，隨著暴露時(shí)間延長(zhǎng)，感染率增加。舞毒蛾種群高水平的真菌感染率與老齡舞毒蛾幼蟲強(qiáng)烈的雜物寄居行為有關(guān)。在地面上其他鱗翅目幼蟲的稀有性，可能有助于解釋該真菌病原菌在野外的寄主特異性。

Ann等研究由真菌病原體E.maLmaLga取代顯性病毒病原體控制區(qū)域森林舞毒蛾爆發(fā)。前期的工作結(jié)果表明，降水影響北美舞毒蛾爆發(fā)的時(shí)空模式，間接地影響病原菌感染效應(yīng)：也報(bào)道了舞毒蛾核型多角體病毒是造成舞毒蛾爆發(fā)區(qū)域崩潰死亡的主要因子，然而，在舞毒蛾多發(fā)的美國(guó)大西洋中部地區(qū).E.maimaiga已經(jīng)取代引起寄主種群死亡的主要病毒。真菌和病毒的關(guān)系與當(dāng)?shù)厣锖头巧飾l件有關(guān)，但降水明顯影響真菌和病毒的流行。這項(xiàng)研究結(jié)果證明，E.maimaiga在舞毒蛾爆發(fā)崩潰期間占主導(dǎo)地位，并強(qiáng)調(diào)小范圍微氣候條件也發(fā)揮了重要作用。

4.2 生防菌E.maimaiga在歐洲舞毒蛾防治中的應(yīng)用

Georgi等在保加利亞調(diào)查了E.maimaiga和寄生蟲復(fù)合體與舞毒蛾幼蟲之間的相互作用。在E.maimaiga最初引入橡樹林中9個(gè)地點(diǎn)和通過自然延伸入侵范圍的10個(gè)地點(diǎn)收集舞毒蛾幼蟲?？偣矙z測(cè)4375個(gè)舞毒蛾幼蟲，它們中出現(xiàn)了401個(gè)寄生幼蟲。在這些地點(diǎn)，由寄生蟲引起的寄主死亡率為0—48.5%。新出現(xiàn)的成蟲寄生蟲54個(gè)個(gè)體屬于6個(gè)種類：Compsilura concinnata，Exorista larvarum.Senometopia separata，Sen，ometopia excisa.Drmo inco-spiquo和Zenilia libatrix。其余86.5%的寄生蟲在蛹期死亡，蛹的表面觀察到E.maimaiga休眠孢子，這表明舞毒蛾幼蟲感染了真菌，在寄生蟲體內(nèi)沒有觀察到休眠孢子。寄生蟲高死亡率可能是與E.maimaiga在同一寄主發(fā)育期間競(jìng)爭(zhēng)的結(jié)果。

Contarini等研究了土著舞毒蛾種群對(duì)外來E.maimaiga的不同感染性，評(píng)估了巴爾干地區(qū)未被該真菌侵染的意大利半島及主要島嶼上E.maimaiga對(duì)舞毒蛾種群的有效性和適應(yīng)性。不同生物測(cè)定結(jié)果證實(shí)了E.maimaiga感染舞毒蛾幼蟲，還報(bào)道了該真菌對(duì)同一地區(qū)其他鱗翅類物種缺乏顯著的感染性。

Pilarska等對(duì)保加利亞2種舞毒蛾種群E.maimaiga的建立及流行性進(jìn)行了監(jiān)測(cè)。在卡爾洛沃地區(qū)，1999年引入E.maLmaLga種群，流行時(shí)感染率從6.1%到15.9%不等;由En，doreticulatus sp.（微孢子蟲）引起的感染每年也被記錄，流行發(fā)病率從2.1%和5.0%不等。在斯沃蓋地區(qū)，2000年E.maimaiga被引入，2002年首次發(fā)現(xiàn)，流行感染率從8.8%上升到13.8%。在這2種舞毒蛾種群中由Cotesia melanoscela（柳毒蛾盤絨繭蜂），Protapantelesliparidis（膜翅目，繭蜂科）以及Tachinid（雙翅目，絳蟲科）引起的幼蟲寄生率很低。

Jang等在俄羅斯遠(yuǎn)東濱海邊疆區(qū)研究蛾類寄生蟲復(fù)合體攻擊舞毒蛾，符拉迪沃斯托克3個(gè)地點(diǎn)及濱海邊疆區(qū)中部7個(gè)地點(diǎn)長(zhǎng)期的收集結(jié)果顯示有15種主要寄生蟲和3種病原體：1種卵寄生蟲，11種幼蟲寄生蟲，1種幼蟲一蛹寄生蟲，1種寄生線蟲，1種外寄生蟲以及核型多角體病毒和E.maimaiga在內(nèi)的3種病原菌。絨繭蜂屬（姬蜂科）占據(jù)寄生復(fù)合體主體，符拉迪沃斯托克5.5%舞毒蛾有寄生幼蟲，濱海9. 3%的舞毒蛾有寄生幼蟲，比俄羅斯和東北亞其他地區(qū)寄生率低很多，這2個(gè)地區(qū)昆蟲復(fù)合體有些萎縮。俄羅斯東部平均寄生率為11.8%，與美國(guó)的12.0%相似，這2個(gè)地區(qū)都有大量舞毒蛾爆發(fā)。

Mara等報(bào)道了塞爾維亞爆發(fā)新的昆蟲病原菌E.maLmaLga。在貝爾格萊德和瓦列沃地區(qū)森林中老齡舞毒蛾幼蟲死亡率較高。對(duì)死亡原因的田間和室內(nèi)的研究結(jié)果表明，死亡幼蟲中存在E.maimaiga分生孢子和休眠孢子，塞爾維亞是報(bào)告這種真菌的第三個(gè)歐洲國(guó)家。

Pilarska等報(bào)道了歐洲E.maimaiga首次引入保加利亞南部的一個(gè)種群。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在5個(gè)試驗(yàn)地收集的所有舞毒蛾幼蟲中，6.3%含有E-.maimaiga分生孢子和休眠孢子，14.2%含有寄生蟲，2.3%含有核型多角體病毒（NPV）。從不同采集日期和試驗(yàn)地塊觀察，尸體中有真菌的存在。

Milan等報(bào)道了2013年在斯洛伐克首先發(fā)現(xiàn)E.maimaiga。解剖來自不同種群密度的2個(gè)地點(diǎn)的舞毒蛾老齡幼蟲來評(píng)估病原體的存在。結(jié)果確認(rèn)這2個(gè)地點(diǎn)舞毒蛾尸體中存在E.maimaiga的分生孢子和休眠孢子。

Daniela等報(bào)道了巴爾干半島E.maimaiga流行傳播的概況。經(jīng)過15年時(shí)間，對(duì)保加利亞E.maimaiga的分布進(jìn)行持續(xù)監(jiān)測(cè)，該真菌通過自然傳播或引入方式已經(jīng)在22個(gè)國(guó)家的許多地方存在。保加利亞由于引入E.matmaiga，在過去15年幾乎沒有使用過殺蟲劑，節(jié)省了5.OOx106歐元。在2005年、2010年和2011年E.maimaiga流行病在鄰國(guó)發(fā)生，進(jìn)一步加劇了傳播，到2013年底已經(jīng)擴(kuò)大到整個(gè)巴爾干半島。E.maimaiga真菌目前已引入塞爾維亞、希臘、馬其頓、歐洲的土耳其、克羅地亞、波斯尼亞和黑塞哥維那等部分地區(qū)并傳播，清晰地顯示了其對(duì)舞毒蛾種群的巨大影響，具有在有利氣候條件下阻止舞毒蛾爆發(fā)并在較低水平上維持害蟲種群密度的能力。

Milan等報(bào)道了歐洲E.maimaiga控制舞毒蛾的潛力。1999年，在保加利亞E.maimaiga成功引入舞毒蛾種群，隨后E.maLmaLga在歐洲迅速傳播，真菌的潛力已成為調(diào)節(jié)歐洲舞毒蛾種群的重要因素。

4.3 生防菌E.maimaiga在亞洲舞毒蛾防治中的應(yīng)用

Charlotte等研究亞洲舞毒蛾是否易受北美E.maimaiga菌株侵染。來自亞洲、歐洲和北美的6種E.maimaiga病原菌菌株對(duì)亞洲舞毒蛾都有致病性，所有真菌菌株和舞毒蛾結(jié)合的死亡率都在86%以上，說明亞洲舞毒蛾易受北美E.maimaiga侵染。但這些分離菌株的毒力作用時(shí)間存在差異，俄羅斯菌株作用時(shí)間最慢，日本菌株最快。

Kereselidzea等首次報(bào)道了格魯吉亞地區(qū)E.maimaiga。2005年，格魯吉亞舞毒蛾發(fā)生地區(qū)，舞毒蛾死亡率很高，在幼蟲尸體內(nèi)發(fā)現(xiàn)典型的昆蟲致病真菌休眠孢子，并且分子分析證實(shí)該病原體是E.maimaiga。

5 中國(guó)舞毒蛾生物防治方法

近幾年，舞毒蛾發(fā)生嚴(yán)重，防治困難，該類蟲害生物防治的研究和應(yīng)用在中國(guó)取得了一定的成績(jī)，但都比較滯后。

5.1 昆蟲天敵

據(jù)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示中國(guó)舞毒蛾寄生性昆蟲有57種，其中最多的是幼蟲寄生性天敵，寄生率很高。據(jù)報(bào)道毒蛾絨繭蜂[Apanteles liparidis（Bouche）]對(duì)舞毒蛾的幼蟲寄生率高達(dá)15%—40%，4種舞毒蛾絨繭蜂的自然寄生率為32%，絨繭蜂等天敵對(duì)舞毒蛾前期幼蟲的自然寄生率達(dá)44%。

5.2 舞毒蛾核型多角體病毒（LDNPV）

在國(guó)內(nèi)應(yīng)用比較多的是用噴霧器噴灑舞毒蛾核型多角體病毒來防治舞毒蛾幼蟲，用LDNPV防治后舞毒蛾幼蟲的死亡率達(dá)到80%以上。該方法是舞毒蛾生物防治的重要手段之一，但研究結(jié)果表明該方法防治的害蟲死亡比較慢，需要大約32d，另外病毒的工廠化生產(chǎn)也是影響其推廣應(yīng)用的一個(gè)非常重要的因素。

5.3 Bt殺蟲劑

Bt殺蟲劑是蘇云金桿菌（Bacillus thuringiensis）的簡(jiǎn)稱，是一類比較廣譜的具有選擇性的微生物殺蟲劑，只對(duì)舞毒蛾起作用，對(duì)捕食性動(dòng)物和有益昆蟲沒有影響，對(duì)植物和人沒有害處，是昆蟲類病原細(xì)菌中應(yīng)用最廣最多的一類，也是目前世界上產(chǎn)量最大的一類微生物殺蟲劑。

5.4 昆蟲性信息素

昆蟲性信息素作為一種防治害蟲的手段一直被人們探索利用，但其釋放條件及應(yīng)用環(huán)境受到很大限制。舞毒蛾成蟲趨化性較強(qiáng)，尤其對(duì)雌蛾釋放出的性信息素具有趨向性特征，根據(jù)舞毒蛾的這一特點(diǎn)可采用人工合成的性引誘劑來誘殺舞毒蛾成蟲。根據(jù)研究結(jié)果，溫度是調(diào)節(jié)性信息素分泌周期的重要因子。雌蛾的頭部是產(chǎn)生性信息素調(diào)控因子的主要部位，通過舞毒蛾腹神經(jīng)索傳導(dǎo)的促信息素因子是調(diào)控性信息素的重要因子。

6 生防困E.maimaiga在中國(guó)的應(yīng)用前景

舞毒蛾生防真菌E.maimaiga被認(rèn)為是北美、歐洲和亞洲舞毒蛾害蟲最重要的天敵，它來源于自然界，具有無抗性、無污染、控制作用持久等特點(diǎn)，已在北美等國(guó)家大規(guī)模生產(chǎn)并進(jìn)行了大面積應(yīng)用，目前基本取代化學(xué)農(nóng)藥，并取得了顯著的經(jīng)濟(jì)、社會(huì)和生態(tài)效益。而該生防真菌的研究和應(yīng)用在中國(guó)未見報(bào)道。E.maimaiga菌種及其生產(chǎn)技術(shù)引進(jìn)中國(guó)，必將帶來廣闊的應(yīng)用前景。

（1）生防菌E.maimaiga用于森林舞毒蛾的防治，對(duì)林木舞毒蛾有較強(qiáng)的專一性，對(duì)其他昆蟲無害，它的應(yīng)用必將改變國(guó)內(nèi)舞毒蛾防治依賴化學(xué)農(nóng)藥的局面，同時(shí)還能彌補(bǔ)中國(guó)舞毒蛾生物防治的不足，促進(jìn)對(duì)該類蟲害生物防治的發(fā)展，對(duì)中國(guó)森林蟲害的防治具有重要的意義和推動(dòng)作用，而且還可保證中國(guó)天然林保護(hù)工程、退耕還林工程等的順利實(shí)施。

（2）生防菌E.maimaiga也可應(yīng)用于觀賞樹木、園林、果樹等植物的舞毒蛾防治，具有特殊的防治效果，保護(hù)樹木、園林及果樹等植物免受舞毒蛾的危害，促使它們健康生長(zhǎng)。對(duì)于經(jīng)濟(jì)價(jià)值較大的果樹、觀賞價(jià)值高的樹木等的產(chǎn)量和質(zhì)量都將起著不可估量的作用。

（3）生防菌E.maimaiga在中國(guó)對(duì)外貿(mào)易進(jìn)出口貨物的動(dòng)植物檢疫中也起到重要的作用。中國(guó)北方的一些港口已被美國(guó)動(dòng)植物檢疫局列為可能傳播亞洲舞毒蛾的港口，生防菌E.maimaiga在國(guó)內(nèi)舞毒蛾防治中的應(yīng)用，必將減少中國(guó)境內(nèi)舞毒蛾的爆發(fā)和流行，使進(jìn)出口貨物和船舶免受舞毒蛾的侵襲，減少對(duì)外貿(mào)易動(dòng)植物檢疫帶來的不利影響，促進(jìn)中國(guó)對(duì)外貿(mào)易更好更快的發(fā)展。