劉蘭 張勇倉(cāng) 鐘鏵 次仁久米 王聚樂

中圖分類號(hào) R284 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2018）07-0973-04

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.07.26

摘 要 目的：建立測(cè)定藏藥二十五味珊瑚丸中5種重金屬含量的方法，并考察西藏不同地區(qū)5個(gè)廠家生產(chǎn)的該藥品中重金屬含量情況。方法：以濃硝酸-高氯酸（4 ∶ 1，V/V）消解二十五味珊瑚丸樣品，采用火焰原子吸收分光光度法測(cè)定其中銅（Cu）、鉛（Pb）、鎘（Cd）3種重金屬元素的含量，氫化物發(fā)生原子吸收分光光度法測(cè)定其中砷（As）、汞（Hg）2種重金屬元素的含量。結(jié)果：5種重金屬元素含量檢測(cè)在相應(yīng)質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系均良好（r均≥0.999 1）；Cu、Pb、Cd元素的檢測(cè)限分別為0.001 6、0.041 2、0.036 3 mg/L，定量限分別為0.005 3、0.137 3、0.121 0 mg/L；As、Hg元素的檢測(cè)限分別為0.325 7、0.692 3 μg/L，定量限分別為1.085 7、2.307 7 μg/L；精密度試驗(yàn)的RSD均≤5.54%（n=6）；穩(wěn)定性試驗(yàn)的RSD均≤3.79%；重復(fù)性試驗(yàn)的RSD均≤3.72%；平均加樣回收率為91.34%～110.11%，RSD為0.66%～6.80%（n=6）。含量測(cè)定結(jié)果顯示，5個(gè)廠家的樣品中Cu含量皆未超標(biāo)，但 Cd、Hg含量均超標(biāo)；其中還有4個(gè)廠家樣品中Pb含量超標(biāo)，2個(gè)廠家樣品中As含量超標(biāo)。結(jié)論：建立的含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度、靈敏度較高，且穩(wěn)定性、重復(fù)性較好，適用于二十五味珊瑚丸中5種重金屬含量的測(cè)定；5個(gè)廠家生產(chǎn)樣品均在一定程度上存在重金屬超標(biāo)問題。

關(guān)鍵詞 火焰原子吸收分光光度法；氫化物發(fā)生原子吸收分光光度法；二十五味珊瑚丸；重金屬；含量測(cè)定

ABSTRACT OBJECTIVE： To establish a method for the contents determination of 5 heavy metals in Ershiwuwei shanhu pills，and to investigate the contents of heavy metals in Ershiwuwei shanhu pills produced by 5 manufacturers from different districts of Tibet. METHODS： Ershiwuwei shanhu pills were digested by HNO3-HClO4 （4 ∶ 1，V/V）. The contents of 3 heavy metals as Cu， Pb， Cd in samples were measured by flame atomic absorption spectrometry （FAAS）. The contents of 2 heavy metals as As，Hg in samples were measured by hydride generation atomic absorption spectrometry （HG-AAS）. RESULTS： 5 kinds of heavy metals have good linear relationship in the corresponding mass concentration range （all r≥0.999 1）. The limits of detection of Cu， Pb， Cd were 0.001 6， 0.041 2， 0.036 3 mg/L， and the limits of quantitation were 0.005 3， 0.137 3， 0.121 0 mg/L； the limits of detection of As， Hg were 0.325 7， 0.692 3 μg/L， and the limits of quantitation were 1.085 7， 2.307 7 μg/L. RSDs of precision tests were ≤5.54%（n=6）； RSDs of stability tests were all≤3.79%； RSDs of reproducibility tests were ≤3.72%. The average recovery rates were 91.34%-110.11% （RSDs were 0.66%-6.80%，n=6）. Results of contents determination showed that the contents of Cu in samples from 5 manufacturers were not out of limits， but the contents of Cd and Hg were all out of limits； the contents of Pb in samples from 4 manufacturers were out of limits， and the contents of As in samples from 2 manufacturers were out of limits. CONCLUSIONS： The established method has good accuracy， sensitivity， stability and reproducibility， and it is suitable for contents determination of 5 heavy metals in Ershiwuwei shanhu pills. To some extent，there is a problem of excessive heavy metals in samples from 5 manufacturers.

KEYWORDS Flame atomic absorption spectrometry； Hydride generation atomic absorption spectrometry； Ershiwuwei shanhu pills； Heavy metals； Content determination

二十五味珊瑚丸是由人工麝香、珊瑚、珍珠母、廣木香、紅花、朱砂、榜那等25味藥材組成的復(fù)方制劑[1]，在1997年被原衛(wèi)生部批準(zhǔn)為國(guó)家中藥保護(hù)品種[2]，主要用于白脈病（即神經(jīng)系統(tǒng)疾?。┑闹委煟星鍩岫@、開竅、通絡(luò)、止痛等功效[3-4]，現(xiàn)收載于2015年版《中國(guó)藥典》（一部）中[5]。該藥中的朱砂、青金石、爐甘石、磁石、禹糧土等10味礦物藥是其重要組成部分[6-7]，其中不乏重金屬元素。由于藏藥療程較長(zhǎng)的特點(diǎn)，可能導(dǎo)致重金屬在體內(nèi)蓄積中毒，故而為該藥的使用帶來了較大的風(fēng)險(xiǎn)，極大地影響了該藥的臨床應(yīng)用[8-9]。銅（Cu）、鉛（Pb）、鎘（Cd）、砷（As）、汞（Hg）等重金屬嚴(yán)重影響人體健康[10]，國(guó)際和國(guó)內(nèi)都對(duì)其提出了嚴(yán)格的限量標(biāo)準(zhǔn)[11]。目前，對(duì)二十五味珊瑚丸中重金屬含量的報(bào)道極少，僅有少量關(guān)于其中Hg含量的報(bào)道[12-13]，且2015年版《中國(guó)藥典》（一部）收載的二十五味珊瑚丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下并未對(duì)其重金屬含量進(jìn)行檢查。鑒于此，筆者采用火焰原子吸收分光光度法對(duì)西藏不同地區(qū)5個(gè)廠家生產(chǎn)的二十五味珊瑚丸中Cu、Pb、Cd 3種重金屬元素的含量進(jìn)行分析，并利用氫化物發(fā)生原子吸收分光光度法對(duì)其中As、Hg 2種重金屬元素的含量進(jìn)行分析，為該藥的質(zhì)量控制提供一定的試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

AA-7000型原子吸收分光光度計(jì)與Cu、Pb、Cd、As、Hg空心陰極燈（北京東西分析儀器有限公司）。

1.2 藥品與試劑

二十五味珊瑚丸為分別購(gòu)自西藏拉薩市某藏藥A廠（批號(hào)：15084A，規(guī)格：1 g/丸）、西藏拉薩市某藏藥B廠（批號(hào)：150201，規(guī)格：1 g/丸）、西藏山南市某藏藥C廠（批號(hào)：150401-180，規(guī)格：1 g/丸）、西藏日喀則市某藏藥D廠（批號(hào)：150401，規(guī)格：0.25 g/丸）、西藏昌都市某藏藥E廠（批號(hào)：140901，規(guī)格：0.25 g/丸）；Cu、Pb、Cd、As、Hg元素的標(biāo)準(zhǔn)溶液（國(guó)家鋼鐵材料測(cè)試中心，批號(hào)分別為：GSB G 62024-90、GSB G 62071-90、GSB G 62040-90、GSB G 62028-90、GSB G 62069-90，質(zhì)量濃度均為1 000 mg/L）；濃硝酸、高氯酸等均為分析純，水為蒸餾水。

2 方法與結(jié)果

2.1 儀器工作條件

采用火焰原子吸收分光光度法測(cè)定Cu、Pb、Cd含量，儀器工作條件見表1。采用氫化物發(fā)生原子吸收分光光度法測(cè)定As、Hg含量，儀器工作條件見表2。

2.2 溶液的制備

2.2.1 供試品溶液的制備 將二十五味珊瑚丸用研缽研成粉末，干燥，準(zhǔn)確稱取干粉 1.0 g于 100 mL錐形瓶中，加入15 mL混合酸液（HNO3與HClO4體積比為4 ∶ 1），輕輕振搖使混合酸液面浸沒樣品，靜置48 h。置電爐上加熱消解至溶液澄明后，繼續(xù)加熱消解至冒濃白煙，直至白煙散盡，消解液呈微黃色，放冷，轉(zhuǎn)入50 mL量瓶中，用 2%HNO3溶液洗滌錐形瓶3次，洗液合并于量瓶中， 2%HNO3溶液定容，搖勻，即得。

2.2.2 空白溶液的制備 不加二十五味珊瑚丸粉末樣品，其余方法同“2.2.1”項(xiàng)下，制備缺藥品的空白溶液。

2.2.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 分別取“1.2”項(xiàng)下Cu、Pb、Cd、As、Hg元素的標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 000 mg/L）適量，用2%HNO3為溶劑制備系列質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液：Cu為0.312 5、0.625 0、1.250 0、2.500 0、5.00 00 mg/L，Pb為0.625 0、1.250 0、2.500 0、5.000 0、10.000 0 mg/L，Cd為0.0312 5、0.062 5、0.125 0、0.250 0、0.500 0 mg/L，As為6.250 0、12.500 0、25.000 0、50.000 0、100.000 0 μg/L，Hg為6.250 0、12.500 0、25.000 0、50.000 0、100.000 0 μg/L。

2.3 線性關(guān)系考察

分別量取“2.2.3”項(xiàng)下各元素標(biāo)準(zhǔn)品溶液適量，參考2015年版《中國(guó)藥典》（四部）通則0406第一法測(cè)定[14]，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（x）、吸光度為縱坐標(biāo)（y）作圖，求出回歸方程。結(jié)果顯示，5種重金屬元素檢測(cè)在相應(yīng)質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系均良好（r均≥0.999 1），5種重金屬元素的線性范圍測(cè)定結(jié)果見表3。

2.4 檢測(cè)限與定量限考察

對(duì)空白溶液進(jìn)行20次測(cè)定，記錄其吸光度的標(biāo)準(zhǔn)偏差δ，S為工作曲線的斜率，以3 δ/S為檢測(cè)限，10 δ/S為定量限。結(jié)果表明，Cu、Pb、Cd元素的檢測(cè)限分別為0.001 6、0.041 2、0.036 3 mg/L，As、Hg元素的檢測(cè)限分別為0.325 7、0.692 3 μg/L；Cu、Pb、Cd元素的定量限為0.005 3、0.137 3、0.121 0 mg/L，As、Hg元素的定量限分別為1.085 7、2.307 7 μg/L。

2.5 精密度考察

取“2.2.3”項(xiàng)下各元素標(biāo)準(zhǔn)品溶液（Cu、Pb、Cd、As、Hg溶液的質(zhì)量濃度分別為5.000 0 mg/L、10.000 0 mg/L、0.500 0 mg/L、100.000 0 μg/L、100.000 0 μg/L）適量，然后按“2.1”項(xiàng)下儀器工作條件進(jìn)樣測(cè)定，平行測(cè)定6次。結(jié)果，Cu、Pb、Cd、As、Hg含量的RSD分別為0.78%、0.03%、0.56%、5.54%、3.29%（n=6）。結(jié)果表明，方法精密度較好。

2.6 穩(wěn)定性考察

取“2.2.1”項(xiàng)下供試品溶液（樣品來源于C廠）適量，室溫下分別放置 0、2、4、8、12 h，然后按“2.1”項(xiàng)下儀器工作條件進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果，Cu、Pb、Cd、As、Hg含量檢測(cè)的RSD分別為0.70%、0.31%、0.88%、3.79%、3.68%（n=5）。結(jié)果表明，供試品溶液在室溫下放置 12 h較為穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性考察

精密稱取同一批樣品（來源于C廠）適量，按“2.2.1”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，共6份，分別按“2.1”項(xiàng)下儀器工作條件進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果，Cu、Pb、Cd、As、Hg的平均含量分別為 8.264 2、2.086 7、3.196 9、0.412 4、1.415 1 mg/kg，RSD分別為1.40%、0.72%、1.39%、3.72%、3.27%（n=6）。結(jié)果表明，本方法重復(fù)性良好。

2.8 準(zhǔn)確度考察

取已知重金屬含量的樣品粉末（來源于C廠）約0.3 g，共6份，再分別加入已知含量的Cu、Pb、Cd、As、Hg標(biāo)準(zhǔn)溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，分別按“2.1”項(xiàng)下儀器工作條件進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果，5種重金屬元素的平均加樣回收率為91.34%～110.11%（RSD為0.66%～6.80%）。結(jié)果表明，該方法準(zhǔn)確度較高，結(jié)果見表4。

2.9 樣品含量測(cè)定

取5個(gè)廠家樣品，按“2.2.1”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，然后按“2.1”項(xiàng)下儀器工作條件進(jìn)樣測(cè)定，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算二十五味珊瑚丸中5種重金屬的含量。結(jié)果，不同廠家樣品中重金屬含量差異較大，Cu元素的含量范圍為8.208 1～10.294 0 mg/kg，Pb元素的含量范圍為2.027 5～18.720 3 mg/kg，Cd元素含量范圍為2.879 9～3.654 9 mg/kg，As元素的含量為0.319 8～12.325 4 mg/kg，Hg元素含量為0.717 1～4.974 2 mg/kg，結(jié)果見表5。

3 討論

參照我國(guó)《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》中重金屬限量標(biāo)準(zhǔn)[15]：Cu元素含量應(yīng)≤20.0 mg/kg，Pb元素含量應(yīng)≤5.0 mg/kg，Cd元素含量應(yīng)≤0.3 mg/kg，As元素含量應(yīng)≤2.0 mg/kg，Hg元素含量應(yīng)≤0.2 mg/kg。本研究結(jié)果顯示，5個(gè)廠家的樣品中Cu含量均未超出限量，Cd、Hg含量均超出了限量，5個(gè)廠家中僅有C廠生產(chǎn)的樣品中Pb含量未超出限量，A、E 2個(gè)廠家生產(chǎn)的樣品中As含量均超出了限量。

由于二十五味珊瑚丸樣品在制備成溶液后，其中的Cu、Pb和Cd元素在乙炔-空氣產(chǎn)生的火焰中可以有效地被原子化，產(chǎn)生理想的檢測(cè)信號(hào)，加之火焰原子吸收法具有重現(xiàn)性好、分析速度快、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，所以筆者采用空氣-乙炔火焰原子吸收分光光度法測(cè)定樣品中的Cu、Pb和Cd含量。參考2015年版《中國(guó)藥典》（四部）通則0406第一法[14]，樣品溶液中的As和Hg元素在酸性介質(zhì)中被還原成低沸點(diǎn)、易分解的氫化物或者蒸氣，然后在吸收池中被原子化，再進(jìn)行原子吸收信號(hào)的檢測(cè)，可以得到較準(zhǔn)確的結(jié)果，所以本研究采用氫化物發(fā)生原子吸收分光光度法測(cè)定樣品中As和Hg元素含量。

二十五味珊瑚丸生產(chǎn)廠家眾多，為較全面地反映其中重金屬的含量情況，筆者選擇西藏4個(gè)不同地區(qū)的5個(gè)廠家的產(chǎn)品作為檢測(cè)樣品。結(jié)果表明，5個(gè)廠家的產(chǎn)品都有一定程度的重金屬超標(biāo)問題。結(jié)合之前針對(duì)藏藥重金屬含量的一些研究[16]，發(fā)現(xiàn)二十五味珊瑚丸等藏藥的重金屬超標(biāo)問題已不容忽視。

綜上所述，本研究采用原子吸收分光光度法測(cè)定了二十五味珊瑚丸中Cu、Pb、Cd、As、Hg 5種重金屬元素的含量，方法準(zhǔn)確、可靠，結(jié)果可為二十五味珊瑚丸的質(zhì)量控制提供重要的試驗(yàn)依據(jù)。

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（收稿日期：2017-09-05 修回日期：2017-11-28）

（編輯：林 靜）